三類消毒藥對牛舍消毒效果的比較

于亞玲，霍妍明，陳國亮，張東冉，李曉麗，薛小雙，趙伍祥，邱殿銳

(1.河北省承德市動物疫病預防控制中心, 河北 承德 067000;2.河北省承德市畜牧研究所, 河北 承德067000; (3.河北旅游職業(yè)學院,河北 承德 067000)=

三類消毒藥對牛舍消毒效果的比較

于亞玲1，霍妍明1，陳國亮1，張東冉1，李曉麗1，薛小雙3，趙伍祥2，邱殿銳2

(1.河北省承德市動物疫病預防控制中心, 河北 承德 067000;2.河北省承德市畜牧研究所, 河北 承德067000; (3.河北旅游職業(yè)學院,河北 承德 067000)=

[目的]比較醛類消毒劑、季銨鹽類及兩類消毒藥的絡合物三類消毒藥對牛舍空氣、地面細菌的抑菌效果的差異，探究牛舍在溫度為11～24℃時最佳消毒周期。[方法]用三種消毒藥對不同圈舍消毒，采集不同高度的空氣細菌樣品并在消毒后的八天連續(xù)采集地面細菌樣品。[結果]三種消毒藥對空氣中細菌的和圈舍地面細菌消殺率都很高，均超過80%，超強毒滅消毒效果最理想。[結論]四天為一個消毒周期最理想。

醛類消毒劑;季銨鹽類消毒劑;醛類和季銨鹽類絡合物消毒劑;消毒周期

近些年來，我國養(yǎng)殖業(yè)集約化程度不斷提高，規(guī)?；B(yǎng)殖場逐漸增多，科學的飼養(yǎng)管理理念越來越得到養(yǎng)殖場的認可，其中體現(xiàn)在日常預防性消毒工作中，但還存在一些誤區(qū)[1]。消毒劑的種類繁多，消毒劑配置，適用范圍不盡相同，制定消毒方案，選擇適合的消毒藥品，是預防疫病的發(fā)生的重要環(huán)節(jié)[2-3]。本試驗于2013年9月選取三個養(yǎng)殖場，養(yǎng)殖場溫度11～24℃，針對醛類消毒劑、季銨鹽類及兩類消毒藥的絡合物三類消毒藥[4-5]，通過噴灑消毒的方法，以牛舍的空氣，地面為消毒對象，其消毒效果進行比較和評價，并對消毒周期進行探索，為養(yǎng)殖生產提供較優(yōu)的消毒藥品和消毒方案。

1 材料與方法

1.1 材料

消毒劑：超強毒滅(苯扎溴銨絡合稀戊二醛溶液)，醛滅靈(稀戊二醛溶液)，強效百毒殺(苯扎溴銨溶液)。

器材和藥品：培養(yǎng)基，鑷子，滅菌棉簽，EP管，，生理鹽水，移液器，簽字筆，分析天平，恒溫培養(yǎng)箱，蒸汽式高壓鍋，菌落計數(shù)器，噴霧器，滅菌玻璃珠等。

1.2 試驗方法

選取六個圈舍A、B、C、D、E、F，確定每個圈舍的三個位置。并在每個位置處用油漆畫若干個1 cm*1 cm的圓。

1.2.1 空氣中細菌采集 沉降法。對A、B、C圈舍進行機械清掃，然后使用噴霧器噴灑自來水對圈舍進行預處理。30 min后在每個圈舍的標記位置，距地面2 m，1 m，0.5 m，分別放置培養(yǎng)基，打開培養(yǎng)皿蓋子，使培養(yǎng)基表面暴露10 min，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置[6]。然后用噴霧器對三個圈舍噴灑三種不同的消毒藥(按照說明書的配制方法進行配制)，30 min后在距地面2 m，1 m，0.5 m，分別放置培養(yǎng)基，做相同處理。采樣后，將培養(yǎng)基置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內培養(yǎng)24 h，使用菌落計數(shù)器進行菌落數(shù)。以圈舍為單位，即一個圈舍為一組，進行結果統(tǒng)計[7]。

1.2.2 地面上細菌采集 棉簽擦拭法。對A、B、C圈舍(天天對其進行消毒)進行機械清掃，然后使用噴霧器噴灑自來水對圈舍進行預處理。30 min后用滅菌棉簽涂抹整個圓圈進行采樣(每次采集新圓圈的細菌)，每個位置采取三個圓圈作為一份樣品裝入一個EP管中，做好標記。然后用噴霧器對三個圈舍噴灑三種不同的消毒藥(按照說明書的配制方法進行配制)，30 min后用滅菌棉簽涂抹整個圓圈進行采樣(每次采集新圓圈的細菌)，每個位置采取三個圓圈作為一份樣品裝入一個EP管中，做好標記。A、B、C圈舍，連續(xù)9天重復上述實驗并記錄[8-9]。

1.2.3 確定消毒周期的方法 第一天對圈舍D、E、F的實驗方法圈舍A、B、C相同。第二天對D、E、F圈舍作如下處理：先進行機械清掃，然后使用噴霧器噴灑自來水對圈舍進行預處理。30 min后用滅菌棉簽涂抹整個圓圈進行采樣(每次采集新圓圈的細菌)，每個位置采取三個圓圈作為一份樣品裝入一個EP管中，做好標記，連續(xù)消毒九天。

1.2.4 地面采集樣品的處理方法 分別向采集樣品的EP管中加入1 ml的生理鹽水，靜置30 min，轉移入自制的EP管中，6 000 rpm，離心1 min，取上清液進行倍比稀釋，稀釋度分別為1:102，1:103，1:104，1:105吹吸混勻，做好標記。無菌環(huán)境，取稀釋的上清液10 ul接種至無菌培養(yǎng)基中，放入三個滅菌玻璃珠，輕輕晃動培養(yǎng)皿若干次，使上清液均勻涂布在培養(yǎng)上，將培養(yǎng)皿倒置放入置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內培養(yǎng)24小時，使用菌落計數(shù)器進行菌落計數(shù)[10]。

2 結果和結論

2.1 空氣消毒效果分析

三種消毒藥對三個養(yǎng)殖場A、B、C圈舍空氣中細菌的消殺效果如表1，三種消毒藥的消毒率都高于80%，其中超強毒滅的效果明顯優(yōu)于醛滅靈和強效百毒殺，醛滅靈的消殺效果強于強效百毒殺。

2.2 天天對地面消毒效果分析

三種消毒藥對三個養(yǎng)殖場A、B、C圈舍地面上細菌的消殺效果如表2，三種消毒藥的消毒率都高于80%，其中超強毒滅的效果優(yōu)于醛滅靈和強效百毒殺，醛滅靈的消殺效果強于強效百毒殺。如圖1顯示，每天消毒圈舍地面的細菌數(shù)量逐漸減少，消毒效果顯著，連續(xù)九天消毒菌落數(shù)量減少50%左右。

注：同列標相同小寫字母者表示差異不顯著(\%P﹥0.05)，有不同小寫字母表示差異顯著(P﹤0.05)，有不同大寫字母表示差異極顯著(P\%﹤0.01)

2.3 圈舍消毒周期分析結果

三種消毒藥對三個養(yǎng)殖場D、E、F圈舍地面上細菌的消殺效果如表3，三種消毒藥的消毒率都高于80%，其中超強毒滅的效果優(yōu)于醛滅靈和強效百毒殺，醛滅靈的消殺效果強于強效百毒殺。

根據(jù)圖1,細菌消毒及消毒后增長曲線表明，細菌在消毒后前四天緩慢增長，第五天細菌增長速率增大，接下來三天細菌維持在較高水平。為了預防疾病的爆發(fā)建議在細菌恢復率在60-80%進行消毒效果最佳。

3 討論和小結

隨著養(yǎng)殖場規(guī)?；涂茖W化的推進，牛舍建設、疾病預防和日常消毒和防護都得到了高度的重視。從日常消毒角度講，消毒藥的選擇和消毒周期的確定，對養(yǎng)殖場持續(xù)高效的發(fā)展有至關重要的作用。常見的消毒藥有八種，季銨鹽類和醛類消毒劑是其中重要的兩種，季胺鹽類消毒劑作用原理是通過表面活性，使菌體細胞膜的通透性發(fā)生改變甚至破裂；醛類消毒劑是一類強的蛋白質變性劑，是細菌、病毒蛋白質變性從而達到殺滅細菌的作用；季銨鹽和醛類消毒劑的絡合物，集中季銨鹽類和醛類消毒劑的優(yōu)點，起到更強效的抑菌作用[12-14]。

通過對圈舍空氣進行消毒，得出三種消毒藥對空氣菌群消殺率都在80%以上，季銨鹽和醛類消毒劑的絡合物消毒效果最佳。連續(xù)消毒九天，地面原始菌群數(shù)量可降低50%以上，季銨鹽和醛類消毒劑的絡合物消毒的圈舍地面菌群數(shù)相對最低。通過消毒一天采樣，觀察并統(tǒng)計細菌增殖率，在消毒后第三天細菌恢復率達到60%以上，第四天達到80%，建議在北方秋季四天為一個消毒周期。

在實際應用中，選擇消毒藥在考慮經濟成本的同時，選擇消殺效果好的消毒藥，但還應綜合消毒劑作用時間，消毒劑的作用原理、微生物的耐藥性和殺菌譜等多方面因素進行選擇，建議消毒藥的種類間隔使用。有調查表明，機械清掃，通過通風保持圈舍干燥也可以有效抑制病原微生物的生長。

[1] 馮茂任,鐘衛(wèi)兵,朱品清,等. 畜禽養(yǎng)殖場消毒存在的誤區(qū)及對策[J]. 廣西農學報,2009,24(05):76-77.

[2] 邱梅,郝智慧,龐云露,等. 國內外獸用消毒劑的研究現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢[J]. 中國獸藥雜志,2011,57(06):43-47,60.

[3] 劉子鑫. 消毒及消毒劑簡介[J]. 中國獸醫(yī)雜志,2004,51(07):37-38.

[4] 李建鋒,羅沛宏,賀曉龍,等. 三種消毒劑對育肥牛場圈舍消毒效果評價[J]. 青海大學學報(自然科學版),2013,26(01):24-26,53.

[5] 張文福. 更安全更友好的消毒劑[J]. 中國消毒學雜志,2013,29(05):397-401

[6] 卜三平. 畜禽養(yǎng)殖使用藥物消毒的關鍵技術和誤區(qū)[J]. 甘肅畜牧獸醫(yī),2009,17(01):38-41.

[7] 李建鋒,羅沛宏,賀曉龍,等. 三種消毒劑對育肥牛場圈舍消毒效果評價[J]. 青海大學學報(自然科學版),2013,26(01):24-26,53.

[8] 羅冠群,白哲永,宋永臣,等. 6種消毒劑消毒效果的比較[J]. 養(yǎng)殖與飼料,2012,12:15-16.

[9] 黎威. 夏秋畜禽圈舍消毒方法[J]. 內江科技,2000,21(03):48.

[10] 王繼. 四種消毒劑對六種病原微生物的殺滅實驗[D].四川農業(yè)大學,2012.

[11] 任哲,饒林,蔣莉,張文福. 兩種季銨鹽消毒劑殺菌效果比較研究[J]. 中國消毒學雜志,2011,28(01):7-9.

[12] 李長青. 一種復合季銨鹽消毒劑性能的試驗觀察[J]. 中國消毒學雜志,2005,22(03):292-294.

[13] 佟穎,安偉,鄧小虹. 醛類消毒劑及其發(fā)展[J]. 中國消毒學雜志,2011,28(05):611-612.

[14] 陳小強,王晶鈺,張中航,聞志丹. 規(guī)?；u場消毒劑的篩選與消毒效果評價[J]. 動物醫(yī)學進展,2011,32(11):85-89.

Comparative study on disinfectant efficacy of the three disinfectants in cattle sheds

Yu Ya-ling1,Huo Yan-ming1,Chen Guo-liang1,Zhang Dong-yan1,Li Xiao-li1,Xue Xiao-shuang3,Zhao Wu-xiang2,Qiu Dian-rui2
(1.ChengdeCity,HebeiProvinceCenterforDiseaseControlandPreventionHebei,Chengde067000;2.InstituteofAnimalHusbandry,Chengde, 067000;3.HebeiTourismVocationalCollege,Chengde, 067000)

[Objective] To study the disinfectant efficacy of aldehyde disinfectant,quaternary ammonium disinfectant and the complexes of aldehyde and quaternary ammonium disinfectant to the barn air, ground bacterial,explore the best sterilization cycle when the temperature is 11-24 ℃.[Methods]After disinfecting the barn by the three disinfectant , collect the air samples at different heights and the groud samples eight days in a row. [Results] The results showed that the disinfection effect were well to the barn air and ground,and the complexes of aldehyde and quaternary ammonium disinfectant was best, and the higher than 80%,aldehyde disinfectant was good and quaternary ammonium disinfectant was worst.[Conclusion] The best sterilization cycle was four days.

aldehyde disinfectant , mmonium disinfectant, complexes of aldehyde and quaternary ammonium disinfectant,sterilization cycle

2014-12-26 修改日期:2015-01-18

河北省現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系奶牛產業(yè)創(chuàng)新團隊建設專項資金；承德市科技支撐計劃項目(201422074)

于亞玲(1985-)，女，河北承德人，碩士，就職于河北省承德市動物疫病預防控制中心，主要從事疫病監(jiān)測和重大動物疫病病原學和血清學檢測工作。

S8-1

A

1001-9111(2015)02-0056-04