結(jié)石通膠囊快速檢測方法研究

★　戴希希　盛開　祝興國　陳艷梅　王仕平　(.撫州市食品藥品檢驗(yàn)所　江西 撫州 44000；.江西紅星藥業(yè)有限公司　江西 東鄉(xiāng)800；.宜春市食品藥品檢驗(yàn)所　江西 宜春6000)

結(jié)石通膠囊快速檢測方法研究

★戴希希1盛開1祝興國1陳艷梅2王仕平3(1.撫州市食品藥品檢驗(yàn)所江西 撫州 344000；2.江西紅星藥業(yè)有限公司江西 東鄉(xiāng)331800；3.宜春市食品藥品檢驗(yàn)所江西 宜春336000)

摘要：目的：建立能應(yīng)用于藥品檢測車上的結(jié)石通膠囊快速檢測方法。方法：采用近紅外光譜分析及顯微、薄層快速鑒別。結(jié)果：近紅外光譜分析法能快速準(zhǔn)確地鑒定結(jié)石通膠囊真?zhèn)危@微、薄層方法能進(jìn)一步驗(yàn)證結(jié)果。結(jié)論：本方法簡便、快速、準(zhǔn)確、專屬性較強(qiáng)，可用于結(jié)石通膠囊的快速檢測。

關(guān)鍵詞：結(jié)石通膠囊；近紅外光譜；顯微、薄層；鑒別

江西紅星藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的結(jié)石通膠囊為全國獨(dú)家品種，主要組成藥材為廣金錢草、玉米須、石韋、雞骨草、茯苓、車前草、海金沙草、白茅根。具有清熱利濕，通淋排石，鎮(zhèn)痛止血。用于泌尿系統(tǒng)感染，膀胱炎，腎炎水腫，尿路結(jié)石，血尿，淋瀝混濁，尿道灼痛等功效[1]。

由于其暢銷、療效好，在市場上曾經(jīng)出現(xiàn)過假冒品種，有的假冒品種成分與結(jié)石通膠囊較為相似，而按標(biāo)準(zhǔn)(國家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)YBZ01552006)檢驗(yàn)，不僅費(fèi)時(shí)，而且消耗大，不便于區(qū)分假冒品種與正品的快速、準(zhǔn)確檢測。為此，筆者按照國食藥監(jiān)稽[2012]252號文 “加快推進(jìn)藥品快速檢測技術(shù)研究與應(yīng)用工作的指導(dǎo)意見”精神，結(jié)合當(dāng)前基層藥品監(jiān)管大量使用藥品檢測車及檢測箱快速檢測的特點(diǎn)，擬參照中國食品藥品檢定研究院制定的“國家基本藥物和進(jìn)口藥物近紅外光譜快速比對模型建模技術(shù)規(guī)范”對結(jié)石通膠囊開展能應(yīng)用于藥品檢測車上的快速檢測方法研究[2]，具體研究內(nèi)容如下。

1儀器與試藥

Matrix-F型近紅外光譜儀、手持1.5m固體光纖探頭(德國Bruker 公司)；OPUS 5.0 操作軟件(德國Bruker 公司)；FinePixHS11照相顯微鏡(萊卡)。

結(jié)石通膠囊12批正品(江西紅星藥業(yè)有限公司，批號為：J120501、J120602、J120701、J120903、J121001、J121203、J130107、J130301、J130502、J130601、J130803、J131208，規(guī)格為0.35g/粒)。3批假冒結(jié)石通膠囊(標(biāo)示為江西紅星藥業(yè)有限公司，批號為：J120202、J120203、J120304，規(guī)格為0.35g/粒)，為當(dāng)?shù)厮幈O(jiān)部門所查獲，并經(jīng)藥廠確認(rèn)為假藥；3批結(jié)石清膠囊(由江西紅星藥業(yè)有限公司提供，批號為：20120102、20120501、20120701，規(guī)格為0.5g/粒)；3批結(jié)石康膠囊(由江西紅星藥業(yè)有限公司提供，批號為：130117、120613、120901，規(guī)格為0.38g/粒)；3批消石膠囊(由江西紅星藥業(yè)有限公司提供，批號分別為：900004、100021、100301，規(guī)格為0.31g/粒)。

2方法與結(jié)果

2.1近紅外光譜分析

2.1.1樣品分組 將樣品分2組，正品作為建模組，另外偽品和其他樣品為驗(yàn)證組。

2.1.2近紅外光譜采集條件 用近紅外光譜儀光纖附件采集樣品的近紅外光譜，掃描范圍：12000～4000cm-1；掃描次數(shù)：32；分辨率：8 cm-1；掃描速度：10kHz；以內(nèi)置背景為參考；檢測器：半導(dǎo)體制冷銦鎵砷探測器；采樣模式：漫反射方式；溫度、濕度：20℃、60%。

2.1.3近紅外光譜采集及處理 取樣品膠囊，單層膠囊部分朝下輕輕磕使膠囊粉末填滿待測端。先進(jìn)行光譜儀的PQ測試，再將光纖探頭插入背景槽中作背景測試，然后將近紅外光譜儀光纖探頭抵住并緊貼膠囊(單層膠囊部分)采集樣品的原始光譜，每批樣品重復(fù)測定6 次，得建模組與驗(yàn)證組的原始光譜圖。見圖1。

圖1　近紅外原始圖譜

1-結(jié)石通膠囊;2-結(jié)石通膠囊偽品;3-其它類似品種

2.1.4建立一致性驗(yàn)證模型在 OPUS 的一致性模型設(shè)置模塊中，分別調(diào)入“2.1.3”項(xiàng)下測定所得的建模組原始光譜圖和驗(yàn)證組原始光譜圖，選擇一階倒數(shù)加矢量歸一化預(yù)處理數(shù)據(jù)，取9002.7～7498.4cm-1、6900.5～5596.8cm-1、5400.1～4296.9cm-1譜段范圍，設(shè)定CI 限度為7.0，建立樣品的一致性檢驗(yàn)?zāi)Ｐ?。?yàn)證結(jié)果與實(shí)際結(jié)果相符。藍(lán)色為驗(yàn)證組，綠色為建模組，見圖2。

2.1.5建立相關(guān)系數(shù)模型 在 OPUS 的相關(guān)系數(shù)模型設(shè)置模塊中，調(diào)入“2.1.3”項(xiàng)下測定所得的建模組原始光譜。

圖2　一致性性檢驗(yàn)?zāi)Ｐ虲I示意圖

圖中一張光譜，選擇一階導(dǎo)數(shù)預(yù)處理數(shù)據(jù)，取6200-5500cm-1及5000-4700cm-1譜段范圍，設(shè)定閾值為97.0%，建立樣品的相關(guān)系數(shù)模型。時(shí)能較好的分開其他品種的光譜，故選擇閾值為97.0% 。調(diào)入“2.1.3”項(xiàng)下測定所得建模組原始光譜圖和驗(yàn)證組原始光譜圖驗(yàn)證。結(jié)果見表1，結(jié)果都較理想，說明該模型的參數(shù)可以使用。

表1　相關(guān)系數(shù)模型驗(yàn)證結(jié)果

2.2顯微鑒別取結(jié)石通膠囊粉末，置顯微鏡下觀察，可見不規(guī)則顆粒狀團(tuán)塊，無色，遇水合氯醛融化。偶見無色或淡棕色菌絲，稍彎曲，有分支，直徑3-8 μm，少數(shù)至16 μm 。偽品中則未見無色或淡棕色菌絲。

2.3薄層色譜鑒別取結(jié)石通膠囊5粒，研細(xì)，加甲醇30mL，超聲處理30min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0mL，使溶解移至分液漏斗中，加乙醚振搖提取3次，每次20mL,合并醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状?mL，溶解作為供試品，另取綠原酸對照品，加甲醇制成每1mL含1mg的綠原酸。照薄層色譜法(中國藥典2010年一部附錄VIB)，取供試品溶液10μL，綠原酸對照品5 μL，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。取偽品同法操作，未見相同顏色的斑點(diǎn)。

綜上表明，近紅外一致性檢驗(yàn)及相關(guān)系數(shù)模型能有效區(qū)分開相似品種及假冒品種，顯微、薄層方法能進(jìn)一步驗(yàn)證結(jié)果的準(zhǔn)確性，該方法在打擊假冒藥品時(shí)具有較好的專屬性、準(zhǔn)確性。

3討論

目前各級藥檢所配備的藥品檢測車上均配備了車載近紅外儀，顯微鏡及薄層色譜系統(tǒng)，故該方法能順利的運(yùn)用于藥品檢測車上，近紅外方法參照了中國食品藥品檢定研究院制定的“國家基本藥物和進(jìn)口藥物近紅外光譜快速比對模型建模技術(shù)規(guī)范”制定，計(jì)劃通過一年的實(shí)踐驗(yàn)證后，按程序上報(bào)至中檢院的近紅外模型庫，使該模型在全國藥品檢測車上都能使用。應(yīng)用于基層的監(jiān)督檢查，提高結(jié)石通膠囊現(xiàn)場初篩的陽性率，快速的打擊假冒偽劣[3]。

薄層色譜方法采用多種較簡易的前處理方法嘗試，效果均不理想，最后采用了超聲及萃取的方法，該法仍較繁瑣，還有待進(jìn)一步簡化，以方便運(yùn)用了現(xiàn)場實(shí)際操作[4]。

參考文獻(xiàn)

[1]陳華龍,譚小勇,譚莉萍,等. 結(jié)石通片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2010,16(8):77-80.

[2]中國食品藥品檢定研究院標(biāo)化所標(biāo)準(zhǔn)化研究室.國家基本藥物和進(jìn)口藥物近紅外光譜快速比對模型建模技術(shù)規(guī)范[M].北京,2013:146-148.

[3]運(yùn)海龍,王新鳳.結(jié)石通片中茯苓、雞骨草、石韋 的鑒別方法探討[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2002,24(6):376-377.

[4]石曉峰,劉東彥,李爽,等.RP-HPLC法同時(shí)測定雪松松針中楊梅素、槲皮素和山柰酚的含量[J].藥物分析雜志,2012,32(9):1 550-1 553.

Study on the Rapid Detection Method of Jieshitong Capsules

DAI Xi-xi1,SHENG Kai1,ZHU Xing-guo1,CHEN Yan-mei2,WANG Shi-ping3

1.FuzhouInstituleforDrugControl,Fuzhou344000,China;

2.JiangxiHongxingPharmaceuticalCo.Ltd.Dongxiang331800 ,China;

3.YichunInstituleforDrugControl,Yichun336000,China.

Abstract:Objective：To establish a rapid detection method for jieshitong capsules which can be used in the drug testing vehicles.Methods:using near infrared spectroscopy (NIR) and microscopy, thin layer identification.Results:The results of near infrared spectroscopy analysis method can rapidly and accurately identify the authenticity of jieshitong capsules, micro, TLC method can further verify the results.Conclusion:the method is simple, rapid, accurate,with good specificity,It can be used for rapid detection of jieshitong capsules.

Key words:Jieshitong capsules;NIR; Microscopic;TLC;Identify

收稿日期：(2014-10-10) 編輯:曾文雪

中圖分類號：R286.0

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A