■謝少林 陳平原 呂子君 王 超,3 向文洲 鄒記興
(1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,廣東廣州 510642;2.三亞海洋生物科技有限公司,海南三亞 572029;3.清遠(yuǎn)市興漁水產(chǎn)科技有限公司,廣東清遠(yuǎn) 511510;4.中國(guó)科學(xué)院南海海洋研究所,廣東廣州 510301)
螺旋藻是藍(lán)藻門(Cyanophta)、顫藻目(Oscilata?rides)、顫藻科(Oscillatoridae)的一個(gè)屬,其分布廣泛,存在于世界各個(gè)海域及陸地淡水、咸水中,是營(yíng)自養(yǎng)型的原核水生植物,具有很高的營(yíng)養(yǎng)、保健和醫(yī)藥價(jià)值[1]。螺旋藻除含有大量的蛋白質(zhì)外,其維生素和不飽和脂肪酸的含量也很高,還含有較多的生物活性成分以及全面易吸收的礦物質(zhì);螺旋藻因其全面且
豐富的營(yíng)養(yǎng),被聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織譽(yù)為“21世紀(jì)最佳的理想食品”,也被世界衛(wèi)生組織評(píng)為“人類21世紀(jì)的最佳保健品”[2-3]。隨著對(duì)螺旋藻研究的逐漸深入,以及工廠規(guī)?;a(chǎn)的實(shí)現(xiàn),當(dāng)前螺旋藻的生產(chǎn)不僅能夠滿足人類作為醫(yī)藥、保健食品的需要,而且逐漸擴(kuò)展到作為添加劑在動(dòng)物飼料中的應(yīng)用[4]。本試驗(yàn)以添加1%螺旋藻的羅非魚飼料飼養(yǎng)彭澤鯽,通過與對(duì)照組對(duì)比,對(duì)其生長(zhǎng)和肌肉營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)變化進(jìn)行全面細(xì)致的分析,進(jìn)而對(duì)螺旋藻的添加使用效果進(jìn)行客觀綜合的評(píng)價(jià),對(duì)螺旋藻在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用具有一定的指導(dǎo)意義。
1.1.1 試驗(yàn)飼料
對(duì)照組羅非魚飼料由清遠(yuǎn)市金正飼料有限公司生產(chǎn),試驗(yàn)組飼料是在原羅非魚飼料配方中添加1%的螺旋藻,然后制成顆粒飼料;螺旋藻由三亞海王集團(tuán)提供。具體試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)水平見表1。
表1 試驗(yàn)組和對(duì)照組所用日糧營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)比(%)
1.1.2 試驗(yàn)用魚
由國(guó)家大宗淡水魚類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系廣州綜合試驗(yàn)站清遠(yuǎn)石板基地提供的1齡左右彭澤鯽魚種。
1.2.1 試驗(yàn)方法
試驗(yàn)在國(guó)家大宗淡水魚類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系廣州綜合試驗(yàn)站清遠(yuǎn)石板基地8號(hào)塘進(jìn)行。挑選個(gè)體大小均勻、體質(zhì)健壯的彭澤鯽魚種180尾,隨機(jī)放入6個(gè)大小為2 m×2 m×1.5 m的網(wǎng)箱中,每個(gè)網(wǎng)箱放入彭澤鯽30尾,稱取記錄每個(gè)網(wǎng)箱魚的初始重量。調(diào)節(jié)網(wǎng)箱深度使網(wǎng)箱水位控制在1 m左右,將6個(gè)網(wǎng)箱分成2組(對(duì)照組和試驗(yàn)組),每組3個(gè)重復(fù)。本試驗(yàn)所用飼料為羅非魚沉性飼料,故在網(wǎng)箱中用密網(wǎng)設(shè)置食臺(tái),對(duì)照組投喂未添加螺旋藻的羅非魚料,試驗(yàn)組投喂添加1%螺旋藻的羅非魚飼料。每天上午10:00和16:00各投喂一次,投喂量為魚體質(zhì)量的3%~5%,根據(jù)天氣和魚的吃食情況適當(dāng)調(diào)整。準(zhǔn)確稱量每天投喂的飼料質(zhì)量,定時(shí)清洗食臺(tái),做好網(wǎng)箱的日常檢查維護(hù)。試驗(yàn)時(shí)間為2013年8月10日到2013年11月10日,馴食時(shí)間為一周。
1.2.2 肌肉營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)分析
1.2.2.1 樣品制備
試驗(yàn)結(jié)束稱取每個(gè)網(wǎng)箱魚總重量,從中隨機(jī)選取6條,取魚體頭部至尾柄兩側(cè)背部肌肉,取其中一部分于(105±2)℃烘干,粉碎后密封冷凍保存,用于常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定;另一部分進(jìn)行冷凍干燥,粉碎后用于脂肪酸和氨基酸的測(cè)定。
1.2.2.2 常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定
水分采用烘箱(105±2)℃恒溫干燥失重法測(cè)定(GB/T6435—2006)[5];粗灰分采用馬弗爐(550±20)℃高溫灼燒法測(cè)定(GB/T 6438—2007)[6];粗脂肪采用脂肪測(cè)定儀,按照索氏提取的方法測(cè)定(GB/T 6433—2006)[7];粗蛋白采用FOSS全自動(dòng)凱氏定氮儀進(jìn)行測(cè)定(GB/T 6432—94)[8]。
1.2.2.3 蛋白質(zhì)氨基酸分析
取上述冷凍干燥并粉碎的魚肌肉樣品30.0 mg(精確到0.1 mg),通過酸水解處理后,采用日立L-8800氨基酸分析儀進(jìn)行分析。
1.2.2.4 營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)
分別計(jì)算出對(duì)照組和試驗(yàn)組肌肉干樣氨基酸評(píng)分(AAS)、化學(xué)評(píng)分(CS)和必需氨基酸指數(shù)(EAAI)[9-10]:
AAS=所測(cè)樣品蛋白質(zhì)氨基酸含量(%)/(FAO/WHO)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)模式中相同氨基酸含量(%);
CS=所測(cè)樣品蛋白質(zhì)氨基酸含量(%)/雞蛋蛋白質(zhì)中相同氨基酸含量(%);
EAAI=[(a/A)×100×(b/B)×100×……×(g/G)×100](1/N)。
式中:a、b…g——表示待測(cè)樣品中蛋白質(zhì)氨基酸含量;
A、B…G——與待測(cè)樣品對(duì)應(yīng)全雞蛋蛋白質(zhì)氨基酸含量;
N——氨基酸的種類數(shù)。
1.2.2.5 脂肪酸分析
按照J(rèn)Y/T021—1996分析型氣相色譜方法通則和GB/T6041—2002質(zhì)譜分析方法通則,使用TRACE GC-2000 GC-MSTM氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,進(jìn)行魚肌肉中脂肪酸組成分析。稱取冷凍干燥粉碎試樣60 mg(精確至0.1 mg),首先進(jìn)行甲酯化處理,然后取上清液0.5 μl上機(jī)分析,通過脂肪酸甲酯峰面積歸一化法計(jì)算脂肪酸的組成[11]。
1.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理
采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行T-test檢驗(yàn)對(duì)試驗(yàn)組和對(duì)照組數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示(置信區(qū)間為0.05)。
表2 螺旋藻添加劑對(duì)彭澤鯽生長(zhǎng)性能的影響
由表2可以看出,試驗(yàn)組彭澤鯽增重率要大于對(duì)照組,餌料系數(shù)要較對(duì)照組低并且差異都顯著(P<0.05)。
表3 螺旋藻添加劑對(duì)彭澤鯽肌肉營(yíng)養(yǎng)成分含量的影響(%)
由表3可以看出,試驗(yàn)組的粗蛋白含量[(18.21±0.98)%]和粗脂肪含量[(2.38±0.01)%]均比對(duì)照組高,差異均達(dá)到顯著水平(P<0.05)。
2.3.1 氨基酸組成分析(見表4)
表4 彭澤鯽試驗(yàn)組和對(duì)照組肌肉氨基酸組成比較(%,干樣)
由表4可以看出,試驗(yàn)組氨基酸總量71.61%大于對(duì)照組;氨基酸組分中含量最高的都是谷氨酸,分別為12.10%和11.64%,其次是天門冬氨酸、賴氨酸、亮氨酸、丙氨酸,含量最低的都是胱氨酸。試驗(yàn)組中天門冬氨酸、谷氨酸、賴氨酸、亮氨酸和精氨酸的含量比對(duì)照組高且有顯著差異(P<0.05),其中天門冬氨酸和谷氨酸為鮮味氨基酸;由表4可以發(fā)現(xiàn),試驗(yàn)組和對(duì)照組雖然在各個(gè)氨基酸含量上存在差異,但各個(gè)組分所占比例大小順序保持一致;試驗(yàn)組鮮味氨基酸和必需氨基酸總量大于對(duì)照組,其中必需氨基酸和鮮味氨基酸含量差異達(dá)到顯著水平;必需氨基酸占總氨基酸的比例差異不明顯。
2.3.2 肌肉營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的評(píng)價(jià)
依據(jù)氨基酸評(píng)分(AAS)、化學(xué)評(píng)分(CS)以及必需氨基酸指數(shù)(EAAI)的公式,計(jì)算對(duì)照組和試驗(yàn)組必需氨基酸的AAS、CS、EAAI,結(jié)果見表5。根據(jù)氨基酸評(píng)分可以看出,對(duì)照組的第一限制性氨基酸是異亮氨酸和纈氨酸,試驗(yàn)組的第一限制性氨基酸為纈氨酸;試驗(yàn)組的氨基酸評(píng)分、化學(xué)評(píng)分和必需氨基酸指數(shù)均要大于對(duì)照組。
表5 彭澤鯽對(duì)照組和試驗(yàn)組的AAS、CS、EAAI比較
表6 試驗(yàn)組與對(duì)照組彭澤鯽肌肉脂肪酸比較(%)
由表6可以看出,對(duì)照組和試驗(yàn)組肌肉組織中均含有16種脂肪酸,其中飽和脂肪酸4種,單不飽和脂肪酸3種,多不飽和脂肪酸9種。對(duì)照組和試驗(yàn)組除棕櫚酸和亞麻酸差異顯著外,其它各脂肪酸含量差異不顯著。對(duì)照組和試驗(yàn)組飽和脂肪酸與不飽和脂肪酸的比值無明顯差異。
螺旋藻營(yíng)養(yǎng)成分的主要特點(diǎn)是蛋白質(zhì)含量高,而脂肪和纖維素含量較低,其氨基酸種類齊全,特別是必需氨基酸含量較多,其中賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的含量尤為突出[3];螺旋藻營(yíng)養(yǎng)豐富,含有豐富的胡蘿卜素和維生素E,并含有多種微量元素,特別是含有微量的硒[2];而且易被動(dòng)物消化吸收,具有促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)增強(qiáng)動(dòng)物體質(zhì)的功效。添加螺旋藻的試驗(yàn)組,其生長(zhǎng)速度要明顯高于對(duì)照組,對(duì)其肌肉進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分分析可以發(fā)現(xiàn),其粗蛋白含量要明顯高于對(duì)照組,部分氨基酸含量也明顯高于對(duì)照組,鮮味氨基酸就包括其中,而鮮味氨基酸是決定魚肉質(zhì)風(fēng)味的主要因素,可見添加螺旋藻對(duì)提高彭澤鯽肉質(zhì)品質(zhì)有一定的作用。另外,從氨基酸評(píng)分也可以看出,添加螺旋藻的試驗(yàn)組,其各項(xiàng)評(píng)分均大于對(duì)照組[9-12]。魚類的脂肪酸多為不飽和脂肪酸,不飽和脂肪酸具有調(diào)節(jié)血脂、清理血栓、免疫調(diào)節(jié)等功能,其含量高低也是評(píng)價(jià)食物好壞的一個(gè)重要指標(biāo)[13-15];螺旋藻含有豐富的亞麻酸、亞油酸和棕櫚酸[3],添加螺旋藻的試驗(yàn)組同對(duì)照組相比,顯著提高了棕櫚酸和亞麻酸的含量。這與劉立鶴等在凡納濱對(duì)蝦上的研究結(jié)果一致。因此,綜合常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分、氨基酸組成和脂肪酸分析,在飼料中添加螺旋藻有提高彭澤鯽肉質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的作用。