hTERT 永生化細(xì)胞的研究進(jìn)展及應(yīng)用前景

張敏，陳小云，王磊，王棟，蔣桃珍，王靜文

（中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京100081）

hTERT 永生化細(xì)胞的研究進(jìn)展及應(yīng)用前景

張敏，陳小云，王磊，王棟，蔣桃珍，王靜文

（中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京100081）

人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因（hTERT）誘導(dǎo)的永生化細(xì)胞兼具原代細(xì)胞的生物學(xué)特性和傳代細(xì)胞系連續(xù)傳代的能力，是一種理想的細(xì)胞來(lái)源，在基礎(chǔ)研究、臨床應(yīng)用和生物工程領(lǐng)域具有無(wú)可比擬的優(yōu)勢(shì)。本文主要就hTERT永生化細(xì)胞的研究進(jìn)展及應(yīng)用前景作一綜述。

永生化；端粒；端粒酶；人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因（hTERT）

正常細(xì)胞因其有限的增殖能力使其在基礎(chǔ)研究、臨床應(yīng)用和生物工程領(lǐng)域的作用受到局限。在許多實(shí)際應(yīng)用中，理想的是獲得具有持續(xù)增殖能力的細(xì)胞。一直以來(lái)，人們都在試圖解決這一問(wèn)題，目前用的較多的方法是將SV40病毒、人乳頭瘤病毒、EB病毒等轉(zhuǎn)染入細(xì)胞中，建立永生化細(xì)胞系；另外，還可以將原癌基因?qū)爰?xì)胞或利用放射性因素、化學(xué)藥物的刺激建立永生化細(xì)胞，但這些方法建立的永生化細(xì)胞均存在使細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的危險(xiǎn)。因此，急切需要發(fā)展一種新方法既能讓正常細(xì)胞跨越老化這一障礙，又能不丟失其正常特性。近年來(lái)報(bào)道較多是將人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)使其永生化，并且已經(jīng)證實(shí)這些永生化的細(xì)胞跟原代細(xì)胞的特性相似，沒(méi)有發(fā)生核型的改變，也無(wú)致瘤性。本文對(duì)hTERT介導(dǎo)的永生化細(xì)胞研究進(jìn)展及應(yīng)用前景做一論述。

1 細(xì)胞永生化的概念

細(xì)胞永生化（cell immortalization）是目前細(xì)胞生物學(xué)研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)之一，是指細(xì)胞獲得持續(xù)生長(zhǎng)增殖能力的特性。正常組織來(lái)源的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)有限次的細(xì)胞傳代后，會(huì)停止增殖，發(fā)生衰老和死亡。一般認(rèn)為永生化是體外培養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)過(guò)自發(fā)的或外界因素的影響從增殖危機(jī)中逃逸，從而具有無(wú)限增殖能力的過(guò)程。細(xì)胞自發(fā)性永生化的幾率非常小，嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞為10－5～10－6，而人類細(xì)胞則更罕見，小于10－12。因此，學(xué)者們通過(guò)基因轉(zhuǎn)染等技術(shù)將外源性永生化基因轉(zhuǎn)入目的細(xì)胞內(nèi)，以增加永生化的發(fā)生幾率，進(jìn)而建立永生化細(xì)胞系［1－2］。

2 細(xì)胞永生化的機(jī)制

端粒是位于真核細(xì)胞線性染色體末端的特殊結(jié)構(gòu)，由一簡(jiǎn)單重復(fù)的富含堿基G的DNA序列及其相關(guān)蛋白組成，國(guó)內(nèi)外研究表明端粒的長(zhǎng)度與細(xì)胞有絲分裂次數(shù)相關(guān)，體外培養(yǎng)的細(xì)胞每分裂一次，端粒進(jìn)行性縮短，當(dāng)縮短到一定程度而不能維護(hù)染色體的穩(wěn)定時(shí)，細(xì)胞失去分裂增殖的能力，發(fā)生衰老。越來(lái)越多的例子表明端粒長(zhǎng)度控制著衰老的進(jìn)程，端粒的縮短是觸發(fā)衰老的分子鐘。從不同年齡或原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞測(cè)定的端粒長(zhǎng)度結(jié)果都顯示端粒隨年齡或分裂次數(shù)增加而縮短，表現(xiàn)為年齡或分裂次數(shù)的函數(shù)。

端粒酶是一種能延長(zhǎng)端粒末端的核糖核蛋白酶，是一種專一的逆轉(zhuǎn)錄酶，能以自身的RNA為模板，從端粒DNA 3’－OH末端延伸端?；蚝铣尚碌亩肆NA，以補(bǔ)償細(xì)胞分裂時(shí)染色體末端的縮短，從而維持端粒的長(zhǎng)度，使細(xì)胞不會(huì)因端粒耗盡而出現(xiàn)凋亡。因此，端粒酶在保持端粒穩(wěn)定、基因組完整、細(xì)胞長(zhǎng)期的活性和潛在的繼續(xù)增殖能力等方面有重要作用［3－5］。但是，在正常人體細(xì)胞中，端粒酶的活性受到相當(dāng)嚴(yán)密的調(diào)控，并不能檢測(cè)到端粒酶的活性，只有在造血細(xì)胞、干細(xì)胞和生殖細(xì)胞，這些必須不斷分裂克隆的細(xì)胞之中，才可以檢測(cè)到具有活性的端粒酶［6－8］。

目前，已經(jīng)得到實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)的永生化機(jī)制是“端粒假說(shuō)”理論：正常人或動(dòng)物原代細(xì)胞在體外經(jīng)過(guò)多次分裂后，細(xì)胞進(jìn)入衰老期（senescence，M1期），此時(shí)細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)因子等失去反應(yīng)，產(chǎn)生DNA合成蛋白抑制因子，細(xì)胞周期檢查點(diǎn)發(fā)送細(xì)胞周期停止信號(hào)，DNA合成停止，細(xì)胞停止分裂開始衰老，但不一定死亡。而病毒、原癌基因和抑癌基因突變體等則可以抑制M1期機(jī)制，細(xì)胞繞過(guò)M1期繼續(xù)生長(zhǎng)。細(xì)胞經(jīng)過(guò)20～30群體倍增次數(shù)（population doublings，PDs）后，進(jìn)入危機(jī)期（crisis，M2期），細(xì)胞出現(xiàn)退化，如雙著絲粒形成、染色體變短而失穩(wěn)，分裂細(xì)胞逐漸減少，絕大多數(shù)細(xì)胞發(fā)生凋亡，只有罕見的細(xì)胞在一些因素影響下，端粒酶被激活，以它自身RNA為模板不斷合成端粒DNA來(lái)補(bǔ)充和延長(zhǎng)端粒有限長(zhǎng)度，以維持端粒長(zhǎng)度，恢復(fù)染色體的穩(wěn)定性使細(xì)胞得以逾越M2期，細(xì)胞就獲得了無(wú)限分裂和增殖的能力而成為永生化細(xì)胞［2］。

端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（telomerase reverse transcriptase，TERT）作為端粒酶的催化亞單位和限速酶，在端粒酶活性維持中起關(guān)鍵作用，這就為細(xì)胞永生化提供了新的思路。在原代培養(yǎng)的細(xì)胞中轉(zhuǎn)入端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（TERT），并穩(wěn)定表達(dá)，能維持端粒的長(zhǎng)度，使細(xì)胞易于永生化。TERT在進(jìn)化上相對(duì)保守，幾乎所有物種均含有六個(gè)逆轉(zhuǎn)錄酶元件和一個(gè)端粒酶特異性元件。目前，研究最多的就是在原代細(xì)胞中轉(zhuǎn)入人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT），使細(xì)胞永生化［9－10］。

3 hTERT永生化細(xì)胞的國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀

3.1 hTERT永生化細(xì)胞的優(yōu)越性 相對(duì)于傳統(tǒng)的永生化基因，即病毒、原癌基因等，hTERT具有許多優(yōu)越性。首先，hTERT介導(dǎo)的永生化細(xì)胞是正常細(xì)胞而非轉(zhuǎn)化細(xì)胞。研究表明它們具正常生長(zhǎng)率、核型、呈現(xiàn)接觸抑制和錨著依賴性，不具有致癌性和軟瓊脂克隆形成能力等，同時(shí)其DNA被紫外線或電離輻射損傷后，P53和P21的反應(yīng)性誘導(dǎo)與正常細(xì)胞相同。當(dāng)它們處于增殖期時(shí)pRb發(fā)生過(guò)磷酸化，匯合時(shí)則發(fā)生低磷酸化并下調(diào)，而P16INK4a水平則保持穩(wěn)定，符合正常細(xì)胞特征［11］。

3.2 hTERT永生化細(xì)胞的研究方法 學(xué)者們通常采用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)將外源性永生化基因?qū)肽康募?xì)胞內(nèi)，包括電穿孔法、磷酸鈣沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法以及逆轉(zhuǎn)錄病毒和腺病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法。由于表達(dá)載體的不同，hTERT導(dǎo)入目的細(xì)胞的具體方法不盡相同。有學(xué)者構(gòu)建了兩個(gè)真核表達(dá)載體pGRN145和pZeoSV－h(huán)TERT，采用電穿孔法有效地導(dǎo)入了人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞和包皮成纖維細(xì)胞；若hTERT插入逆轉(zhuǎn)錄病毒載體如pBabe puro和pBabe hygro，則需要將質(zhì)粒導(dǎo)入包裝細(xì)胞系后產(chǎn)生的病毒上清感染目的細(xì)胞；由于電穿孔法需要大量的目的細(xì)胞，而逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法雖然效率高但操作較為復(fù)雜，近年興起的脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法因?yàn)樾矢?、操作方便等?yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用，相應(yīng)的真核表達(dá)載體pCI－neo－h(huán)TERT也有效應(yīng)用于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法［12］。

經(jīng)hTERT永生化的細(xì)胞能無(wú)限增殖生長(zhǎng)，可長(zhǎng)期傳代，但并不改變細(xì)胞本身的特性，目前主要用以下幾種方法對(duì)其進(jìn)行鑒定：Southern－blot檢測(cè)外源基因的整合情況；Western－blot檢測(cè)外源基因的表達(dá)情況；端粒酶重復(fù)擴(kuò)增PCR方法檢測(cè)端粒酶活性；免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的特異性抗原；體外及體內(nèi)法對(duì)細(xì)胞的致瘤性進(jìn)行檢測(cè)［1］。隨著永生化細(xì)胞研究的不斷深入，將有越來(lái)越多、更靈敏方便的方法對(duì)其進(jìn)行鑒定。

3.3 hTERT永生化人源細(xì)胞的國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展在人原代細(xì)胞的研究上，永生化細(xì)胞的研究在國(guó)內(nèi)外都備受親睞。1998年，Bodnar等［13］首先利用外源的hTERT轉(zhuǎn)染人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞和包皮成纖維細(xì)胞，結(jié)果細(xì)胞分裂旺盛，細(xì)胞壽命延長(zhǎng)了至少20PDs。后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)，此類細(xì)胞可持續(xù)增殖，至少達(dá)未轉(zhuǎn)染細(xì)胞PDs的2－3倍。美國(guó)Clontech公司與Geron公司轉(zhuǎn)染hTERT至人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞，合作推出第一種商品化的永生化正常細(xì)胞系hTERT－RPE1，其較正常細(xì)胞增殖快，平均每周達(dá)5－6PDs，有3個(gè)克隆傳代多于300代［14］。Wang J等［15］用正常的人乳腺上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)染hTERT后，細(xì)胞壽命超過(guò)了未轉(zhuǎn)染對(duì)照組細(xì)胞壽命的40PDs。Wieser等［16］的研究結(jié)果表明，外源表達(dá)hTERT足以使腎近端小管上皮細(xì)胞永生化，永生化細(xì)胞的各項(xiàng)表型與原代細(xì)胞一致，經(jīng)過(guò)連續(xù)90次群體倍增后，轉(zhuǎn)化細(xì)胞依然保持良好的遺傳穩(wěn)定性。全球最大的生物材料資源中心美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心（ATCC）也致力于人類細(xì)胞的hTERT永生化細(xì)胞系的構(gòu)建，目前已構(gòu)建了10余種hTERT永生化細(xì)胞系，并實(shí)現(xiàn)了商品化，一些永生化的細(xì)胞在臨床上已經(jīng)得到了應(yīng)用，如細(xì)胞治療和構(gòu)建工程化組織等［17－19］。國(guó)內(nèi)劉官智等［20］采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法，將hTERT基因?qū)肴嗣轭^細(xì)胞中，已連續(xù)傳至65代，且具有正常細(xì)胞的生物學(xué)特征；高雯等［21］通過(guò)端粒酶導(dǎo)入技術(shù)成功構(gòu)建永生化人輸卵管上皮細(xì)胞；陳之峰等［22］利用反轉(zhuǎn)錄病毒載體將hTERT基因轉(zhuǎn)入口腔黏膜上皮細(xì)胞，進(jìn)行一系列檢測(cè)后顯示，轉(zhuǎn)染細(xì)胞增殖活躍，群體倍增數(shù)超過(guò)80，hTERT基因在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)，而在未轉(zhuǎn)染細(xì)胞中不表達(dá)。永生化獲得成功的報(bào)道還有人肺成纖維細(xì)胞、皮膚成纖維細(xì)胞、人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞等等。

3.4 hTERT永生化動(dòng)物源細(xì)胞國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展近年來(lái)，動(dòng)物源細(xì)胞永生化的研究也取得了很大的進(jìn)展。Sabine等［23］采用hTERT基因轉(zhuǎn)染技術(shù)，獲得了永生化的豬輸卵管上皮細(xì)胞系，該細(xì)胞具有端粒酶活性，并與上皮細(xì)胞標(biāo)志物角蛋白具有免疫反應(yīng)；Sungwook［24］用轉(zhuǎn)染端粒酶hTERT和猿猴病毒SV40LT兩種方法，成功建立了豬腎永生化細(xì)胞系，并傳至30代，發(fā)現(xiàn)兩種方法獲得的細(xì)胞在軟瓊脂上均不生長(zhǎng)，在10%FBS－DMEM培養(yǎng)基中增殖能力明顯快于原代細(xì)胞，為病毒研究提供了很好的細(xì)胞來(lái)源；Sagong等［25］采用反轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，將hTERT cDNA轉(zhuǎn)染豬肺泡巨噬細(xì)胞，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞能表達(dá)hTERT基因，使細(xì)胞永生化，該永生化細(xì)胞未影響細(xì)胞表面CD163受體的表達(dá)水平，對(duì)美洲型和歐洲型PRRSV毒株均高度易感。國(guó)內(nèi)研究者在動(dòng)物細(xì)胞永生化方面也做了一些研究，方澤強(qiáng)［26］等2003年采用新西蘭大白兔的顳頷關(guān)節(jié)表面軟骨組織進(jìn)行的hTERT轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)：轉(zhuǎn)染hTERT的軟骨細(xì)胞內(nèi)可檢測(cè)到明顯的端粒酶活性，且具有較為旺盛的分裂能力，傳至100代后細(xì)胞仍可以增殖，除細(xì)胞體積有縮小外，其他生物學(xué)特性基本正常，未經(jīng)轉(zhuǎn)染hTERT的對(duì)照組軟骨細(xì)胞未檢測(cè)到端粒酶活性，傳至第8代已經(jīng)停止分裂；洪海霞等［37］將編碼hTERT和neo基因的真核表達(dá)質(zhì)粒pCI－neo－h(huán)TERT導(dǎo)入原代培養(yǎng)的豬臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞，激活了其端粒酶活性，延長(zhǎng)了細(xì)胞在體外培養(yǎng)的壽命，獲得了永生化豬臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞并傳至56代，且該細(xì)胞仍保持其正常的生物學(xué)特性和分泌功能，隨后，該研究小組將CSFV E2基因?qū)胴i臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞獲得表達(dá)，而且成功誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗E2蛋白的抗體［28］；李吉霞等［29］轉(zhuǎn)染hTERT基因成功建立永生化牛乳腺上皮細(xì)胞，轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞形態(tài)正常、生長(zhǎng)活力旺盛、核型正常、無(wú)致瘤性，且有端粒酶活性，已成功傳至68代，隨之將該細(xì)胞作為供核細(xì)胞，初步運(yùn)用于核移植的研究；曹暉等［30］從2.5～3月齡胎豬胰腺組織中分離出間充質(zhì)干細(xì)胞，轉(zhuǎn)染hTERTJ基因永生化胎豬胰腺源間充質(zhì)干細(xì)胞，具有很強(qiáng)的體外增殖能力，體外能夠分化為其他類型細(xì)胞，可為組織工程和再生醫(yī)學(xué)的研究提供足夠的細(xì)胞資源。

4 hTERT永生化細(xì)胞的應(yīng)用前景

針對(duì)疫病的防控，我國(guó)主要采取以疫苗免疫接種為主的綜合性防治措施，疫苗發(fā)展主要經(jīng)歷了組織苗、原代細(xì)胞苗和傳代細(xì)胞苗的過(guò)程。組織苗使用活體動(dòng)物生產(chǎn)，生產(chǎn)量有限且成本高；原代細(xì)胞苗在制備工藝上雖然優(yōu)于組織苗，但卻存在原代細(xì)胞傳代次數(shù)有限、不同批次細(xì)胞質(zhì)量和敏感性有差異、易造成外源病毒污染等問(wèn)題，阻礙了其在疫苗上的進(jìn)一步發(fā)展。為了克服組織苗和原代細(xì)胞苗的缺陷，研究者們用傳代細(xì)胞適應(yīng)病毒增殖并獲得成功，從而使疫苗的生產(chǎn)更簡(jiǎn)單、快速，同時(shí)也使疫苗的生產(chǎn)更標(biāo)準(zhǔn)化、低成本和規(guī)?；?，使疫苗生產(chǎn)在生物反應(yīng)器上批量工廠化生產(chǎn)變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)，從而大大優(yōu)化了疫苗生產(chǎn)工藝、提高了病毒滴度?？梢哉f(shuō)，傳代細(xì)胞系的使用給疫苗的生產(chǎn)帶來(lái)了突破性的進(jìn)展。但傳代細(xì)胞系的使用也有其局限性，特別是其運(yùn)用于活疫苗生產(chǎn)時(shí)，其株系特性，特別是有無(wú)致瘤性，不僅直接影響到疫苗的質(zhì)量而且關(guān)系到人畜的健康與安全。致癌基因模型的風(fēng)險(xiǎn)性評(píng)估顯示，體內(nèi)基因組中含有某一具有活性的致癌基因100拷貝即可引起1／109個(gè)受體發(fā)生轉(zhuǎn)化。因此，研究認(rèn)為，當(dāng)細(xì)胞殘留DNA高于100pg／劑量時(shí)，細(xì)胞DNA潛在的風(fēng)險(xiǎn)將不容忽視［31］。若用致瘤性細(xì)胞系生產(chǎn)疫苗，疫苗癌基因會(huì)隨活苗接種而整合入體內(nèi)，人類若接種有癌基因的疫苗或長(zhǎng)期食用整合有癌基因的肉類，有可能出現(xiàn)新一代癌癥，釀成新的公共衛(wèi)生問(wèn)題。國(guó)外及中國(guó)藥典對(duì)傳代細(xì)胞系用于疫苗生產(chǎn)的傳代代次、DNA殘留量都有嚴(yán)格的控制［32－33］。而永生化的細(xì)胞克服了原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞系的缺陷，具有原代細(xì)胞生物學(xué)特性，又兼具傳代細(xì)胞系均一、穩(wěn)定、操作簡(jiǎn)單且能長(zhǎng)期傳代培養(yǎng)的特性，在疫苗的生產(chǎn)上將是較好的候選細(xì)胞。

來(lái)源于靶宿主組織的細(xì)胞，是病毒增殖的理想工具。目前，應(yīng)用于病毒性疾病研究的細(xì)胞較少，特別是在動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究上，而且每種病毒能增殖的細(xì)胞有限，細(xì)胞系的相對(duì)缺乏影響了病毒學(xué)研究的發(fā)展。永生化細(xì)胞，具有原代細(xì)胞的生物學(xué)特性，這就為病毒性疾病的研究提供了很好的感染模型，為研究病毒生長(zhǎng)、增殖、代謝規(guī)律及與細(xì)胞的相互作用提供了優(yōu)良的細(xì)胞基質(zhì)。

在體外延長(zhǎng)細(xì)胞壽命在研究生長(zhǎng)和分化的生理生化特征方面，克隆的永生化細(xì)胞比已經(jīng)建立的腫瘤細(xì)胞系具有更大的優(yōu)勢(shì)，因?yàn)樗艽頇C(jī)體內(nèi)的正常生理狀態(tài)，有助于研究器官衰老現(xiàn)象發(fā)生的機(jī)制，為我們攻克腫瘤，研究干細(xì)胞的特性，控制細(xì)胞的增殖分化等許多方面的研究奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。同時(shí)永生化在體外可多次傳代，具有相對(duì)穩(wěn)定的增殖特性和功能狀態(tài)，將其作為細(xì)胞工程和組織工程等研究領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞，有助于體外實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化。永生化細(xì)胞也可作為體內(nèi)治療的載體，長(zhǎng)期而穩(wěn)定地發(fā)揮我們所要求的療效，而不會(huì)引起不良反應(yīng)，現(xiàn)已有人將永生化細(xì)胞應(yīng)用于臨床研究。

5 展望

從上個(gè)世紀(jì)末至今，hTERT永生化細(xì)胞的研究不過(guò)短短二十幾年的時(shí)間，就已經(jīng)取得了令人矚目的成就，利用hTERT構(gòu)建的永生化細(xì)胞系也已經(jīng)在基礎(chǔ)研究及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中發(fā)揮了初步作用，并顯現(xiàn)出很好的應(yīng)用前景。但同時(shí)這個(gè)新興的領(lǐng)域還有很多未知的東西需要我們和后來(lái)的人們?nèi)ブ鹨黄平猓热鏷TERT的分子調(diào)控機(jī)制、永生化和腫瘤細(xì)胞的關(guān)系、永生化細(xì)胞的局限性、對(duì)不同細(xì)胞采用何種永生化方法等。總之，永生化細(xì)胞的研究是困難與機(jī)遇并存、問(wèn)題與結(jié)果碰撞的起步階段，隨著技術(shù)的完善和研究的深入，相信永生化細(xì)胞將在細(xì)胞學(xué)及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。

［1］ 莊金秋，梅建國(guó)，王文秀，等.細(xì)胞永生化技術(shù)及其應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.生命科學(xué)研究，2011，15（4）：363－368.

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（編輯：陳希）

The Research Progress and Application Prospect of Immortalized Cell by hTERT

ZHANG Min，CHEN Xiao－yun，WANG Lei，WANG Dong，JIANG Tao－zhen，WANG Jing－wen
（Chine Institute of Veterinery Drug Control，Beijing 100081，China）

Immortalized cells induced by human telomerase reverse transcriptase（hTERT）are ideal cell source for their biological specificity of primary cell line and infinite proliferative capacity of passage cell line.They have shown superior advantage in fundamental research，clinical application and bioengineering.In this review，we introduced research progress and application prospect of immortalized cells induced by hTERT.

immortalization；telomere；telomerase；human telomerase reverse transcriptase（hTERT）

2015－01－06

A

1002－1280（2015）02－0058－05

Q28

張敏，碩士，從事動(dòng)物細(xì)胞與病毒學(xué)方面研究。E－mail：zmbooksea＠163.com