實驗小鼠不同部位骨髓病理切片的比較

馮 璟，于遠望

(1．陜西中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院，陜西咸陽 712046;2．陜西中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，陜西咸陽 712046）

實驗小鼠不同部位骨髓病理切片的比較

馮 璟1，于遠望2

(1．陜西中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院，陜西咸陽 712046;2．陜西中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，陜西咸陽 712046）

目的探討制作實驗小鼠骨髓病理切片的最佳取材部位。方法 將實驗小鼠頸椎脫臼處死后取脛骨、股骨、顱骨、胸骨、髂骨等5個不同部位制作骨髓病理切片，光鏡下觀察并拍照。比較不同部位骨髓實質(zhì)及造血微環(huán)境的分布情況，選擇最能反映骨髓造血功能的取材部位。結(jié)果 髂骨骨髓切片可見大量分布均勻的紅系、粒系細胞，血竇和巨核細胞清晰，支架組織結(jié)構(gòu)緊密，脂肪細胞少。顱骨、胸骨、脛骨、股骨骨髓切片造血細胞顯示不清，增生不活躍，且存在較多脂肪細胞。結(jié)論 髂骨是作為制作骨髓切片的最佳取材部位之一。

骨髓切片;部位;比較

骨髓是機體的主要造血器官，由骨髓實質(zhì)和造血微環(huán)境組成，其造血功能的強弱可通過骨髓病理切片反應(yīng)出來。當骨髓被致病因素抑制時，骨髓實質(zhì)分化增殖不良，造血微環(huán)境的改變均可導(dǎo)致機體造血功能下降［1－2］。因此，眾多實驗研究者通常選擇制作骨髓組織病理切片并觀察其鏡下特點，以此作為檢測造血系統(tǒng)損傷的指標之一。

在大量實驗研究制作小鼠骨髓病理切片時，實驗者大多選擇將小鼠處死后取其股骨，作為制作切片的主要取材部位［3－7］，也有研究報道采用取小鼠腰椎骨髓［8］或胸骨骨髓［9］的方法制作骨髓病理切片。對于選取何處病理組織制作切片最能反映機體的造血功能，尚鮮有報道。本實驗通過選取小鼠不同部位骨髓組織制作病理切片，鏡下觀察其骨髓實質(zhì)及造血微環(huán)境，探尋能夠更好反映小鼠骨髓病理變化的部位，為今后動物實驗制作骨髓病理切片的取材部位選擇提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

健康SPF級昆明種小鼠10只，雄性，6～8周齡，體重18～22 g，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物實驗中心提供【SCXK(陜）2013－001】，在陜西中醫(yī)藥大學(xué)中藥藥理實驗室【SYXK(陜）2007－006】中取材。

1.2 儀器與材料

E220光學(xué)生物顯微鏡(0lympus公司）、病理圖文系統(tǒng)分析工作站、輪轉(zhuǎn)式切片機、推片與烤片兩用器、蘇木精－伊紅(HE）染液等。

1.3 方法

健康SPF級昆明種小鼠10只，適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后，頸椎脫臼處死并解剖，分別取小鼠脛骨、股骨、顱骨、胸骨、髂骨等5個不同部位制做骨髓病理切片，常規(guī)HE染色，40倍光鏡下觀察并拍照。

2 結(jié)果

光鏡下各部位骨髓切片均可見不同分化階段粒、紅、巨核細胞，但脛骨、股骨骨髓切片鏡下脂肪細胞較多，支架結(jié)構(gòu)較疏松;顱骨、胸骨骨髓切片鏡下造血紅系、粒系細胞數(shù)量較少，微環(huán)境排列較松散;唯有髂骨骨髓切片鏡下紅系、粒系細胞大量存在，分布均勻且排列緊密，血竇和巨核細胞清晰，粒細胞胞漿嗜堿性，增生活躍，并可見核分裂像，骨髓造血組織支架結(jié)構(gòu)緊密且脂肪細胞數(shù)量較少，可較好的反映骨髓的造血功能。因此，可將髂骨作為制作骨髓病理切片的首選取材部位(彩插5圖1）。

3 討論

骨髓存在于長骨(如脛骨、股骨）的骨髓腔，扁骨(如髂骨、肋骨）和不規(guī)則骨(胸骨、脊椎骨等）的松質(zhì)骨中，觀察骨髓切片可以全面了解骨髓造血細胞的增生程度、分布及細胞密度，還可以反應(yīng)骨髓細胞原先的面貌［10］。小鼠出生時，全身骨髓腔內(nèi)充滿具有造血功能的紅骨髓，隨著年齡增長，骨髓中脂肪細胞逐漸增多，相當一部分紅骨髓被沒有造血功能的黃骨髓取代，僅在椎管、胸骨、肋骨、髂骨、顱骨及股骨和肱骨上端的松質(zhì)內(nèi)保留有紅骨髓。考慮到在制作骨髓病理切片時，椎管、顱骨等部位取材較困難，目前實驗研究多選取小鼠股骨作為制作骨髓病理切片的主要部位。但因具有造血功能的紅骨髓多存在于股骨上端的骨松質(zhì)內(nèi)，在制作骨髓切片時不易將其與位于股骨干內(nèi)的黃骨髓分離，因此鏡下觀察股骨骨髓病理切片脂肪細胞較多，造血細胞比例明顯下降，不利于反映骨髓的造血功能。

本實驗通過對比小鼠不同部位的骨髓病理切片，鏡下觀察骨髓實質(zhì)和造血微環(huán)境，發(fā)現(xiàn)小鼠髂骨較顱骨、胸骨、股骨、脛骨等其他部位骨髓切片顯示造血細胞更清晰、分布更均勻，其支架結(jié)構(gòu)更緊密，脂肪細胞含量較少，且實驗的可行性和操作性較強，可作為制作骨髓病理切片的一個最佳取材部位。

［1］陸英，鐘雪云，陳運賢，等．參芪扶正注射液對化療后小鼠造血功能影響的實驗研究［J］．熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2005，5(6）：750－752．

［2］何曉莉，張雁，吳宏，等．當歸多糖對輻射損傷小鼠造血系統(tǒng)保護作用的研究［J］．重慶醫(yī)學(xué)，2012，41(35）：3734－3736，封4．

［3］申星，熊國林，柳曉蘭，等．不同劑量HS6101對環(huán)磷酰胺損傷小鼠造血功能的影響［J］．國際藥學(xué)研究雜志，2014，(6）： 693－697．

［4］侯新然，王曉波，襲榮剛，等．60Coγ射線損傷后小鼠造血系統(tǒng)生理指標的動態(tài)變化［J］．解放軍藥學(xué)學(xué)報，2012，28(6）： 491－494，498．

［5］顧宏濤，楊嵐，田瓊，等．WR－2721，PF4對于全身照射條件下小鼠造血系統(tǒng)保護作用的比較［J］．第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2003，24(21）：2006－2008．

［6］黃茜，祝彼得，石婭萍，等．八珍湯對骨髓損傷小鼠脾臟指數(shù)外周血象及骨髓造血組織面積影響的實驗研究［J］．現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2012，28(8）：1123－1125．

［7］孫巍巍，孫強，王巍，等．不同劑量補髓生血顆粒對再生障礙性貧血模型大鼠外周血及骨髓的影響［J］．中醫(yī)藥信息，2008，25(6）：64－66．

［8］常公民，彭瑞云，高亞兵，等．rhIL－11和rhG－CSF對中子照射致小鼠骨髓損傷的治療作用［J］．中華放射醫(yī)學(xué)與防護雜志，2009，29(4）：375－379．

［9］胡鍇勛，孫琪云，劉麗輝，等．間充質(zhì)干細胞治療急性骨髓型放射病的實驗研究［J］．中華放射醫(yī)學(xué)與防護雜志，2005，25 (3）：221－224．

［10］盧興國．骨髓細胞學(xué)和病理學(xué)［M］．北京：科學(xué)出版社，2008： 759－877．

Comparison of the experimental mice of different parts of the bone marrow biopsy

FENG Jing1，YU Yuan－wang2
(1．School of Medical Techniques in Shanxi University of Chinese Medicine，Shanxi Xianyang 712046，China; 2．Basic Medical College of Shaanxi University of Chinese Medicine，Shanxi Xianyang 712046，China）

Objective To explore the best sampling position of bone marrow biopsy in mice．Methods Mice were sacrificed by cervical dislocation，then take the skull，sternum，tibial，femoral and iliac bone，making pathological section．Observed and photographed under light microscope．Comparison of the distribution of the essence and the hematopoietic microenvironment in different parts．Select site which can best reflect the hematopoietic function of bone marrow．Results A large number of hematopoietic cells in ilium marrow sections visible．The cells are evenly distributed．Blood and megakaryocytes were clearly visible．The arrangement of the structure of the scaffolds for tissue closely．The number of fat cells less．Bone marrow hematopoietic cells in the skull，sternum，tibial，femoral were not clear and not active．And there are more fat cells．Conclusions As the best sampling position of bone marrow biopsy，is ilium．

Bone marrow biopsy;Part;Comparasion

R－332

A

1671－7856(2015）07－0064－02

10．3969．j．issn．1671．7856．2015．007．013

馮璟(1980－），女，碩士，講師，主要從事輻射損傷的研究。E－mail：44115692@qq．com。

2015－06－10