甘遂與甘草合用對大鼠肝藥酶CYP1A2、CYP2C19和CYP2E1的影響

景欣悅，彭蘊茹，王新敏，段金廒

（1．南京中醫(yī)藥大學第二臨床醫(yī)學院，江蘇南京 210023；2．江蘇省中醫(yī)藥研究院，江蘇南京 210028；3．南京中醫(yī)藥大學江蘇省方劑高技術研究重點實驗室，江蘇南京 210023）

甘遂與甘草合用對大鼠肝藥酶CYP1A2、CYP2C19和CYP2E1的影響

景欣悅1，彭蘊茹2，王新敏3，段金廒3

（1．南京中醫(yī)藥大學第二臨床醫(yī)學院，江蘇南京 210023；2．江蘇省中醫(yī)藥研究院，江蘇南京 210028；3．南京中醫(yī)藥大學江蘇省方劑高技術研究重點實驗室，江蘇南京 210023）

Combined effect of Euphorbia kansui and Glycyr-rhiza uralensis on CYP1A2，CYP2C19 and CYP2E1

JING Xin-yue1，PENG Yun-ru2，WANG Xin-min3，DUAN Jin-ao3
（1．No．2 Clinical Medical College，Nanjing University of Chi-nese Medicine，Nanjing 210023，China；2．Jiangsu Provincial Academy of Traditional Chinese Medicine，Nanjing 210028，China；3．Jiangsu Key Laboratory for High Technology Research of TCM Formulae，Nanjing University of Chinese Medicine，Nan-jing 210023，China）

網絡出版時間：2015－10－16 9：52 網絡出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1086．R．20151016．0952．058．html

“十八反”則告誡人們，甘遂（Euphorbia kansui，EK）與甘草（Glycyrrhiza uralensis，GU）相對立不宜伍用。但有學者認為，反藥同用能相反相成，產生較強的功效。故一直以來，甘遂與甘草組合在臨床上仍有廣泛的應用［1－3］。近年來，中藥用藥的安全性問題越來越受到重視，闡明“反”的機制，已成為中醫(yī)藥理論自身發(fā)展的必然要求。

藥物相互作用中最常見的原因是CYP450的誘導和抑制［4－5］。中藥雖然成分復雜，但效應成分多數(shù)仍要通過CYP450酶代謝，或對其產生誘導或抑制，從而影響其他藥物的代謝或產生藥物相互作用。目前，甘遂與甘草合用對CYP450影響的文獻報道，由于采用酶的來源、孵化條件、探針藥物等不同，使得不同文獻報道的數(shù)據(jù)沒有可比性，也沒有統(tǒng)一的結論。所以，有必要進行體內、體外相結合的實驗研究，使結果相互印證。

1　材料與方法

1．1材料 非那西丁、對乙酰氨基酚、奧美拉唑（OPZ）購于中國藥品生物制品檢定所；5’-羥基奧美拉唑（5’-OHOPZ）購于凱氏（上海）科技有限公司；氯唑沙宗（CZX）購于東京化成工業(yè)株式會社；6’-羥基氯唑沙宗（6’-OHCZX）購于多倫多化學品公司；甘草水提液、甘遂醇提液由南京中醫(yī)藥大學江蘇省方劑高技術研究重點實驗室提供。甘遂及甘草分別以0.25%的CMC-Na溶液配制成濃度為1 mL含有1 g生藥的混懸液。

1．2方法

1．2．1實驗動物與分組 健康♂Sprague-Dawley大鼠，體質量180～200 g，由上海西普爾－必凱實驗動物中心提供。實驗分3批進行，每批大鼠隨機分為4組，分別為正常對照組、甘遂組、甘草組及甘遂與甘草合用組。

1．2．2甘遂與甘草合用對非那西丁、OPZ和CZX在大鼠體內藥代動力學行為的影響 按組別灌胃給予上述提取物，甘遂組及甘草組均為10 g生藥·kg－1，甘遂與甘草合用組為20 g生藥·kg－1。連續(xù)灌胃給予各組提取物10 d，每天1次。于d 11，禁食過夜的3批大鼠分別于尾靜脈給予非那西?。?0 mg·kg－1）、OPZ（20 mg·kg－1）和CZX（20 mg· kg－1），于眼底靜脈叢按時間點取血，供HPLC分析［6－8］。

1．2．3非那西丁、OPZ、CZX在肝微粒體的體外代謝研究實驗動物分組方法及給藥劑量同步驟“1．2．1及1．2．2”，連續(xù)給藥10 d，采用差速離心法制備肝微粒體［9］。將非那西丁、OPZ、CZX分別與各處理組肝微粒體進行體外共溫孵，測定溫孵后對乙酰氨基酚、5’-OHOPZ及6’-OHCZX的生成量，用于評價CYP1A2、CYP2C19和CYP2E1的活性。

2　結果

2．1甘遂與甘草合用對非那西丁、OPZ和CZX在大鼠體內藥代動力學行為的影響 甘遂單用組及合用甘草組對乙酰氨基酚的AUC0－120分別為（312.4±25.65）、（320.4± 41.38）mg·min·L－1，均高于正常對照組［（254.5± 33.65）mg·min·L－1，P＜0.05）］。

甘遂單用組及合用甘草組5’-OHOPZ的AUC0－120分別為（42.94±6.06）、（28.46±4.64）mg·min·L－1，均低于正

常對照組［（121.6±13.55）mg·min·L－1，P＜0.01］。

甘遂與甘草合用組6’-OHCZX的生成速率與正常對照組無差異。

2．2非那西丁、OPZ及CZX在各組大鼠肝微粒體的代謝甘遂單用及與甘草合用組微粒體中，對乙酰氨基酚的生成速率分別為（75.08±5.44）nmol·min－1·g－1及（66.03± 4.94）nmol·min－1·g－1，均高于正常對照組［（36.87± 1.78）nmol·min－1·g－1，P＜0.01）］，提示甘遂與甘草合用可誘導CYP1A2的活性。

甘遂與甘草合用組微粒體中，5’-OHOPZ的生成速率為（44.62±2.70）nmol·min－1·g－1，低于正常對照組［（64.98±6.95）nmol·min－1·g－1，P＜0.01］和甘遂單用組［（62.21±2.94）nmol·min－1·g－1，P＜0.01］。提示甘遂與甘草合用可抑制CYP2C19的活性。

甘遂單用組及合用甘草組6’-OHOPZ的生成速率與正常對照組無差異。

3　討論

改變藥物代謝最常見的原因是CYP酶的誘導和抑制，酶的誘導可增加生物轉化率、降低藥物的濃度，表現(xiàn)為藥物的作用降低，若形成活性藥物則可增加藥物的毒性；而酶的抑制可增加藥物的濃度，延長藥理作用時間，引起毒性反應發(fā)生率增加［10］。

本實驗結果表明，甘遂與甘草合用能誘導CYP1A2的活性，而且這種誘導作用強于單用。這可能會加速甘遂中某些活性成分代謝活化而致毒；甘遂與甘草合用能夠抑制CYP2C19的活性，且合用對CYP2C19活性的抑制程度高于單用。因此，合用可能會使甘遂中某些由CYP2C19代謝的毒性成分產生蓄積，從而導致毒性增加。這些都是相反作用的體現(xiàn)，可能是甘遂不能與甘草合用的原因之一，但仍需進一步實驗證據(jù)支持。

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中國圖書分類號：R-332；R282．71；R329．24；R345．99；R977．3

關鍵詞：甘遂；甘草；CYP450；底物探針法；肝微粒體；藥物相互作用

Key words：Euphorbia kansui；Glycyrrhiza uralensis；CYP450；probe technique；microsome；drug-drug interaction

作者簡介：景欣悅（1978－），女，博士，助理研究員，研究方向：藥物代謝，E-mail：jing＿xinyue＠163．com；段金廒（1956－），男，博士，教授，博士生導師，研究方向：中藥復方與中藥資源化學，通訊作者，E-mail：dja＠njutcm．edu．cn

基金項目：國家重點基礎研究發(fā)展計劃（973計劃）資助項目（No 2011CB505300，2011CB505303）；國家自然科學基金資助項目（No 81303018）；江蘇省高校自然科學基金資助項目（No 13KJB360006）

收稿日期：2015－08－05，修回日期：2015－09－02

文獻標志碼：A

文章編號：1001－1978（2015）11－1625－02

doi：10．3969／j．issn．1001－1978．2015．11．029