HE4和CA125聯(lián)合檢測在子宮內(nèi)膜病變中的價(jià)值

程喜鋒，魯振華，楊小頎

(陜西中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院，陜西 咸陽 712000)

HE4和CA125聯(lián)合檢測在子宮內(nèi)膜病變中的價(jià)值

程喜鋒，魯振華，楊小頎

(陜西中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院，陜西 咸陽 712000)

目的 探討人附睪上皮分泌蛋白4(HE4)對子宮內(nèi)膜癌的診斷意義，及其與糖鏈抗原125(CA125)聯(lián)合檢測對子宮內(nèi)膜惡性腫瘤與子宮內(nèi)膜良性病變的診斷價(jià)值。方法 分別應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光法和雙抗體夾心時(shí)間分辨免疫熒光分析法檢測26例子宮內(nèi)膜癌患者、28例功能失調(diào)性子宮出血患者及32例健康女性血清中的HE4和CA125水平，并進(jìn)行分析。結(jié)果 子宮內(nèi)膜癌組的HE4水平明顯高于功能失調(diào)性子宮出血組和健康對照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為2.463、2.471，均P<0.05)；子宮內(nèi)膜癌組中，單獨(dú)檢測HE4的靈敏度和特異度分別為46.27%和95.08%，單獨(dú)檢測CA125的靈敏度和特異度分別為39.91%和98.21%，二者聯(lián)合檢測時(shí)靈敏度和特異度分別為52.73%和95.03%，較CA125和HE4單項(xiàng)檢測靈敏度增高，特異度較CA125略低。結(jié)論 聯(lián)合檢測HE4和CA125提高了檢測靈敏度，特異度降低，對子宮內(nèi)膜癌具有更高的診斷價(jià)值，為聯(lián)合檢測HE4和CA125鑒別子宮內(nèi)膜良、惡性腫瘤提供臨床依據(jù)。

子宮內(nèi)膜惡性腫瘤；子宮內(nèi)膜良性病變；人附睪上皮分泌蛋白4；糖鏈抗原125

子宮內(nèi)膜癌(endometrial carcinoma，EC)是發(fā)生于子宮內(nèi)膜的一組上皮性惡性腫瘤，以來源于子宮內(nèi)膜腺體的腺癌最常見，其為女性生殖道三大惡性腫瘤之一，占女性全身惡性腫瘤7%，占女性生殖道腫瘤的20%～30%[1]。近年來，由于經(jīng)濟(jì)生活的改善與發(fā)展，人的壽命延長，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈上升趨勢。不同于卵巢癌，子宮內(nèi)膜癌患者的臨床癥狀相對而言比較典型，包括陰道排液、月經(jīng)量增加、經(jīng)期延長、絕經(jīng)后不規(guī)則出血等，因此臨床上比較容易診斷，很多患者在疾病早期就能被診斷，可接受規(guī)范治療，并且預(yù)后較好。但是，在鑒別子宮內(nèi)膜惡性腫瘤與子宮內(nèi)膜良性病變時(shí)，仍然需要腫瘤標(biāo)志物的協(xié)助。糖鏈抗原125(CA125)是子宮內(nèi)膜癌診斷時(shí)最常應(yīng)用的一種腫瘤標(biāo)志物，但其診斷子宮內(nèi)膜癌的靈敏度較低。所以，臨床中需要尋找一種具有較高靈敏度的腫瘤標(biāo)志物來診斷子宮內(nèi)膜癌。人附睪上皮分泌蛋白4(human epididymis secretory protein 4，HE4)是一種隱匿的糖蛋白，又稱為核心表位蛋白2(WFDC2)。有研究表明，正常女性生殖道及乳腺的腺上皮、呼吸道上皮、腎臟遠(yuǎn)曲小管、結(jié)腸黏膜、唾液腺中均有HE4的表達(dá)，因此對HE4檢測可能有助于子宮內(nèi)膜癌的早期診斷[2]。本文主要是通過檢測血清中的HE4和CA125水平，初步討論HE4和CA125聯(lián)合檢測對子宮內(nèi)膜良、惡病變的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 研究對象

研究對象均選自陜西中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院2011年12月至2014年12月住院且經(jīng)病理診斷確診的患者。子宮內(nèi)膜癌組26例，年齡48～69歲，平均(53.9±8.2)歲；體質(zhì)量為59～64kg，平均為(61.5±1.9)kg；按照2009年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)修訂的手術(shù)病理分期標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期18例，Ⅱ期6例，Ⅲ期2例；組織分級：G1有21例，G2有3例，G3有2例；組織病理類型：子宮內(nèi)膜樣腺癌17例，漿液性腺癌3例，黏液性癌2例，透明細(xì)胞癌4例。功能失調(diào)性子宮出血組(功血組)28例，年齡45～58歲，平均(50.8±3.2)歲；體質(zhì)量為58～67kg，平均為(62.1±3.8)kg。健康對照組為同期健康體檢者32例，年齡38～68歲，平均(51.9±8.2)歲；體質(zhì)量為57～65kg，平均為(62.3±1.3)kg；無婦科疾病，無心、肝、肺、胃等重要臟器的疾患，肝、腎功能正常，家族中無腫瘤病史。

子宮內(nèi)膜癌組及功血組患者術(shù)前均未使用任何激素治療，子宮內(nèi)膜癌組患者術(shù)前未行化療或放療，3組采血時(shí)均非月經(jīng)期，并已排除盆腔炎性疾病、子宮內(nèi)膜異位癥、妊娠及其他器官腫瘤病史。3組的平均年齡和體質(zhì)量比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。該研究項(xiàng)目已征得本院倫理委員會同意，并取得研究對象的知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集

取自患者手術(shù)前標(biāo)本，清晨空腹自肘靜脈采血3～5mL，經(jīng)3 000r/min離心10min，分離血清，收集分裝血清3份，每份500μL，-20℃冷凍儲存待測。

1.2.2 血清人附睪上皮分泌蛋白4的檢測

由羅氏診斷產(chǎn)品有限公司提供的診斷試劑盒，嚴(yán)格按照說明書操作，根據(jù)電化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行測定。正常測定范圍為2～70pmol/L，大于70pmol/L為陽性結(jié)果。

1.2.3 血清糖鏈抗原125的檢測

采用適用于96微孔反應(yīng)板的時(shí)間分辨熒光測定儀測量，通過雙抗體夾心時(shí)間分辨免疫熒光分析法進(jìn)行測定。正常測定范圍為0～35IU/mL；大于35IU/mL為陽性結(jié)果。

1.2.4 聯(lián)合檢測陽性規(guī)定

應(yīng)用篩檢中的聯(lián)合檢測-并聯(lián)檢測，即規(guī)定HE4及CA125任一項(xiàng)為陽性結(jié)果為聯(lián)合檢測陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 各組血清人附睪上皮分泌蛋白4及糖鏈抗原125水平的比較

子宮內(nèi)膜癌組、功血組和對照組的血清HE4范圍分別為41.30～210.50pmol/L、14.70～58.10pmol/L、3.20～52.60pmol/L，子宮內(nèi)膜癌組血清HE4與功血組、對照組之間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。子宮內(nèi)膜癌組、功血組和對照組的血清CA125范圍分別為23.22～236.50IU/mL、3.67～56.20IU/mL、2.16～31.50IU/mL，子宮內(nèi)膜癌組血清CA125與功血組、對照組之間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，見表1

功血組與對照組中血清HE4水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.803，P=0.07>0.05)；功血組與對照組中血清CA125水平比較差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.923，P=0.08>0.05)。

2.2 血清人附睪上皮分泌蛋白4及糖鏈抗原125標(biāo)志物聯(lián)合檢測子宮內(nèi)膜癌的敏感度和特異度比較

HE4單項(xiàng)檢測子宮內(nèi)膜癌的靈敏度高于CA125單項(xiàng)檢測，但CA125單項(xiàng)檢測子宮內(nèi)膜癌的特異度高于HE4單項(xiàng)檢測，聯(lián)合檢測導(dǎo)致靈敏度升高，特異度降低，見表2。

2.3 不同臨床分期子宮內(nèi)膜癌患者血清人附睪上皮分泌蛋白4水平的比較

臨床分期Ⅰ～Ⅱ期子宮內(nèi)膜癌組患者HE4范圍為41.30～130.50pmol/L，平均值為(94.12±32.72)pmol/L；Ⅲ期子宮內(nèi)膜癌組患者HE4范圍為180.50～210.50pmol/L，平均值為(191.68±9.32)pmol/L；經(jīng)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.046，P<0.05)。

表2 血清HE4和CA125聯(lián)合檢測子宮內(nèi)膜癌的敏感度、特異度(%)

Table 2 Sensitivity and specificity of joint detection of HE4 and CA125 in diagnosis of endometrial cancer(%)

3 討論

3.1 糖鏈抗原125檢測在子宮內(nèi)膜癌中的應(yīng)用

子宮內(nèi)膜癌是女性生殖道常見的惡性腫瘤之一，近年其發(fā)病率有明顯上升的趨勢，早期診斷和早期治療是子宮內(nèi)膜癌患者改善預(yù)后的重要手段。CA125是卵巢上皮性類癌的相關(guān)性抗原，在胚胎期由上皮細(xì)胞所分泌，正常情況下不分泌或極少分泌，當(dāng)卵巢發(fā)生癌變時(shí)，CA125值就會升高，因而是比較好的診斷卵巢上皮性癌的一種指標(biāo)。有研究證實(shí)，CA125是目前診斷子宮內(nèi)膜癌最常用的腫瘤標(biāo)志物。術(shù)前CA125水平與疾病的分期、肌層浸潤深度、腹腔細(xì)胞學(xué)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)[3]；Takeshima等(1994年)的一項(xiàng)研究顯示，早期子宮內(nèi)膜癌患者中只有10%的CA125水平升高；Carpenter等(1996年)研究顯示，接受腹部放射治療而目前病情穩(wěn)定的子宮內(nèi)膜癌患者血清CA125水平往往也升高。CA125檢測子宮內(nèi)膜癌(包括所有期別)的特異度和敏感度均較低，所以需要一種靈敏性和特異性較強(qiáng)的標(biāo)志物來提高子宮內(nèi)膜癌的檢出率。

3.2 人附睪上皮分泌蛋白4檢測在子宮內(nèi)膜癌中的應(yīng)用

HE4基因最早是在人附睪上皮細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的，可編碼人附睪分泌蛋白HE4，該基因位于染色體20ql2～13.1，全長約12kb，由5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子組成，含有2個(gè)WAP(wheyaicdicprotein)結(jié)構(gòu)域，故也稱為WFDC2(WAP4-disulphide core domain 2)[4]。HE4具有疑似胰蛋白酶抑制劑的特性，屬于乳清酸性4-二硫化中心(WFDC)蛋白家族。HE4基因最早是1991年由Kirchhoff等在人附睪上皮細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的，被認(rèn)為是附睪特異性、生殖相關(guān)的蛋白，其生物功能目前尚不清楚。目前有許多學(xué)者研究顯示HE4可作為腫瘤標(biāo)志物，特別是在卵巢癌的診斷中，血清HE4水平有明顯的增高；在其它惡性腫瘤中，HE4也會增高，HE4可以篩檢出子宮內(nèi)膜癌[5-6]。Huhtinen等[7]在子宮內(nèi)膜癌標(biāo)本中檢測到了HE4基因表達(dá)，但是由于樣本量較少，未發(fā)現(xiàn)與正常組織有明顯差異。目前已經(jīng)在子宮內(nèi)膜癌組織及細(xì)胞株中發(fā)現(xiàn)HE4 mRNA和蛋白的明顯高表達(dá)[8]。這些結(jié)果提示HE4可能是發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌的一種新型腫瘤標(biāo)志物。

本研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜癌組患者血清HE4水平明顯高于功血組和健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，而功血組HE4水平與健康對照組比較，差異無顯著性，提示HE4可以成為子宮內(nèi)膜癌的腫瘤標(biāo)志物。Moore等[5]研究發(fā)現(xiàn)，HE4診斷子宮內(nèi)膜癌的敏感性為46%，特異性為95%。Bignotti等[9]發(fā)現(xiàn)HE4診斷子宮內(nèi)膜癌的敏感性為67%，特異性為95%。本研究表明，HE4診斷子宮內(nèi)膜癌的靈敏度為46.27%，特異度為95.08%，與上述國外報(bào)道的數(shù)值很相近。

3.3 人附睪上皮分泌蛋白4和糖鏈抗原125聯(lián)合檢測在子宮內(nèi)膜癌中的應(yīng)用

有研究發(fā)現(xiàn)，血清HE4+CA125聯(lián)合檢測能更有效地辨別盆腔腫物的良、惡性[10]。HE4聯(lián)合CA125比單獨(dú)應(yīng)用兩種標(biāo)記物中的任何一種都更具優(yōu)越性[11]。本研究證實(shí)，二者聯(lián)合檢測子宮內(nèi)膜癌時(shí)，其靈敏度和特異度分別為52.73%和95.03%，較CA125、HE4單項(xiàng)檢測靈敏度增高，特異度較CA125略低。HE4和CA125聯(lián)合檢測提高了診斷子宮內(nèi)膜癌的靈敏度，但特異度略有下降，提示血清HE4+CA125二者聯(lián)合檢測很有可能將提高對子宮內(nèi)膜癌的診斷水平。

關(guān)于HE4與子宮內(nèi)膜癌分期關(guān)系的研究，Moore等[12]發(fā)現(xiàn)，HE4鑒別Ⅰ期和Ⅱ期子宮內(nèi)膜癌的敏感性為94%，陰性預(yù)測值為97%。Kalogera等[13]發(fā)現(xiàn)，血清HE4在子宮內(nèi)膜癌患者中升高且與肌層浸潤程度關(guān)聯(lián)(P<0.001)。本研究表明，Ⅰ～Ⅱ期子宮內(nèi)膜癌組患者HE4平均值低于Ⅲ期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其表明隨著子宮內(nèi)膜癌分期的升高，HE4水平也在升高。這些都需要大樣本的研究進(jìn)一步證實(shí)，并廣泛應(yīng)用于臨床研究。

目前，HE4已開始作為子宮內(nèi)膜癌腫瘤標(biāo)記物進(jìn)行研究[2,7]。Moore等[5]總結(jié)了多種腫瘤標(biāo)記物對診斷子宮內(nèi)膜癌的價(jià)值，結(jié)果表明HE4在早期診斷子宮內(nèi)膜癌方面優(yōu)于CA125、CA72-4、可溶性間皮素相關(guān)蛋白(SMRP)等其他腫瘤標(biāo)記物。

綜上所述，HE4在診斷子宮內(nèi)膜癌方面有較高的靈敏度，很有可能成為子宮內(nèi)膜良、惡性病變鑒別的一種新的且臨床即實(shí)用又經(jīng)濟(jì)的腫瘤標(biāo)記物。在診斷子宮內(nèi)膜癌方面當(dāng)追求診斷靈敏性，區(qū)分良、惡性腫瘤時(shí)應(yīng)選擇HE4、CA125兩種腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測。本研究樣本量有限，兩者聯(lián)合檢測在子宮內(nèi)膜癌的治療、判斷預(yù)后以及術(shù)后隨訪中的應(yīng)用價(jià)值需要臨床工作者進(jìn)一步研究和證實(shí)。

[1]謝幸,茍文麗.婦產(chǎn)科學(xué)[M].8版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:326.

[2]Li Jin-ping, Dowdy Sean, Tipton T,etal.HE4 as a biomarker for ovarian and endometrial cancer management[J].Expert Rev Mol Diagn,2009,9(6):555-566.

[3]Chen Y L, Huang C Y, Chien T Y,etal.Value of pre-operative serum CA125 level for prediction of prognosis in patients with endometrial cancer[J].Aust N Z J Obstet Gynaecol,2011,51(5):397-402.

[4]Escudero J M, Auge J M, Filella X,etal. Comparison of serum human epididymis protein 4 with cancer antigen 125 as a tumor marker in patients with malignant and nonmalignant disease[J].Clin Chem, 2011,57(11):1534-1544.

[5]Moore R G, Brown A K, Miller M C,etal. Utility of a novel serum tumor biomarker HE4 in patients with endometrioid adenocarcinoma of the uterus[J]. Gynecol Oncol, 2008, 110(2):196-201.

[6]Montagnana M, Lippi G, Ruzzenente O,etal.The utility of serum human epididymis protein 4(HE4) in patients with a pelvic mass[J].J Clin Lab Anal,2009,23(5):331-335.

[7]Huhtinen K, Suvitie P, Hiissa J,etal. Serum HE4 concentration differentiates malignant ovarian tumours from ovarian endometriotic cysts[J].Br J Cancer, 2009, 100(8): 1315-1319.

[8]Li Jin-ping, Chen Hai-bin, Mariani A ,etal.HE4(WFDC2) promotes tumor growth in endometrial cancer cell lines[J].Int J Mol Sci,2013,14(3):6026-6043.

[9]Bignotti E, Ragnoli M, Zanotti L,etal. Diagnostic and prognostic impact of serum HE4 detection in endometrial carcinoma patiens[J].Br J Cancer, 2011, 104(9): 1418-1425.

[10]Moore R G, McMeekin D S, Brown A K,etal. A novel multiple marker bioassay utilizing HE4 and CA125 for the prediction of ovarian cancer in patients with a pelvic mass[J].Gynecol Oncol,2009,112(1):40-46.

[11]董麗,昌曉紅,葉雪,等.血清人附睪分泌蛋白4和CA125 水平檢測在卵巢惡性腫瘤中的診斷價(jià)值[J].中華婦產(chǎn)科雜志,2008,43(12):931-936.

[12]Moore R G, Miller C M, Brown A K,etal.Utility of tumor marker HE4 to predict depth of myometrial invasion in endometrioid adenocarcinoma of the uterus[J].Int J Gynecol Cancer,2011,21(7):1185-1190.

[13]Kalogera E, Scholler N, Powless C,etal.Correlation of serum HE4 with tumor size and myometrial invasion in endometrial cancer[J].Gynecol Oncol, 2012, 124(2): 270-275.

[專業(yè)責(zé)任編輯：安瑞芳]

Value of human epididymis secretory protein 4 combined with carbohydrate antigen125 in diagnosis of endometrial lesions

CHENG Xi-feng, LU Zhen-hua, YANG Xiao-qi

(SecondAffiliatedHospitalofShaanxiUniversityofChineseMedicine,ShaanxiXianyang712000,China)

Objective To explore the diagnostic value of human epididymis secretory protein 4 (HE4) in endometrial malignant tumor and to compare it with carbohydrate antigen 125 (CA125) in diagnosis of endometrial malignant tumor and endometrial benign lesions. Methods Serum levels of HE4 and CA125 in 26 cases of endometrial carcinoma, 28 cases of dysfunctional uterine bleeding, and 32 cases of healthy controls were detected with electrochemiluminescence immunoassay and double antibody sandwich time-resolved immunofluorescence analysis method. Results Serum levels of HE4 among endometrial cancer patients were obviously higher than those of patients with dysfunctional uterine bleeding and healthy controls, and the differences were significant (tvalue was 2.463 and 2.471, respectively, bothP<0.05). In endometrial cancer group, the sensitivity and specificity of detection of HE4 were 46.27% and 95.08%, respectively, and those of CA125 were 39.91% and 98.21%, respectively. The sensitivity of joint detection (52.73%) was higher than that of HE4 and CA125, but the specificity of joint detection (95.03%) was lower than that of CA125. Conclusion Joint detection of HE4 and CA125 improves the sensitivity but reduces the specificity, which has higher diagnostic value for endometrial cancer. It provides clinical evidence for differential diagnosis of endometrial benign from malignant tumors.

endometrial malignant tumor；endometrial benign lesions；human epididymis secretory protein 4 (HE4)；carbohydrate antigen 125 (CA125)

2015-06-05

程喜鋒(1979-)，女，主治醫(yī)師，碩士，主要從事婦科腫瘤的研究。

楊小頎，主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.04.018

R711.32

A

1673-5293(2015)04-0709-03