黃 敏,秦媛儀,林 琳
(廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院,廣東 廣州 510150)
糖尿病腎病患者血清8-羥基脫氧鳥苷與心臟-腳踝血管指數(shù)的關(guān)系
黃 敏,秦媛儀,林 琳
(廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院,廣東 廣州 510150)
目的 探討血清8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)和心臟-腳踝血管指數(shù)(CAVI)與糖尿病腎病(DN)的關(guān)系。方法 隨機(jī)選擇60例DN患者作為DN組、70例2型糖尿病(T2DM)患者作為DM組,65例健康體檢者作為正常組,測(cè)定各組受檢查血清8-OHdG、24 h尿微量白蛋白水平及CAVI水平。結(jié)果 8-OHdG水平和CAVI DN組高于DM組(P均<0.05),DM組高于正常組(P均<0.05)。DN組中,大量蛋白尿組8-OHdG水平和CAVI明顯高于微量蛋白尿組(P均<0.05),HbA1c>10%組明顯高于HbA1c<9%組(P均<0.05)。結(jié)論 DN患者CAVI與血清8-OHdG相關(guān),提示DN外周動(dòng)脈硬化的進(jìn)展與氧化應(yīng)激有關(guān)。
糖尿病腎??;2型糖尿?。恍呐K-腳踝血管指數(shù);8-羥基脫氧鳥苷
血管病變是糖尿病最重要的并發(fā)癥之一,常是糖尿病致殘、致死的重要病因。糖尿病的大血管病變可引起冠心病、腎動(dòng)脈硬化、外周動(dòng)脈硬化,其小血管病變可引起糖尿病腎病(DN)和糖尿病視網(wǎng)膜病變。高血糖引起氧化應(yīng)激是糖尿病血管病變發(fā)生、發(fā)展的重要機(jī)制。8-羥基脫氧鳥苷(8-Hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)是DNA氧化應(yīng)激的標(biāo)志物,心臟-腳踝血管指數(shù)(cardio-ankle vascular index,CAVI)是評(píng)估外周血管硬化的一個(gè)可靠指標(biāo),本研究探討了在DN中以上2個(gè)指標(biāo)之間的相關(guān)性,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。
1.1一般資料 選取2012年1月—2014年1月在本院進(jìn)行體檢正常者65例為正常組,男33例,女32例;年齡(58±12)歲;入選者近1個(gè)月無(wú)上呼吸道感染發(fā)生,近1個(gè)月未服用抗氧化應(yīng)激藥物,無(wú)糖代謝紊亂及任何腎臟疾病史,無(wú)吸煙史。隨機(jī)選取同期在本院診治的2型糖尿病(T2DM)患者70例為DM組,男35例,女35例;年齡(59±15)歲;均符合1999年WHO診斷糖尿病標(biāo)準(zhǔn),無(wú)吸煙史,24 h尿白蛋白≤30mg/24 h及血肌酐正常,無(wú)長(zhǎng)期使用抗氧化劑等影響氧化應(yīng)激水平藥物史。另選擇同期患者60例為DN組,男32例,女28例;年齡(62±5)歲;均無(wú)吸煙史,24 h尿白蛋白≥30mg/24 h或經(jīng)腎臟穿刺活檢確診為DN,無(wú)長(zhǎng)期使用抗氧化劑等影響氧化應(yīng)激水平藥物史,經(jīng)尿檢、腎臟穿刺活檢等排除其他類型腎小球疾病,非DN Ⅴ期(尿毒癥期)。3組性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。DN組根據(jù)蛋白尿情況分為大量蛋白尿[尿蛋白排泄率(UAER)>300mg/24 h]組28例,微量蛋白尿(UAER 30~300mg/24 h)組32例;根據(jù)糖化血紅蛋白(HbA1c)水平分為HbA1c>10%組28例,HbA1c 7.8%~9%組22例,HbA1c 6.5%~7.7%組10例。
1.2 研究方法
1.2.1 血液標(biāo)本采集與測(cè)定 所有入選者均清晨空腹用無(wú)抗凝的采血管采集肘靜脈全血7 mL。室溫靜置1 h凝固,2 000r/min離心10min,取出上層血清,其中一部分采用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、血肌酐(SCr)、HbA1c血生化指標(biāo),采用MULTISKAN2MK3型酶標(biāo)儀。另外一部分分裝于聚丙烯EP管中,-30℃冰箱保存待測(cè)。所有標(biāo)本均凍融1次,檢測(cè)前室溫下復(fù)溫。酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)雙抗體夾心法檢測(cè)血清8-OHdG水平,試劑盒購(gòu)自美國(guó)Cayman Chemical公司,酶標(biāo)儀由上海熱電儀器有限公司生產(chǎn)(型號(hào)為MK3)。標(biāo)本均為同批測(cè)定,操作嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。
1.2.2 UAER的測(cè)定 于取血前1 d 7:00開始收集24 h尿,加甲苯酸防腐,混勻后記錄總量,采用ELISA法檢測(cè),藥盒由上海波佳生物技術(shù)有限公司提供。UAER<20μg/min或<30mg/24 h為正常。
1.2.3 CAVI測(cè)定 受檢者取仰臥位,應(yīng)用日本Colin公司生產(chǎn)的VP-1000型全自動(dòng)動(dòng)脈硬化測(cè)定儀測(cè)量CAVI。每位受檢者均連續(xù)測(cè)量2次,中間間隔10s,取2次數(shù)據(jù)平均值為最后結(jié)果。CAVI<8.0為正常,CAVI≥8.0~9.0為臨界正常,CAVI≥9.0懷疑動(dòng)脈硬化。
2.13組一般資料比較 DN組與DM組BMI、HbA1c、尿TC、TG、LDL-C均明顯高于正常組(P均<0.05)。DN組病程、HbA1c、SCr、尿蛋白高于DM組(P均<0.05)。見(jiàn)表1。
2.2 各組CAVI和血清8-OHdG水平比較 DM組和DN組CAVI和血清8-OHdG水平均明顯高于正常組(P均<0.05),而DN組高于DM組(P均<0.05),見(jiàn)表2。
表1 3組一般資料比較
注:①與正常組比較,P<0.05;②與DM組比較,P<0.05。
表2 3組CAVI和血清8-OHdG水平比較
①與正常組比較,P<0.05;②與DM組比較,P<0.05。
2.3 DN組不同蛋白尿水平組SCr、CAVI和血清8-OHdG比較 2組血清SCr水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;大量蛋白尿組CAVI和8-OhdG水平明顯高于微量蛋白尿組(P均<0.05)。見(jiàn)表3。
表3 DN組不同蛋白尿水平組間SCr、CAVI和血清8-OHdG比較
注:①與微量蛋白尿組比較,P<0.05。
2.4 DN組不同HbA1c水平組CAVI和血清8-OHdG比較HbA1c>10%組和HbA1c 7.8~9%組CAVI和血清8-OHdG水平明顯高于HbA1c 6.5%~7.7%組,HbA1c>10%組高于HbA1c 7.8%~9%組(P均<0.05),見(jiàn)表4。
機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)是抗氧化和氧化失衡,導(dǎo)致大量活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的生成以及其滅活減少。越來(lái)越多研究證實(shí),大量ROS的產(chǎn)生是糖尿病并發(fā)癥的關(guān)鍵起始機(jī)制,ROS是足細(xì)胞凋亡的強(qiáng)烈誘導(dǎo)劑,而足細(xì)胞凋亡是DN的一個(gè)基本特征,它密切參與蛋白尿的進(jìn)展、腎小球硬化、腎小管間質(zhì)受損[1]。高血糖引起的氧化應(yīng)激促進(jìn)糖尿病多種并發(fā)癥的發(fā)展[2],如引起腎小球和腎小管細(xì)胞凋亡[3],從而促進(jìn)DN發(fā)展,在這種情況下,ROS引起的細(xì)胞凋亡是通過(guò)增加Bax蛋白表達(dá)而導(dǎo)致線粒體通透性增加和隨后釋放細(xì)胞色素C[4]。而高血壓、高血糖、氧化應(yīng)激等可作為獨(dú)立的因素或協(xié)同的因素造成血管損傷[5-6],如促進(jìn)動(dòng)脈硬化的發(fā)生。因此,糖尿病患者存在導(dǎo)致動(dòng)脈硬化的多種高危因素??梢?jiàn)氧化應(yīng)激和動(dòng)脈硬化都是糖尿病的重要病理生理過(guò)程。
表4 DN組不同HbA1c水平組間CAVI和血清8-OHdG比較
注:①與HbA1c 6.5%~7.7%組比較,P<0.05;②與HbA1c 7.8%~9%組比較,P<0.05。
8-OHdG作為DNA氧化損傷的標(biāo)志物,其優(yōu)點(diǎn)是在體內(nèi)較為穩(wěn)定,不受細(xì)胞代謝、食物的影響,其排泄量可反映DNA受損的程度。它可在與氧化應(yīng)激相關(guān)的疾病如腫瘤、動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病、幽門螺桿菌感染等患者的血液或尿液高水平表達(dá),它是血液凈化患者評(píng)估亞臨床心血管疾病的一個(gè)較好的風(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)[7]。Nagayama等[8]研究表明,T2DM患者尿液中8-OHdG升高,當(dāng)口服格列美脲有效控制血糖后,尿8-OHdG下降,提示尿8-OHdG可反映糖尿病患者的病情變化,可用于藥物療效追蹤。周淑紅等[9]研究顯示,血清8-OHdG水平在冠心病合并糖尿病患者中較血糖正常的冠心病患者明顯升高,提示8-OHdG對(duì)冠心病合并糖尿病患者具有預(yù)測(cè)作用。Kim等[10]研究提示,在DN動(dòng)物模型中,二甲雙胍除可控制血糖外,還具備抗氧化作用,可使腎組織及尿8-OHdG下降,足細(xì)胞受損得到緩解。提示,8-OHdG除了可反映DN病情外,還可以用于療效跟蹤。
CAVI以彈性參數(shù)β為基準(zhǔn),由心音、上臂脈搏波形和腳踝脈搏波形測(cè)量出從心瓣膜口部-腳踝動(dòng)脈部分的CAVI。由于CAVI不受血壓波動(dòng)影響,是更穩(wěn)定的動(dòng)脈硬化檢測(cè)指標(biāo),可評(píng)估動(dòng)脈硬化程度及患心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)[11-12],可用于高血壓、糖尿病、腎臟疾病、冠心病等疾病的動(dòng)脈硬化檢測(cè)。Masugata等[13]研究指出,高血壓患者尿8-OHdG升高,其變化水平與CAVI呈正相關(guān)。
本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn):①在年齡、性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的情況下,DN組CAVI和血清8-OHdG水平明顯高于DM組、正常組,同時(shí),DN組CAVI和8-OHdG水平呈平行關(guān)系,CAVI水平升高時(shí),8-OHdG水平亦明顯升高,可從血清8-OHdG 水平推斷CAVI大致水平(也就是動(dòng)脈硬化程度)。②為進(jìn)一步了解CAVI和8-OHdG水平是否與蛋白尿有關(guān),將DN組按尿蛋白水平分為2組,發(fā)現(xiàn)大量蛋白尿組CAVI和8-OHdG水平明顯高于微量蛋白尿組,提示CAVI和8-OHdG與蛋白尿相關(guān)。③為了分析DN中高血糖與CAVI和8-OHdG水平的相關(guān)性,按不同HbA1c水平分組,結(jié)果顯示,隨著HbA1c升高,CAVI和8-OhdG水平升高。由此可見(jiàn),把血糖控制在穩(wěn)定的正常范圍內(nèi)對(duì)防治或延緩糖尿病血管并發(fā)癥至關(guān)重要。
綜上所述,DN中CAVI與血8-OHdG相關(guān),提示DN外周動(dòng)脈硬化的進(jìn)展與氧化應(yīng)激有關(guān)。使用藥物和/或抗氧化劑控制血糖,可延緩糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展。
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Association between serum 8-hydroxydeoxyguanosine and cardio-ankle vascular index in diabetic nephropathy patients
HUANG Min, QIN Yuanyi, LIN Lin
(The Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, Guangzhou 510150, Guangdong, China)
Objective It is to investigate the relationship of serum 8-hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) and the cardio-ankle vascular index(CAVI) in diabetic nephropathy (DN) patients. Methods Sixty patients with DN were randomly selected as DN group, 70patients with T2DM as DM group, 65 healthy people as normal group.The levels of serum 8-OHdG,CAVI,and 24 h albuminuria were measured in each group and the results were compared.Results The levels of serum 8-OhdG and CAVI in the DN group were higher than that in the DM group(P<0.05).the levels in the DM group were higher than that in the normal control group(P<0.05).In DN group, the levels of serum 8-0hdG and CAVI in the macroalbuminuria group were significantly higher than that in the macroalbuminuria group(P<0.05), and the levels in the HbA1c>10%group were higher than that in the HbA1c<9 group(P<0.05).Conclusion DN is related with serum 8-OHdG and CAVI, which indicates that oxidative stress play important roles in the pathogenesis of peripheral arthrosclerosis in DN.
diabetic nephropathy;type 2 diabetes mellitus;cardio-ankle vascular index; 8-hydroxydeoxyguanosine;
黃敏,女,主治醫(yī)師,碩士研究生,研究方向?yàn)槟I小球疾病。
10.3969/j.issn.1008-8849.2015.10.010
R587.2
A
1008-8849(2015)10-1058-03
2014-12-15