融水小型豬的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化系列研究概述

施赫赫

1，2，陳 淦2，劉 科1，劉運(yùn)忠3，王緒敏4，高 翔5，賀爭(zhēng)鳴6，余細(xì)勇7，賴良學(xué)8，唐小江1

(1．廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，廣東佛山 528248;2．廣東貝格生物科技有限公司，廣東佛山 528100;3．廣州醫(yī)藥工業(yè)研究總院，廣州 510240;4．中國(guó)科學(xué)院北京基因研究所，北京 100101;5．南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所，南京 210061;6．中國(guó)食品藥品檢定研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源研究所，北京 100050;7．廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院，廣州 510060;8．中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院，廣州 510530)

我國(guó)具有豐富的小型豬資源，數(shù)十家機(jī)構(gòu)對(duì)近10種小型豬開(kāi)展了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究，培育出五指山小型豬、版納微型豬、貴州小型豬、巴馬小型豬、中國(guó)農(nóng)大小型豬、西藏小型豬、蕨麻小型豬等實(shí)驗(yàn)用小型豬［1－7］，但我國(guó)至今尚未建立可穩(wěn)定供應(yīng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用小型豬品種。與國(guó)外知名的小型豬如哥廷根小型豬等［8］相比，我國(guó)實(shí)驗(yàn)用小型豬的標(biāo)準(zhǔn)化研究和繁育、規(guī)?；a(chǎn)與供應(yīng)都存在巨大的差距，難以滿足日益增長(zhǎng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需求。與國(guó)外采取雜交選育的培育方法不同，我國(guó)實(shí)驗(yàn)用小型豬大多采取自然形成的封閉群選育，因此，良好的種源成為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化的基礎(chǔ)，而“體型小、體重輕、性情溫馴、表型一致”是關(guān)鍵。本課題組在廣西融水縣苗寨發(fā)現(xiàn)了一種體型小、性情溫馴的小黑豬。在廣東貝格生物科技有限公司和廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心的支持下，我們于2012年5月將該品種引種到廣東佛山三水樂(lè)平鎮(zhèn)的小型豬基地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究，現(xiàn)將系列研究情況作一概述。

1 融水小型豬的種源

融水小型豬的種源來(lái)自廣西壯族自治區(qū)融水縣桿洞鄉(xiāng)百秀村苗寨。該豬在當(dāng)?shù)乇环Q為“香豬”、“大苗山香豬”、“苗豬”、“融水黑香豬”等。該苗寨地處崇山峻嶺之中，交通十分不便，因此該豬是近親繁殖，基本沒(méi)有引入外來(lái)基因，經(jīng)過(guò)數(shù)千年繁育，遺傳性狀穩(wěn)定，屬于自然形成的典型封閉群，目前尚無(wú)該豬種質(zhì)資源特性的研究報(bào)道。

2 保種區(qū)選址與硬件設(shè)施建設(shè)

融水小型豬研究基地(廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心小型豬基地)位于佛山市三水區(qū)樂(lè)平鎮(zhèn)所轄林地，占地約200畝，四面樹(shù)林環(huán)繞，自成天然防疫屏障，空氣質(zhì)量良好，遠(yuǎn)離居民點(diǎn)。地理位置滿足衛(wèi)生防疫安全、生產(chǎn)物資的運(yùn)輸需要?；卦O(shè)生產(chǎn)區(qū)、行政辦公區(qū)與后勤生活區(qū)三個(gè)功能區(qū)。生產(chǎn)區(qū)與行政辦公區(qū)、后勤生活區(qū)隔離分開(kāi)，處于下風(fēng)向，生產(chǎn)區(qū)內(nèi)設(shè)置種豬配種懷孕舍、分娩舍、保育舍，采用高床養(yǎng)殖(彩插12圖1)。

豬舍設(shè)計(jì)為磚墻全封閉式，隔熱瓦封頂，安裝抽風(fēng)機(jī);冬季保暖采用保溫?zé)簟⒈貕|板;門(mén)窗采用鋁合金，加裝防蚊紗窗、紗門(mén)和擋鼠板;排污采用環(huán)保處理，設(shè)計(jì)為雨水與糞尿污水分流;每一棟豬舍配備一個(gè)三級(jí)化糞池或沼氣池，將糞尿進(jìn)行無(wú)害化處理和資源化利用。

3 融水小型豬種質(zhì)特性

3.1 體型外貌

融水小型豬體型外貌見(jiàn)彩插12圖2。該豬體軀矮小，被毛全黑，少量有唇白和肢端白。頭較大，面平直，額面有縱行皺紋，耳較小薄，略向前伸，稍下垂或兩側(cè)平伸。頸部短而細(xì)，背腰平直或微凹，腹較大下垂但不拖地，尾巴細(xì)長(zhǎng)。母豬乳頭多為5～6對(duì)，少量能達(dá)到7對(duì)。后軀豐滿，四肢短細(xì)緊湊，肢端常見(jiàn)為臥系。

3.2 生長(zhǎng)性能

融水小型豬生長(zhǎng)緩慢，F(xiàn)1代雌雄仔豬6月齡、12月齡平均體重分別為 17．21±5．20 Kg和 16．35±5．23 Kg，26．97 ±6．49 Kg 和 26．53 ± 5．65 kg，詳見(jiàn)另文報(bào)道。3年齡的空懷母豬平均體重44．60 kg。

3.3 繁殖性能

母豬發(fā)情癥狀明顯，一個(gè)情期的自然交配受孕率較高，約88．3%;引進(jìn)母豬配種后妊娠期平均112 d，初產(chǎn)平均胎產(chǎn)仔6．1頭，活仔數(shù)5．9頭;經(jīng)產(chǎn)平均產(chǎn)仔 7．9頭，活仔數(shù) 5．9頭。仔豬 45～60 d齡斷奶。

4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化系列研究

4.1 常規(guī)指標(biāo)的測(cè)定

按照《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制》的要求［9］，開(kāi)展了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化系列研究，包括4月齡和12月齡融水小型豬的血液學(xué)、血清生化指標(biāo)分析，對(duì)F1代從初生至12月齡進(jìn)行連續(xù)跟蹤測(cè)量體重及體尺值，測(cè)定指標(biāo)包括:體重、體長(zhǎng)、體高、胸圍、管圍、腿臀圍、胸深、胸寬、嘴裂長(zhǎng)度［10］。采用淋巴細(xì)胞培養(yǎng)法進(jìn)行染色體分析，測(cè)得常染色體18對(duì)，性染色體1對(duì)。測(cè)定了臟器重量及臟器系數(shù)、尿液生化及其他基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。以上研究詳見(jiàn)另文報(bào)道。

4.2 質(zhì)量控制研究

參考實(shí)驗(yàn)用小型豬北京地方標(biāo)準(zhǔn)［11］，對(duì)保種群進(jìn)行質(zhì)量控制研究，包括微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、病理學(xué)、配合飼料、環(huán)境設(shè)施和遺傳質(zhì)量控制六方面。

4．2．1 微生物學(xué):隨機(jī)選擇23頭融水小型豬，經(jīng)常規(guī)免疫程序免疫后的，檢測(cè)豬瘟抗體、藍(lán)耳抗體，結(jié)果均呈陽(yáng)性反應(yīng)，說(shuō)明豬群獲得免疫性保護(hù)。隨機(jī)選擇61頭融水小型豬進(jìn)行圓環(huán)病毒抗體檢測(cè)，結(jié)果均為陰性，說(shuō)明該豬群沒(méi)有受圓環(huán)病毒感染。

4．2．2 寄生蟲(chóng)學(xué):經(jīng)過(guò)定期(3個(gè)月一次)給予體內(nèi)外驅(qū)蟲(chóng)藥后，進(jìn)行體表寄生蟲(chóng)檢測(cè)，未發(fā)現(xiàn)體外寄生蟲(chóng)，弓形蟲(chóng)未檢測(cè)。

4．2．3 飼料:生長(zhǎng)料，哺乳料及維持料與飼料廠家合作，根據(jù)北京地方標(biāo)準(zhǔn)制作，開(kāi)食料采用廠家提供的教槽料。

4．2．4 組織病理學(xué):對(duì)4頭健康的融水小型豬(4月齡，雌雄各半)進(jìn)行解剖，做組織病理切片，作為融水小型豬在疾病診斷時(shí)的正常對(duì)照，詳見(jiàn)另文報(bào)道。

4．2．5 環(huán)境及設(shè)施:飼養(yǎng)環(huán)境為普通級(jí)，豬舍為全封閉建造，門(mén)窗加裝防蚊紗窗，防鼠擋板。濕簾通風(fēng)系統(tǒng)和局部保溫?zé)艨刂粕醿?nèi)溫濕度，夏天溫度最高控制在28℃ ～30℃，冬天溫度最低控制在16℃ ～20℃，新生仔豬局部小環(huán)境通過(guò)使用保溫電熱板和保溫箱，溫度32℃ ～35℃，減少仔豬的寒冷應(yīng)激。

4．2．6 遺傳質(zhì)量控制:對(duì)融水小型豬線粒體DNA測(cè)定分析，并與國(guó)內(nèi)外多個(gè)豬種比較發(fā)現(xiàn)，融水小型豬比已知的蘭嶼豬更為古老，詳見(jiàn)另文報(bào)道。另外，融水小型豬的全基因測(cè)序工作已經(jīng)完成，目前正在進(jìn)行分析工作，將進(jìn)一步闡明其與貴州香豬等其他豬種遺傳關(guān)系。

5 討論

小型豬是一種理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，在解剖學(xué)、生理學(xué)、疾病發(fā)生機(jī)理等方面與人極為相似，在生命科學(xué)研究領(lǐng)域中具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。未來(lái)發(fā)展中可以成為在基因組學(xué)、高密度生物學(xué)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、體外毒理學(xué)和相關(guān)技術(shù)方面有發(fā)展前景的平臺(tái)［12］。美國(guó)明尼蘇達(dá)大學(xué)于1949年開(kāi)始了小型豬方面的研究，其后德國(guó)、日本、法國(guó)也先后培育出小型豬品系。美國(guó)培育的小型豬品系有明尼蘇達(dá)－荷曼系(Minnesota－Hormel)、皮特曼 － 摩爾系(Pitman－Moore)、亨浮額德系(Hanford)、尤卡坦(Yucatan)種;德國(guó)培育的哥廷根(Gottingen)小型豬;日本培育的小型豬品系有阿米尼種(Oh mini)、克勞恩咪尼系(Clawn mini)和、會(huì)津系(Huei－Jin)和微型迷你豬(Microminipig)，法國(guó)培育的小型豬品系有科西嘉系(Corsica)，并廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究［13－20］。目前哥廷根小型豬是國(guó)際公認(rèn)的最佳醫(yī)用模式動(dòng)物之一，獲得全世界醫(yī)藥管理機(jī)構(gòu)認(rèn)可。目前，哥廷根小型豬種群保種在三個(gè)國(guó)家，形成了3個(gè)丹麥種，1個(gè)美國(guó)種和1個(gè)德國(guó)種［21］。

我國(guó)小型豬的培育工作起步晚，80年代初才開(kāi)始對(duì)小型豬資源進(jìn)行調(diào)查和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究，與國(guó)外先進(jìn)國(guó)家相比落后了幾十年。但我國(guó)具有豐富而又獨(dú)特的小型豬資源，經(jīng)過(guò)選育及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究，可適應(yīng)生命科學(xué)研究多種需求，為生命科學(xué)研究提供完善及豐富的動(dòng)物模型。北京農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧系教研室與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所從1985年開(kāi)始研究選育我國(guó)自己的小型豬［22］。后來(lái)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院引入五指山豬，云南農(nóng)業(yè)大學(xué)從西雙版納引入版納微型豬，貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院從貴州黔東南苗族侗族自治州引入香豬，廣西農(nóng)業(yè)大學(xué)從巴馬瑤族自治縣引入巴馬香豬［23］。南方醫(yī)科大學(xué)從青藏高原地區(qū)引入藏豬［24］。

為了便于比較，我們繪制了國(guó)內(nèi)外主要9種小型豬［7，25－28］的體重變化曲線(封 3 圖 3)。融水小型豬的體重較輕，雌雄12月齡的體重分別僅為26．97 kg和26．53 kg，與哥廷根小型豬相當(dāng)，體現(xiàn)了該品種“小”的特點(diǎn)。在繁殖性能方面，貝格豬初產(chǎn)仔數(shù)6．0頭，活仔數(shù) 5．8頭，經(jīng)產(chǎn)平均產(chǎn)仔 7．9頭，活仔數(shù)5．9頭，遠(yuǎn)高于廣州地區(qū)西藏小型豬初產(chǎn)仔數(shù)2．3 頭，活仔 2．2 頭，經(jīng)產(chǎn) 5．7 頭，活仔 4．9 頭［29］，高于蕨麻小型豬產(chǎn)仔數(shù) 5．97 頭，活仔數(shù) 5．59 頭［30］;稍低于五指山小型豬初產(chǎn)仔數(shù)6．67頭，活仔數(shù)6．56 頭［31］;接近國(guó)外雜交繁育的 Gottingen 小型豬平均產(chǎn)仔數(shù)6．5頭［8］，說(shuō)明融水小型豬繁育性能良好，可穩(wěn)定繁育、保種。

國(guó)外小型豬品種都是改良豬與未改良地方品種或野豬雜交育成的，而我國(guó)小型豬均產(chǎn)于偏遠(yuǎn)山區(qū)，無(wú)外來(lái)豬種與之雜交，當(dāng)?shù)厝肆?xí)慣于將豬進(jìn)行采用親子交配、兄妹交配等高度近交的自繁自養(yǎng)方式，外來(lái)豬種極難與之雜交，由此形成了封閉的小型豬群體，具有遺傳、表型更加穩(wěn)定、性成熟早、繁殖性能強(qiáng)、生長(zhǎng)慢、體型矮小、性成熟早、抗逆性強(qiáng)等生物學(xué)特性，是理想的生物學(xué)研究模型［32］。融水小型豬具有上述特點(diǎn)，尤其是性情溫順的特點(diǎn)，在體重較輕時(shí)不僅可以抱起保定，成年后也容易固定?？梢灶A(yù)測(cè)，如果對(duì)融水小型豬進(jìn)行定向選育，可能得到體型更小、性格溫馴的優(yōu)質(zhì)實(shí)驗(yàn)用小型豬。

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