C a d m1與E-c a d h e r i n在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及臨床意義

陳艷，張小偉，徐婷婷

（東陽(yáng)市人民醫(yī)院，浙江 東陽(yáng)322100）

·臨床研究·

C a d m1與E-c a d h e r i n在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及臨床意義

陳艷，張小偉，徐婷婷

（東陽(yáng)市人民醫(yī)院，浙江 東陽(yáng)322100）

目的探討Cadm1和E-cadherin在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及意義。方法采用EnVision二步法檢測(cè)Cadm1，E-cadherin在80例癌旁結(jié)直腸黏膜組織 （距腫塊＞5cm）和80例結(jié)直腸癌中的表達(dá)。結(jié)果（1）Cadm1和E-cadherin在癌旁結(jié)直腸黏膜組織中的表達(dá)陽(yáng)性率顯著高于結(jié)直腸癌組織，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （均P＜0.05）；（2）Cadm1，E-cadherin的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、浸潤(rùn)深度有關(guān)（均P＜0.05），與性別、年齡、腫瘤大小、分化程度無(wú)顯著關(guān)系。結(jié)論Cadm1，E-cadherin在結(jié)直腸癌中的表達(dá)下調(diào)，與結(jié)直腸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系。

結(jié)直腸癌；Cadm1；E-cadherin

結(jié)直腸癌又稱為大腸癌，是最常見的消化道惡性腫瘤之一，其發(fā)病率在我國(guó)僅次于胃癌。隨著我國(guó)人口的老齡化，其發(fā)病率大幅度增加。尋找腫瘤轉(zhuǎn)移的標(biāo)記物是臨床研究的重要任務(wù)。本文應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)Cadm1，E-Cadherin在80例結(jié)直腸癌及癌旁結(jié)直腸黏膜組織中的表達(dá)，初步探討兩者在結(jié)直腸癌中的表達(dá)與臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2011年1月～2013年8月在本院行手術(shù)切除標(biāo)本，按診斷分為癌旁結(jié)直腸黏膜組織和結(jié)直腸癌組織各80例。癌旁結(jié)直腸黏膜組織80例（距腫塊長(zhǎng)徑＞5cm），其中男31例，女49例，年齡35～74歲，平均（42.5士9.3）歲；結(jié)直腸癌患者術(shù)前均未行化放療，其中結(jié)腸癌42例，直腸癌38例，男46例，女34例，年齡38～75歲，平均（46.7±10.3）歲。

1.2方法 標(biāo)本全部經(jīng)10%中性福爾馬林固定，固定時(shí)間大于6小時(shí)，常規(guī)脫水，石蠟包埋，HE染色，低倍鏡觀察，免疫組化采用EnVision二步法，DAB顯色，蘇木素核復(fù)染，Cadm1鼠抗人單克隆抗體（即用型）、E-cadherin鼠抗人單克隆抗體（即用型）均購(gòu)于上?；蚩萍加邢薰?，用已知陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照，用PBS緩沖液代替一抗作為陰性對(duì)照。Camd1細(xì)胞膜和細(xì)胞漿出現(xiàn)黃色為陽(yáng)性，E-cadherin細(xì)胞膜出現(xiàn)黃色為陽(yáng)性。計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)并賦予分值，≤5%為0分，6%～25%為1分，26%～50%為2分，5l%～75%為3分，＞75%為4分；觀察著色強(qiáng)度并賦予對(duì)應(yīng)分值，無(wú)著色為0分，淺黃色為1分，黃色為2分，棕黃色為3分，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)分值和染色強(qiáng)度分值相乘，0分為 （-），1～4分為（+），5～8分為（++），9～12分為（+++）。將其中（-）～（+）歸為陰性表達(dá)，（++）～（+++）歸為陽(yáng)性表達(dá)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和Pearson線性相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1Cadm1和E-cadherin的表達(dá) Cadm1在80例結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)率為31.3%（25/80），在癌旁結(jié)直腸黏膜組織中的表達(dá)率為 95.0%（76/ 80），兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；E-cadheirn在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)率為26.3%（21/80），在癌旁胃黏膜組織中的表達(dá)率為97.5%（78/80），兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2Cadm1、E-cadherin的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系 觀察Cadm1、E-cadherin與性別、年齡、腫塊大小、分化情況和TNM分期、浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移這些臨床病理因素的關(guān)系，結(jié)果表明Cadm1和E-cadheirn與結(jié)直腸癌的浸潤(rùn)深度、臨床分期和有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（均P＜0.05），與其它臨床病理因素?zé)o關(guān)。詳見表1。

表1 Cadm1、E-caherin的表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理因素的關(guān)系（n，%）

2.3Cadm1與E-caherin的表達(dá)關(guān)系 Cadm1與E-cadherin兩者相關(guān)系數(shù)r=0.835（P＜0.05），有較高的相關(guān)性，詳見表2。

表2 Cadm1、E-cadherin在結(jié)直腸癌中的表達(dá)相關(guān)性

3 討論

結(jié)直腸癌在我國(guó)發(fā)病率僅次于肺癌和胃癌，發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)。Cadm1（cell adhesion molecule 1）是位于人類染色體11q23.2處的一個(gè)新的抑癌基因，屬于細(xì)胞黏附分子中免疫球蛋白超家族成員，在非小細(xì)胞肺癌中被發(fā)現(xiàn)。Cadm1可以通過抗增殖及促凋亡活性抑制腫瘤的生長(zhǎng)，Cadm1功能喪失能導(dǎo)致癌細(xì)胞浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移。Kanayo等[1]采用免疫組化方法發(fā)現(xiàn)，Cadm1的表達(dá)與腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤(rùn)呈負(fù)相關(guān)，以往研究Cadm1表達(dá)下調(diào)在肺癌、乳腺癌[2]、胃癌[3]、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、食管鱗狀細(xì)胞癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤等中也被發(fā)現(xiàn)。有研究發(fā)現(xiàn)有部分大腸癌細(xì)胞Cadm1表達(dá)下調(diào)，提示正常大腸上皮細(xì)胞表達(dá)Cadm1減少后會(huì)影響細(xì)胞正常的黏附功能，導(dǎo)致正常細(xì)胞向癌細(xì)胞特征性轉(zhuǎn)變，并獲得浸潤(rùn)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的惡性細(xì)胞表型。在本組中結(jié)直腸癌旁黏膜組織中的Cadm1表達(dá)率為95%，但結(jié)直腸癌組織中表達(dá)率為31.3%，提示Cadm1表達(dá)下調(diào)與結(jié)直腸癌的發(fā)生關(guān)系密切。Cadm1在結(jié)直腸癌浸潤(rùn)越淺表，臨床分期越早及無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中表達(dá)越高，提示Cadm1表達(dá)下調(diào)與結(jié)直腸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系。

E-cadherin是一種經(jīng)典的Ⅰ型黏附分子，為鈣依賴性跨膜黏附分子，參與細(xì)胞的識(shí)別及特異性黏附，主要存在于上皮細(xì)胞，對(duì)維持正常上皮細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)的完整性起著重要作用。它通過連環(huán)蛋白與收縮骨架相連，是維持細(xì)胞極性及上皮組織完整性的基礎(chǔ)。如果E-cadherin減少或缺失，細(xì)胞間黏附也會(huì)受到破壞，細(xì)胞就會(huì)免于接觸抑制，腫瘤細(xì)胞因此易于脫離瘤體，導(dǎo)致腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移。以往許多研究表明，多種惡性腫瘤如胃癌[4]、膽囊癌、胰腺癌、膀胱尿路上皮癌[5]、原發(fā)性肝癌[6]、肺癌、乳腺癌等均發(fā)現(xiàn)E-cadherin表達(dá)減少或缺失，使癌細(xì)胞間的黏附力減弱，造成癌細(xì)胞容易分散，脫離原發(fā)灶而向外侵襲性生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。有研究發(fā)現(xiàn)，早期結(jié)腸癌中E-cadherin的表達(dá)就已經(jīng)出現(xiàn)下調(diào)，目前認(rèn)為E-cadherin隨著大腸癌的進(jìn)展及轉(zhuǎn)移，其表達(dá)下調(diào)越來越明顯。本組中結(jié)直腸癌旁黏膜組織中的E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)率為97.5%，但結(jié)直腸癌組織中表達(dá)率為26.3%，提示其表達(dá)下調(diào)與結(jié)直腸癌的發(fā)生密切相關(guān)。E-cadheirn在結(jié)直腸癌浸潤(rùn)越淺表，臨床分期越早及無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中表達(dá)越高，提示E-cadherin表達(dá)下調(diào)與結(jié)直腸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系。

綜上所述，結(jié)直腸癌中Cadm1和E-cadherin表達(dá)下調(diào)，兩者在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用。

[1]Kanayo T，Douglas JT，Marilyn PW，et al.Cell adhesion molecule1（CADM1）is ubiquitously present in the endothelium and smooth muscle cells of the human macro-and microvasculature.Histochemistry and cell biology，2012，138（5）：815

[2] Yuka T，Miwako I，Taketo K，et al.Aberrant expression of tumor suppressors CADM1 and 4.1B in invasive lesions of primary breast cancer.Breast cancer，2012，19（3）：242

[3] 郭曉鶴，張彩鳳，夏永華，等.CADM1過表達(dá)對(duì)人胃癌MKN-45細(xì)胞增殖和侵襲的影響及其分子機(jī)制.中國(guó)病理生理雜志，2012，28（12）：2283

[4] Sun GY，Wu JX，Wu JS，et al.Caveolin-1，E-cadherin and βcatenin in Gastric Carcinoma，PrecancerousTissuesand Chronic Non-atrophic Gastritis.Chinese Journal of Cancer Research，2012，24（1）：23

[5] 徐衛(wèi)波，侯俊清，劉廣超，等.基質(zhì)金屬蛋白酶-2與E-鈣黏素在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及其意義.中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2013，30（11）：2436

[6] 李裕明，韓克強(qiáng)，鄭璐，等.上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化標(biāo)志物E-cadherin和Vimentin在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)及其臨床意義.中華肝臟病雜志，2013，21（4）：279