麝香酮的含量測(cè)定方法研究進(jìn)展

駱瑞林

（太極集團(tuán)重慶涪陵制藥廠有限公司，重慶 408000）

麝香酮是中藥麝香的有效成分，具有降壓、抗缺氧、抗缺血、抗炎等藥理作用，臨床用于高血壓、急性腦缺血損傷及中風(fēng)病急性期的治療。為了便于更深入地系統(tǒng)研究，現(xiàn)對(duì)麝香酮含量測(cè)定方法的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 氣相色譜（GC）法

采用GC法測(cè)定麝香酮的含量，具有準(zhǔn)確、靈敏度高、重復(fù)性好、專屬性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。

李佳等［1］利用GC法測(cè)定安宮牛黃丸中麝香酮的含量，以HP-5 柱（Agilent Technologies，30 m ×320 μm，0.25 μm）為色譜柱，載氣為氮?dú)?，流速?7 mL／min，空氣流速為 320 mL／min，氫氣流速為70 mL／min，氮?dú)鉃槲泊禋?，流速?0 mL／min，分流進(jìn)樣，結(jié)果安宮牛黃丸中麝香酮的含量為 0.09 mg ／g。周銳等［2］采用GC法對(duì)麝香祛痛搽劑方中人工麝香的有效成分麝香酮進(jìn)行定性測(cè)定，結(jié)果供試品中各組分出峰時(shí)間較合適，分離效果較好，且各組分對(duì)應(yīng)的峰面積和理論板數(shù)均較高，更能保證檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性、準(zhǔn)確性、重復(fù)性，且陰性無(wú)干擾，專屬性強(qiáng)。焦連慶等［3］以麝香酮質(zhì)譜質(zhì)核比 m／z 238，223，209為檢測(cè)指標(biāo)，以麝香酮特征離子峰 m／z 238的豐度為定量指標(biāo)測(cè)定涼開膠囊中麝香酮的含量，專屬性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確。魏寧漪等［4］以用固相微萃取-氣相色譜法（SPME-GC）對(duì)醒腦靜注射劑中的麝香酮含量進(jìn)行測(cè)定，該方法集樣品采集、萃取、濃縮、進(jìn)樣和分析于一體，完成測(cè)定的整個(gè)過(guò)程僅需十幾分鐘，操作簡(jiǎn)單，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。宋鳳蘭等［5］采用Agilent DB-WAX 毛細(xì)管色譜柱（30.0 m ×0.449 mm，0.85 μm），F(xiàn)ID檢測(cè)器，程序升溫（140℃維持8 min，以30℃ ／min升溫至200℃維持10 min），進(jìn)樣口溫度為250℃，檢測(cè)器溫度為280℃，外標(biāo)法測(cè)定，結(jié)果麝香酮質(zhì)量濃度在12～96 μg／mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好（r＝0.999 8），回收率為 99.4%，RSD 為 1.8%（n ＝9）。蘇曉田等［6］采用氣相色譜法 - 氫火焰離子化檢測(cè)器（GC／FID）快速測(cè)定麝香中麝香酮含量，結(jié)果表明，乙醇超聲波提取-GC／FID測(cè)定麝香中的麝香酮含量是一種簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確的方法。張芳等［7］采用 Agilent CYCLODEX-B手性氣相毛細(xì)管柱、FID檢測(cè)器、程序升溫法，對(duì)麝香酮消旋體進(jìn)行拆分，并測(cè)定天然麝香和人工合成麝香中麝香酮的含量，結(jié)果麝香酮消旋體的質(zhì)量濃度在0.05～5.00 mg／mL范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好線性關(guān)系［（S）-和（R）-麝香酮的r分別為 0.998 6 和 0.999 3］；平均回收率分別為 97.1%和 99.2%，RSD分別為 1.83%和1.76% （n ＝15），檢測(cè)限為 2.5 ng／mL，定量限為 6.0 ng ／mL，表明該方法可將（S）-和（R）-麝香酮進(jìn)行有效拆分，并能有效控制麝香的質(zhì)量。

2 氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用法

GC-MS法測(cè)定麝香酮含量，具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確可靠等優(yōu)點(diǎn)。

陳琴華等［8］使用GC-MS聯(lián)用儀，采用選擇監(jiān)測(cè)離子法測(cè)定麝香中麝香酮含量，結(jié)果麝香酮質(zhì)量濃度在0.05～5.00 g／L范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好（r＝0.998 2），平均回收率為96.7% ，檢測(cè)限 0.1 ng ／mL。陳琴華等［9］使用 GC-MS 聯(lián)用儀，采用選擇監(jiān)測(cè)離子法測(cè)定醒腦靜注射液中麝香酮的含量，也取得了較好效果。蘇國(guó)義等［10］采用GC-MS聯(lián)用法分析了不同來(lái)源的林麝麝香的麝香酮及甾體成分，可高效、準(zhǔn)確地對(duì)麝香進(jìn)行質(zhì)量分析。張守堯等［11］采用固相萃取法處理樣品，用GC-MS法分離測(cè)定麝香酮的含量，結(jié)果麝香酮的回收率為97.6% ～105.4%，RSD＝3.86%。楊曉靜等［12］用GC-MS法測(cè)定涼開膠囊中麝香酮制劑中麝香酮的含量，色譜柱為HP-5MS石英毛細(xì)管，柱溫為70～200℃，檢測(cè)器溫度為250℃，進(jìn)樣口溫度為220℃，載氣（高純氦氣）流速為40 mL／min；結(jié)果麝香酮質(zhì)量濃度在25～125 μg／mL 范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，r＝0.999 3，平均回收率為 97.24% ，RSD ＝ 1.9% （n ＝ 5）。陳長(zhǎng)功等［13］以正己烷為溶劑，采用GC-MS聯(lián)用法中選擇性離子檢測(cè)（SIM）方式對(duì)麝香保心丸中的麝香酮進(jìn)行含量測(cè)定，色譜柱為DB-5（30 m×0.25 mm，0.1 μm）石英毛細(xì)管柱，80～260℃程序升溫，選擇 m ／z 238為麝香酮的檢測(cè)離子；結(jié)果麝香酮的質(zhì)量濃度線性范圍為0.029～28.8 μg ／mL（r＝ 0.999 1），平均回收率為 96.854% 。鄒亮等［14］采用GC-MS／MS測(cè)定大鼠腸循環(huán)液中的麝香酮含量，結(jié)果麝香酮在整個(gè)腸道內(nèi)均有較好吸收，十二指腸Ka及T1／2優(yōu)于空腸（P＜0.05），十二指腸 Ka，T1／2，A 顯 著優(yōu)于回腸（P＜ 0.01，0.01，0.05），空腸與回腸無(wú)顯著差異。李碩等［15］用 GC-MS 聯(lián)用法分析不同年限麝香中麝香酮含量的高低，探索不同年齡段的麝所產(chǎn)麝香中麝香酮的含量隨麝年齡增長(zhǎng)的變化規(guī)律；結(jié)果麝所產(chǎn)麝香中麝香酮含量 3 年生最高（2.71% ），7 年生最低（0.36% ），表明隨著年齡的增長(zhǎng)，麝所產(chǎn)麝香中麝香酮的含量呈下降趨勢(shì)，1～3年生麝所產(chǎn)麝香質(zhì)量最高。

3 毛細(xì)管氣相色譜法

毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定麝香酮的含量，具有簡(jiǎn)便、靈敏度高、準(zhǔn)確可靠、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。

高群等［16］采用外標(biāo)法，色譜柱為Rtx-50毛細(xì)管柱，F(xiàn)ID檢測(cè)器，高純氮?dú)庾鳛檩d氣，流速為1.30 mL／min；結(jié)果麝香酮質(zhì)量濃度在 56.7 ～567.0 μg／mL 范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，平均回收率為 102.4% ，RSD ＝2.23%。黃福星等［17］采用固相萃取技術(shù)，結(jié)合毛細(xì)管氣相色譜法，對(duì)活心丸中麝香酮進(jìn)行定量測(cè)定，結(jié)果表明，該測(cè)定方法靈敏度高，分離效果好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。吳小英［18］用氣相色譜儀，采用DM-17（50%苯基和50%甲基聚硅氧烷）毛細(xì)管色譜柱（30 m ×0.32 mm，0.25 μm），柱溫為 110 ℃，保持2 min，以 10℃ ／min的速度升溫至 200℃，保持 5 min，以20℃ ／min的速度升溫至250℃，保持5 min，以氮?dú)鉃檩d氣，流速為 2 mL／min，F(xiàn)ID檢測(cè)器；結(jié)果麝香酮質(zhì)量濃度在 8.424～210.600 μg／mL 范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，r＞ 0.999，平均回收率為99.57%。

4 高效液相色譜（HPLC）法

HPLC法具有簡(jiǎn)便、靈敏、快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛用于麝香酮復(fù)方制劑含量的測(cè)定和質(zhì)量控制。

宋英等［19］采用反相 -高效液相色譜法（RP-HPLC），以乙腈-0.1%磷酸（38∶62）為流動(dòng)相，在285 nm波長(zhǎng)處測(cè)定桂皮醛含量；以2，4-二硝基苯肼為衍生試劑，乙腈-0.1%磷酸（90∶10）為流動(dòng)相，在365 nm波長(zhǎng)處測(cè)定麝香酮。結(jié)果桂皮醛平均回收率為98.75%，RSD＝2.22%，表明HPLC法測(cè)定桂皮醛含量可行。盧忠魁等［20］采用HPLC法測(cè)定麝香酮，以Zorbax C18柱為分析柱，以CH3CN∶H2O為流動(dòng)相進(jìn)行麝香酮含量測(cè)定，紫外檢測(cè)器檢測(cè)，結(jié)果 R≈7.1，RSD 為 0.20% ～0.23%。

5 超高效液相色譜與串聯(lián)四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀聯(lián)用技術(shù)（UPLC ／Q-TOFMS）

UPLC／Q-TOFMS法具有穩(wěn)定可靠、專屬性強(qiáng)、靈敏度較高、測(cè)定方便快速等優(yōu)點(diǎn)。冷玉靜等［21］采用UPLC／Q-TOFMS法檢測(cè)麝香酮在灌胃人工麝香大鼠體內(nèi)的血藥濃度，色譜柱為C18柱（100 mm ×2.1 mm，1.7 μm），柱溫為 35 ℃ ，流動(dòng)相為乙腈 -水（均含 0.1%的甲酸 85 ∶15），流速為 0.2 mL ／min，使用 APCI離子源，正離子模式下采集數(shù)據(jù)；結(jié)果麝香酮血漿質(zhì)量濃度在0.0756～3.78μg／mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好（r＝0.9980），最低檢測(cè)限為0.05 μg／mL，高、中、低3種質(zhì)量濃度的準(zhǔn)確度和精密度均符合生物樣品檢測(cè)要求（RE＜10%，RSD＜15%），絕對(duì)平均回收率均大于81%。

6 高效液相色譜-質(zhì)譜（HPLC-MS）法

HPLC-MS法用于測(cè)定麝香酮的含量，具有靈敏、快捷、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。翟永松等［22］采用HPLC-MS法測(cè)定九味防瘟散中麝香酮的含量，結(jié)果麝香酮質(zhì)量濃度在0.2～20 mg／L范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好（r＝0.999 9），方法精密度、回收率、穩(wěn)定性、重復(fù)性均符合試驗(yàn)要求。

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