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      豬食鹽中毒的病理診斷

      2015-01-23 11:55:58戴衛(wèi)明江蘇省常熟市梅李動(dòng)物防疫站215511
      中國(guó)畜禽種業(yè) 2015年7期
      關(guān)鍵詞:載玻片二甲苯病死豬

      戴衛(wèi)明(江蘇省常熟市梅李動(dòng)物防疫站 215511)

      豬食鹽中毒的病理診斷

      戴衛(wèi)明(江蘇省常熟市梅李動(dòng)物防疫站 215511)

      為了探索豬食鹽中毒的發(fā)病原因,對(duì)某養(yǎng)殖戶的病死豬進(jìn)行檢查,結(jié)合臨床癥狀及剖檢病變初步診斷為食鹽中毒。取病死豬的腦組織進(jìn)行病理組織學(xué)檢查,鏡下可見(jiàn)腦血管周圍有多量淋巴細(xì)胞聚集,形成 “袖套”現(xiàn)象。綜合以上結(jié)果,進(jìn)一步診斷該病例是由食鹽中毒引起。

      豬;食鹽中毒;病理學(xué);診斷

      豬食鹽中毒是由于采食含鹽份較多的飼料或飲水,如泔水、腌菜水、飯店食堂的殘羹、洗咸魚(yú)水或醬渣等喂豬,配合飼料時(shí)誤加過(guò)量的食鹽或混合不均勻等而造成。全價(jià)飼養(yǎng),特別是日糧中鈣、鎂等礦物質(zhì)充足時(shí),對(duì)過(guò)量食鹽的敏感性大大降低,反之則敏感性顯著增高。飲水是否充足,對(duì)食鹽中毒的發(fā)生更具有絕對(duì)的影響。食鹽中毒的關(guān)鍵在于限制飲水。為此,本文通過(guò)對(duì)豬食鹽中毒的病理診斷進(jìn)行了研究,為該病的預(yù)防和治療提供科學(xué)依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 動(dòng)物

      江蘇省常熟市梅李鎮(zhèn)某養(yǎng)殖戶的發(fā)病豬。

      1.2 藥品試劑和器材

      1.2.1 藥品試劑

      (1)70%、80%、90%、95%酒精及無(wú)水酒精。95%以下的各級(jí)濃度酒精是用95%酒精加蒸餾水稀釋而成。

      (2)Bouin氏固定液(苦味酸飽和水溶液75ml,福爾馬林25ml,冰醋酸5ml,混合即成)。

      (3)蛋白甘油(蛋白50ml,甘油50ml,水楊酸鈉1g,混合即成)。取一新鮮雞蛋的蛋白,充分?jǐn)嚢璩裳┗钆菽?,然后濾去泡沫,加入等量甘油,攪拌均勻,再加入水楊酸鈉作防腐用。

      (4)埃利希蘇木精染液(蘇木精1g,純酒精50ml,冰醋酸5ml,甘油50ml,鉀礬約5g的飽和量,蒸餾水50ml)。將蘇木精溶于約15ml的純酒精中,再加冰醋酸后攪拌;當(dāng)蘇木精溶解后即將甘油倒入并搖動(dòng)容器,同時(shí)加入其余的酒精;將鉀礬在研缽中研碎并加熱,然后將它溶解于水中,將溫?zé)岬拟浀\溶液一滴一滴地加入上述染液中,并隨時(shí)攪動(dòng);此液混合完畢,將瓶口用一層紗布包著小塊棉花塞起來(lái),放在暗處通風(fēng)的地方,并經(jīng)常搖動(dòng)以促進(jìn)它的成熟。

      (5)0.5%伊紅酒精溶液(0.5g伊紅溶于100ml95%酒精中即成)。

      (6)鹽酸酒精(100ml 70%酒精中加入1ml鹽酸)。

      二甲苯、切片石蠟、中性樹(shù)膠等。

      1.2.2 器材

      解剖器一套、單面刀片、切片刀、切片機(jī)、載玻片、蓋玻片、標(biāo)本瓶、燒杯、量筒、漏斗、染色缸、樹(shù)膠瓶、酒精燈、毛筆、繪圖紙、濾紙、熔蠟箱、展片臺(tái)、小木塊、蠟帶盒、烤片盒、切片托盤、顯微鏡等。

      2 方法

      2.1 病史及流行病學(xué)調(diào)查

      2007年8月,常熟市梅李鎮(zhèn)某養(yǎng)豬戶飼養(yǎng)70日齡的白豬86頭,喂的自配飼料,其配方為玉米60%,麩皮15%,豆粕20%,另加5%的預(yù)混料(其所含食鹽0.35%),在此基礎(chǔ)上又添加了250g的氯化鈉。29號(hào)早上發(fā)現(xiàn)有一圈12頭豬突然全部發(fā)病,幾頭平時(shí)采食較快的豬,臥地不起,其中4頭強(qiáng)壯的豬口吐白沫,流涎,角弓反張,四肢呈游泳狀,呈陣發(fā)性抽搐,于上午陸續(xù)死亡;而其它圈的豬群情況良好,尚未發(fā)病。根據(jù)調(diào)查了解,養(yǎng)豬戶反映發(fā)病的豬圈由于飲水設(shè)施損壞、供水不足,該圈豬群飲水較平常少。

      2.2 病理變化

      剖檢可見(jiàn)病死豬口角有白沫,肺部淤血、水腫,胃粘膜充血、出血,腦膜顯著充血,腦實(shí)質(zhì)充血、水腫。十二指腸充血,出血。其它臟器未見(jiàn)明顯病變。

      2.3 實(shí)驗(yàn)室診斷

      2.3.1 細(xì)菌學(xué)檢查

      2.3.1.1 觸片鏡檢

      無(wú)菌操作剖開(kāi)病死豬腹腔,取出心、肝、脾、肺和腎制成組織觸片,革蘭氏染色鏡檢,未見(jiàn)有致病菌的存在。

      2.3.1.2 細(xì)菌培養(yǎng)

      在潔凈的操作臺(tái)上,無(wú)菌操作取病死豬的肝、脾、腎,分別接種于普通瓊脂、麥康凱和血瓊脂上進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),置于37℃恒溫箱中,培養(yǎng)24~48h后觀察,未見(jiàn)有致病菌的存在。

      2.3.2 病毒學(xué)檢查

      取病死豬的肝、脾、腎、肺、腦組織和淋巴結(jié)進(jìn)行圓環(huán)病毒、偽狂犬病病毒多重PCR檢測(cè),豬繁殖與呼吸綜合征病毒和豬瘟病毒多重RT-PCR檢測(cè),結(jié)果均為陰性。

      2.3.3 病理組織學(xué)檢查

      2.3.3.1 取材和固定

      將病死豬頭部打開(kāi),用銳利的刀片割取腦組織。組織塊的大小以厚度不超過(guò)5mm為宜。然后,將取下的組織塊迅速投入Bouin氏固定液中。固定時(shí)間為數(shù)小時(shí)至24h(需視組織塊的大小而定)。

      2.3.3.2 沖洗

      經(jīng)固定的材料,用酒精沖洗,洗去固定液以便染色。用Bouin氏液固定的材料,直接移入70%酒精中,多換幾次酒精,直至無(wú)黃色時(shí)為止(也可在酒精中加入幾滴氨水或飽和碳酸鋰溶液,以迅速洗去黃色)。而后將浸洗材料保存在70%酒精中過(guò)夜。

      2.3.3.3 脫水

      先從低濃度的酒精開(kāi)始,然后,遞增濃度,直至無(wú)水酒精。具體方法是,將材料經(jīng)70%酒精→80%酒精→95%酒精(Ⅰ)→95%酒精(Ⅱ)→無(wú)水酒精(Ⅰ)→無(wú)水酒精(Ⅱ),各級(jí)酒精1~2h。

      2.3.3.4 透明

      將脫水后的材料經(jīng)1:1無(wú)水酒精與二甲苯→二甲苯(Ⅰ)→二甲苯(Ⅱ),各級(jí)時(shí)間為0.5~2h,務(wù)使組織達(dá)到透明為止。

      2.3.3.5 浸蠟

      先將裝有56~58℃石蠟的三個(gè)蠟杯放在熔蠟箱內(nèi)熔化,并使熔蠟箱的溫度保持恒定(約58℃)。然后將透明了的材料放入蠟杯(Ⅰ)→蠟杯(Ⅱ)→蠟杯(Ⅲ)。浸蠟時(shí)間視材料大小而定,總的浸蠟時(shí)間為2~4h左右。

      2.3.3.6 包埋

      包埋前,視組織塊的大小先將繪圖紙折成一紙盒,作為包埋的容器。將紙盒盛滿已熔化的石蠟,隨即將第三杯中已浸蠟的材料放入其中,切面朝下,位置放正。然后速將紙盒半浸于冷水中,待石蠟表面凝結(jié)后,將紙盒全部浸入水中冷卻。石蠟全部凝固后,拆去紙盒即成蠟塊。

      2.3.3.7 切片

      將修整后的蠟塊粘在小木塊上,小木塊裝在切片機(jī)上,以待切片;在旋轉(zhuǎn)式切片機(jī)上將蠟塊切成4~8um厚的薄片。用毛筆輕輕取下蠟帶,放在蠟帶盒內(nèi)備用。

      2.3.3.8 貼片或烤片

      用小玻棒蘸取一點(diǎn)蛋白甘油滴于一干凈的載玻片上,用手指涂勻,并加幾滴蒸餾水于載玻片上。將蠟帶切成適當(dāng)長(zhǎng)度的蠟片,然后用小鑷子將蠟片輕放在載玻片的水面上,再把載玻片放在展片臺(tái)上(溫度為45℃左右)。蠟片受熱后即慢慢展平。待完全展平后,用解剖針將切片位置撥正,傾去載玻片上的余水后,將其放在烤片盒中,置于50℃左右恒溫箱內(nèi)烤干。

      2.3.3.9 HE染色

      (1)脫蠟:將烤干的切片放入二甲苯(Ⅰ)→二甲苯(Ⅱ)中,各為5min,以溶去切片上的石蠟。

      (2)復(fù)水:是將脫蠟后的切片經(jīng)各級(jí)濃度酒精逐漸下降到水的過(guò)程,即將二甲苯(Ⅱ)中取出的切片移入無(wú)水酒精→95%酒精→80%酒精→70%酒精→蒸餾水,各級(jí)中停留1~5min。

      (3)染色:①將蒸餾水洗滌后的切片移入蘇木精液中5~10min,使細(xì)胞核著色。②用自來(lái)水洗去切片上殘余的染液。③用1%鹽酸酒精分色數(shù)分鐘。分色時(shí)隨時(shí)用顯微鏡檢查切片,使分色適度。④入1%氨水或自來(lái)水浸洗,使之藍(lán)化。⑤在蒸餾水中浸片刻。⑥切片入70%→80%→90%各12min。⑦入0.5%伊紅酒精溶液中染色2~5min,使細(xì)胞質(zhì)著色。

      2.3.3.10 脫水

      切片依次入95%酒精(Ⅰ)→95%酒精(Ⅱ)→無(wú)水酒精(Ⅰ)→無(wú)水酒精(Ⅱ),各級(jí)中停留1~5min。

      2.3.3.11 透明

      切片入1:1無(wú)水酒精、二甲苯→二甲苯(Ⅰ)→二甲苯(Ⅱ),各級(jí)停留1~5min。

      2.3.3.12 封藏

      將切片從二甲苯(Ⅱ)中取出,用紙或布擦去材料周圍的二甲苯。在材料中央滴一小滴樹(shù)膠,然后用鑷子加蓋蓋玻片。切片封好后,放在切片托盤上待干燥,即可鏡檢。

      2.3.3.13 顯微病變觀察

      病理組織學(xué)檢查,鏡下可見(jiàn)腦血管周圍有多量淋巴細(xì)胞聚集,形成 “袖套”現(xiàn)象。

      3 小結(jié)與討論

      (1)根據(jù)病史及流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、剖檢病變、細(xì)菌分離培養(yǎng)、病毒學(xué)檢查以及病理組織學(xué)檢查等實(shí)驗(yàn)室檢查,診斷本病為豬食鹽中毒所致。本病例中豬群具有過(guò)量食用食鹽的病史,臨床上具有流涎、口吐白沫、角弓反張、呈陣發(fā)性抽搐。剖檢可見(jiàn)肺部淤血、水腫,胃粘膜充血、出血,腦膜顯著充血,腦實(shí)質(zhì)充血、水腫。十二指腸充血,出血。其它臟器未見(jiàn)明顯病變。病理組織學(xué)檢查結(jié)果表明,腦血管周圍有多量淋巴細(xì)胞聚集,形成 “袖套”現(xiàn)象。符合食鹽中毒。而且通過(guò)細(xì)菌學(xué)和病毒學(xué)檢查的結(jié)果排除患其它細(xì)菌性疾病和病毒性疾病感染的可能。

      (2)在診斷本病時(shí),臨床上應(yīng)與鏈球菌病、豬水腫病、豬偽狂犬病等有相似神經(jīng)癥狀的疾病加以區(qū)別。腦膜腦炎型豬鏈球菌病,除有神經(jīng)癥狀外,常伴有敗血癥及多發(fā)性關(guān)節(jié)炎癥狀。體表(如腹下,四肢下端、耳尖)出現(xiàn)紫紅色或出血性紅斑,嗜中性白細(xì)胞數(shù)增加;豬水腫病,急性者病初精神沉郁,食欲廢絕,眼瞼、頭、頸部甚至全身水腫,后期出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,盲目行走或轉(zhuǎn)圈,痙攣或驚厥,觸之驚叫、倒地,四肢似游泳狀,24h內(nèi)死亡。剖檢在胃壁及結(jié)腸袢腸系膜上出現(xiàn)水腫。從腸系膜淋巴結(jié)及小腸內(nèi)容物中容易分離到致病性大腸菌;偽狂犬病新生仔豬表現(xiàn)神經(jīng)癥狀,還可侵害消化系統(tǒng)。成年豬則常為隱性感染或癥狀輕微,表現(xiàn)一過(guò)性發(fā)熱,咳嗽,便秘,有的可嘔吐,多在3~4d恢復(fù)。體溫繼續(xù)升高則出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。懷孕母豬出現(xiàn)胎兒吸收,木乃伊化死胎,流產(chǎn)。檢肝和脾有1~2mm的白色壞死灶。豬食鹽中毒臨床上則表現(xiàn)流涎、口吐白沫、呈陣發(fā)性抽搐、對(duì)外界環(huán)境反應(yīng)不敏感,而且體溫正常,并且有過(guò)量攝入食鹽的病史。

      (3)在飼養(yǎng)中常添加一定比例的食鹽,可增強(qiáng)代謝,促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育。但是,如果添加過(guò)量或方法不當(dāng),就易造成食鹽中毒。關(guān)于各種食鹽中毒量,有文獻(xiàn)中記載豬中毒量為2.2g/kg,食鹽含量在0.35~5%即能滿足豬的需要量,本病例中該用戶在喂給豬食鹽正常量的同時(shí)又在飼料中多補(bǔ)給了250g/100kg,因豬對(duì)食鹽較敏感,易發(fā)生中毒。同時(shí)飲水不足對(duì)食鹽中毒的發(fā)生具有決定性影響。實(shí)驗(yàn)表明豬飼料中含食鹽0.25%時(shí),若限制飲水或飲水不足可導(dǎo)致中毒。該圈發(fā)病或死亡的豬,由于飲水設(shè)施損壞、供水不足,而其它圈豬群飲水充足,則沒(méi)有發(fā)生中毒現(xiàn)象。

      (4)由于本病多呈急性或亞急性經(jīng)過(guò),因此診治本病應(yīng)掌握 “早與快”的原則,并根據(jù)臨床癥狀情況,靈活掌握對(duì)癥療法,常采用10%葡萄糖溶液250~500mL;10%溴化鈣靜脈注射;癥狀嚴(yán)重的可靜注25%山梨醇液或甘露醇,以緩解腦水腫,降低顱內(nèi)壓;另外用利尿劑(如氫氯噻嗪),以促進(jìn)氯化鈉的排出,對(duì)于食鹽中毒的病豬如能及早發(fā)現(xiàn),及時(shí)治療,常能提高治愈率,獲得滿意的療效。

      (5)本病應(yīng)以預(yù)防為主,給豬飼料添加食鹽要掌握適量,通常配合料中的食鹽含量0.3~0.5%,且要拌和均勻;如利用含鹽的殘?jiān)8关i時(shí),要適當(dāng)限制喂量,并同其他飼料搭配飼喂;給豬保持供給充足的飲水等,可有效的預(yù)防本病。

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