阿莫西林在肉雞體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)研究

何斌，陸征，陳潔，付書林，陳夏冰

摘要：為研究阿莫西林在肉雞體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)特征，為獸醫(yī)臨床用藥提供依據(jù)，試驗(yàn)選取12羽成年三黃肉雞，阿莫西林口中灌服給藥，利用高效液相色譜法測(cè)定血漿中藥物濃度。結(jié)果表明，阿莫西林口灌給藥（15 mg/kg.BW） 后，其主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)：t1/2α為（0.627±0.071） h，t1/2ka為（0.139±0.011） h，t1/2β為（1.800±0.181） h，AUC為（6.005±0.641） μg/（mL·h），Tmax為（0.476±0.049） h，Cmax為（2.293±0.152） μg/mL。說明阿莫西林口灌給藥后，在成年三黃雞體內(nèi)吸收迅速，消除較快。

關(guān)鍵詞：阿莫西林;高效液相色譜;肉雞;藥物動(dòng)力學(xué)

中圖分類號(hào)：R969.1;R978.1 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ? ? ?文章編號(hào)：0439-8114（2014）23-5813-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.23.048

阿莫西林（Amoxicillin）又稱羥氨芐青霉素，人工半合成β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物，為氨芐西林同系物[1]。性質(zhì)穩(wěn)定、耐酸，在胃酸中較穩(wěn)定、吸收迅速、分布廣泛，被WHO推薦為首選口服抗生素[2-4];同時(shí)其有殺菌作用較強(qiáng)、副作用少、劑型多樣、與其他藥物聯(lián)用方便和價(jià)格便宜等優(yōu)點(diǎn)，現(xiàn)已廣泛用于獸醫(yī)臨床，用于防治各種敏感菌所引起的家禽消化、呼吸、生殖系統(tǒng)以及全身感染性疾病[5-8]。本研究就阿莫西林在肉雞體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究，旨在為家禽養(yǎng)殖合理用藥提供理論指導(dǎo)，對(duì)家禽養(yǎng)殖業(yè)中細(xì)菌性疾病的防控具有重要意義。

1 ?材料與方法

1.1 ?試驗(yàn)材料

美國(guó)Agilent 1100型高效液相色譜儀，紫外檢測(cè)器，Agilent ZORBAX SB-Aq柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）;原料藥品由四川華蜀動(dòng)物藥業(yè)有限公司提供，阿莫西林原料藥，批號(hào)：20100522，含量98.2%;阿莫西林對(duì)照品，中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)：0409-9706，含量86.2%;乙腈為色譜純，其他試劑為分析純。

1.2 ?試驗(yàn)方法

1.2.1 ?藥物動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)設(shè)計(jì) ?試驗(yàn)前將12羽成年三黃肉雞適應(yīng)飼喂7 d，給藥前禁食12 h，阿莫西林以15 mg/kg體重的劑量口灌給藥。

口灌給藥后，分別于0.083、0.167、0.25、0.50、0.75、1、2、4、6、8、12 h采血2 mL左右，置于已添加肝素鈉的聚丙烯離心管中，以2 000 r/min離心15 min，取上清液于-20 ℃冷凍保存，待測(cè)定。

1.2.2 ?色譜條件 ?色譜柱為Agilent ZORBAX SB-Aq柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）;檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm;流動(dòng)相為乙腈∶0.02 mol/L KH2PO4（pH 2.5）=5∶95;流速為1.0 mL/min;進(jìn)樣量為20 μL;柱溫為（30±0.1）℃[9，10]。

1.2.3 ?血漿樣品處理 ?準(zhǔn)確吸取血漿樣品0.5 mL，加入1.5 mL乙腈沉淀蛋白，渦旋振蕩1 min，3 000 r/min離心10 min;取上清液于10 mL離心管中，再加入3 mL二氯甲烷，渦旋振蕩1 min，3 000 r/min離心10 min，取上清液20 μL進(jìn)樣分析，記錄色譜圖[11-13]。

1.2.4 ?血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 ?向9支5 mL聚丙烯離心管中各加入0.5 mL空白血漿，留一支作空白對(duì)照，然后依次加入阿莫西林對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)工作液，得到藥物濃度依次為0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、2.50、5.00、10.00 μg/mL的血漿樣品。分別按照“1.2.3”的方法處理后，進(jìn)樣分析。以測(cè)得的阿莫西林的峰面積（A）為橫坐標(biāo)，藥物濃度（C）為縱坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得阿莫西林的回歸方程為C= 0.027 4A+0.017 6，r=0.999 7。

1.2.5 ?方法學(xué)驗(yàn)證 ?取空白血漿0.5 mL，添加適量阿莫西林對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)工作液，使其濃度分別為10.00、1.00、0.10 μg/mL，按照“1.2.3”的方法處理，并進(jìn)行HPLC檢測(cè)，每個(gè)濃度設(shè)置5個(gè)平行，測(cè)定結(jié)果為日內(nèi)變異系數(shù)在5%以內(nèi);重復(fù)檢測(cè)5 d，測(cè)定結(jié)果為日間變異系數(shù)在10%以內(nèi)。阿莫西林的血漿萃取回收率為90.52%～97.62%;最低檢測(cè)限（LOD）、最低定量限（LOQ）分別為0.01、0.04 μg/mL。

1.2.6 ?數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析 ?方法學(xué)驗(yàn)證考察數(shù)據(jù)采用SPSS軟件分析處理;藥-時(shí)曲線圖和消除動(dòng)態(tài)圖采用Excel軟件繪制;藥物動(dòng)力學(xué)模型擬合及參數(shù)計(jì)算均采用3P97藥動(dòng)學(xué)軟件分析，藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)可根據(jù)公式進(jìn)行計(jì)算。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?色譜行為

通過反復(fù)多次試驗(yàn)所建立的色譜條件，基線平穩(wěn)，藥物峰形對(duì)良好，樣品中阿莫西林在色譜條件下均能與雜質(zhì)峰良好分離（圖1、圖2）。結(jié)果表明，本測(cè)定方法簡(jiǎn)便，穩(wěn)定，檢測(cè)效率高，色譜峰良好。

2.2 ?藥物動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)

按照試驗(yàn)設(shè)定方案進(jìn)行給藥和樣品處理，經(jīng)高效液相色譜分析檢測(cè)、軟件分析計(jì)算，肉雞口灌阿莫西林后各時(shí)間點(diǎn)體內(nèi)血藥濃度見表1，藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)見表2。由表1、表2可見，肉雞口灌阿莫西林后，在體內(nèi)吸收迅速，達(dá)峰時(shí)間快，達(dá)峰濃度較高，藥-時(shí)曲線（圖3）符合有吸收二室開放模型，其藥-時(shí)方程為C=1.568 1 e-1.106 3 t + 2.045 9e-0.385 1 t - 3.614 0e-4.988 3 t。

3 ?小結(jié)與討論

本試驗(yàn)中，建立了阿莫西林的高效液相色譜檢測(cè)方法，該方法簡(jiǎn)單、快速。試驗(yàn)中選擇210 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)，有效地提高了檢測(cè)的靈敏度，使藥物與雜質(zhì)得到了有效分離。

阿莫西林口灌后，藥-時(shí)曲線符合有吸收二室開放模型，與Hernandez等[14]報(bào)道的在鴿體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)模型相符，Hernandez等[14]報(bào)道阿莫西林在鴿體內(nèi)的t1/2β為1.22 h，與本試驗(yàn)結(jié)果相似，這可能是由于兩者同屬禽類，所以阿莫西林在其體內(nèi)的半衰期相近;與曾振靈等[15]報(bào)道的阿莫西林在豬體內(nèi)的t1/2β為3.28 h相比較短，這可能是由于禽類的體溫高，對(duì)藥物代謝快所致。而阿莫西林在豬體內(nèi)Tmax為0.53 h、在鴿體內(nèi)Tmax為0.33 h，均與肉雞體內(nèi)的達(dá)峰時(shí)間相近，這說明阿莫西林在這些動(dòng)物體內(nèi)的吸收速度基本相近，雞體內(nèi)肌胃對(duì)阿莫西林的吸收沒有影響。阿莫西林的藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)表明，阿莫西林在肉雞體內(nèi)吸收迅速、達(dá)峰時(shí)間短，消除較快。

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