基于自由基學(xué)說(shuō)研究決明子水煎液對(duì)小鼠靜止代謝率和抗氧化活性的影響

吳宿慧， 劉亞敏， 李寒冰， 李根林

（河南中醫(yī)學(xué)院，河南鄭州450046）

基于自由基學(xué)說(shuō)研究決明子水煎液對(duì)小鼠靜止代謝率和抗氧化活性的影響

吳宿慧， 劉亞敏， 李寒冰， 李根林*

（河南中醫(yī)學(xué)院，河南鄭州450046）

目的在自由基學(xué)說(shuō)的指導(dǎo)下，研究決明子水煎液對(duì)小鼠靜止代謝率和抗氧化活性的影響，為決明子輕身延年的作用機(jī)制提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法制備決明子水煎液質(zhì)量濃度為1 g（生藥質(zhì)量）/mL，50只SPF級(jí)ICR小鼠隨機(jī)分為5組，即空白對(duì)照組，決明子高 （20 mg/kg）、中 （10 mg/kg）、低 （5 mg/kg）劑量組，維生素E（VE）組（陽(yáng)性對(duì)照，5 mg/kg），每組10只，自由飲水和取食。每天上午9點(diǎn)測(cè)體質(zhì)量、灌胃給藥，連續(xù)給藥28 d，每天1次，給藥體積為20mL/kg。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前一天測(cè)定動(dòng)物靜止代謝率 （RMR），當(dāng)晚20點(diǎn)禁食，第2天早上處死動(dòng)物，取血清，ELISA方法測(cè)定SOD、GSH-Px和MDA及胰脂肪酶、脂聯(lián)素等指標(biāo)。結(jié)果與空白對(duì)照組相比，隨著決明子劑量增大，小鼠體質(zhì)量、胃腸濕重和胃腸指數(shù)與靜止代謝率等整體指標(biāo)均有顯著性降低，并與劑量呈現(xiàn)明顯量效關(guān)系，不同給藥組的GSH-Px濃度、SOD酶活力均無(wú)顯著變化，P＞0.05，而MDA在決明子高劑量組和中劑量組有顯著降低，P＜0.05。決明子高劑量組和中劑量組的胰脂肪酶活力有顯著降低，P＜0.05。各給藥組脂聯(lián)素水平無(wú)顯著性差異。相關(guān)分析結(jié)果表明：血清中GSH-Px水平與靜止代謝率 （RMR）之間無(wú)顯著性相關(guān)關(guān)系 （R=-0.217，P＞0.05）；SOD活力與RMR之間有極顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系（R=-0.580，P＜0.001）；MDA濃度與RMR之間有極顯著的正相關(guān)關(guān)系 （R=0.421，P＜0.05）。結(jié)論該結(jié)果符合預(yù)測(cè)，支持假說(shuō)，也表明了自由基學(xué)說(shuō)在小鼠靜止代謝率和衰老研究中的橋梁作用。該實(shí)驗(yàn)為探究決明子抗衰老的藥理作用機(jī)制提供了理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)，亦為指導(dǎo)其臨床合理應(yīng)用提供了強(qiáng)有力的證據(jù)。

決明子；小鼠；抗衰老；靜止代謝率；抗氧化作用

衰老是多因素導(dǎo)致的身體機(jī)能的下降，同時(shí)伴隨著生化和生理功能的減弱，因此對(duì)外界環(huán)境、壓力、挑戰(zhàn)等反應(yīng)會(huì)有所降低，更易患上年齡相關(guān)的疾病而死亡［1］。在對(duì)衰老現(xiàn)象的探索中，衰老形成的原因與能量支出之間聯(lián)系已經(jīng)有近2個(gè)世紀(jì)的研究歷史了［2］，若個(gè)體能量支出增加，則可能導(dǎo)致壽命減少。Pearl把這種現(xiàn)象成為“rate-of-living”，認(rèn)為生物體的壽命是固定的，如果動(dòng)物浪費(fèi)過(guò)多精力，壽命則減少；如果節(jié)約降低生活成本，則壽命延長(zhǎng)［3］。自由基學(xué)說(shuō)把衰老研究和代謝聯(lián)系起來(lái)，并認(rèn)為呼吸代謝氧化磷酸化過(guò)程中產(chǎn)生過(guò)多的自由基對(duì)生物體大分子物質(zhì)的氧化損傷會(huì)加速衰老的進(jìn)程［4］。在對(duì)體內(nèi)自由基的清除作用進(jìn)行研究時(shí)，超氧化物歧化酶 （SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）及丙二醛（MDA）是一貫的焦點(diǎn)。且在衰老過(guò)程中，如何降低高血脂，預(yù)防肥胖、糖尿病等疾病的發(fā)生也受到了廣泛的關(guān)注。

決明子Cassiae Semen為豆科植物決明Cassia obtusifolia L.或小決明Cassia tora L.的干燥成熟種子，是國(guó)家衛(wèi)生部公布的69種藥食同源品種之一，性味甘、苦、咸、微寒。歸肝、大腸經(jīng)。本草記載具有 “輕身”作用，現(xiàn)代藥理研究具有清熱明目，潤(rùn)腸通便之功效，常作各種保健用途［5］。古人有詩(shī)云：愚翁八十目不膜，日書蠅頭夜點(diǎn)星，并非生得好眼力，只緣常年服決明。中醫(yī)養(yǎng)生理論認(rèn)為可以從食補(bǔ)、藥補(bǔ)以及采取自我調(diào)攝等為主的綜合措施以達(dá)到延緩衰老、延年益壽的目的。課題組在前期研究中，基于自由基學(xué)說(shuō)，通過(guò)直接觀察決明子水煎液對(duì)家蠶壽命的影響及機(jī)制探討發(fā)現(xiàn)：決明子水煎液能延長(zhǎng)家蠶壽命，降低氧耗，并且體內(nèi)SOD等抗氧化物質(zhì)活性有所增強(qiáng)，同時(shí)發(fā)現(xiàn)決明子潤(rùn)腸通便之功效影響到機(jī)體對(duì)能量的攝取與支出，這可能是決明子發(fā)揮作用的主要途徑之一。為了進(jìn)一步研究決明子抗衰老作用及其機(jī)制，課題組又開(kāi)展了一系列以小鼠為研究對(duì)象的實(shí)驗(yàn)，測(cè)定了以靜止代謝率 （RMR）為代表的能量支出，以SOD、GSH-Px和MDA為代表的抗氧化指標(biāo)，及以胰脂肪酶和脂聯(lián)素為代表的調(diào)血脂指標(biāo)，以期為決明子新的藥用開(kāi)發(fā)提供參考和依據(jù)?？梢灶A(yù)測(cè)：若決明子抗衰老作用符合自由基學(xué)說(shuō)，那么與之相聯(lián)系的抗氧化指標(biāo)如SOD、GSH-Px及MDA則會(huì)有不同程度的活性變化，能量支出降低。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物 決明子購(gòu)自鄭州市本草國(guó)藥館，經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院中藥資源鑒定教研室陳隨清教授鑒定為豆科植物決明Cassia obtusifolia L.的干燥成熟種子，為《中國(guó)藥典》2010年版收載的正品；維生素E由青島雙鯨藥業(yè)有限公司生產(chǎn) （國(guó)藥準(zhǔn)字H20043134，批號(hào)001008）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 ICR小鼠，SPF級(jí)，體質(zhì)量18～22 g之間，由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，其許可證號(hào)SCXK（豫）2010-0002，動(dòng)物合格證號(hào)：0008433。動(dòng)物飼養(yǎng)室環(huán)境溫度控制在 （25±2）℃，光周期為12L∶12D，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，動(dòng)物自由飲水和取食。

1.3 試劑與儀器 超氧化物歧化酶（SOD）ELISA試劑盒（批號(hào)20121105）、丙二醛 （MDA）ELISA試劑盒 （批號(hào)20121108）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶 （GSH-Px）ELISA試劑盒 （批號(hào)20121101）、胰脂肪酶 ELISA試劑盒 （批號(hào)20121112）、脂聯(lián)素ELISA試劑盒 （批號(hào)20121115），以上試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

BIORAD-680酶標(biāo)儀（Bio-Rad Laboratories）；DZKW-4電子水浴鍋 （上海東星建材試驗(yàn)設(shè)備有限公司；BS-210S電子分析天平 （北京賽多利斯天平有限公司）；SZ-093雙重蒸餾器（上海市亞榮生化儀器廠）；TDL-40B型低速臺(tái)式離心機(jī) （上海安亭科學(xué)儀器廠）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 決明子水煎液的配置 稱取決明子100.0 g，常溫下加10倍量雙蒸水煎煮1 h，過(guò)濾，藥渣加800mL水再次煎煮1 h，合并兩次濾液，濃縮至100 mL。每1 mL含生藥質(zhì)量1 g，放置冰箱中 （0～4℃）保存?zhèn)溆?。用時(shí)稀釋成相應(yīng)濃度。

2.2 實(shí)驗(yàn)分組 50只ICR小鼠隨機(jī)分為5組，雌雄各半，分開(kāi)飼養(yǎng)。分別為空白對(duì)照組，決明子水煎液高、中、低劑量組，陽(yáng)藥對(duì)照組。每天上午9點(diǎn)灌胃給藥，連續(xù)給藥28 d，每天1次，給藥體積為20 mL/kg。高劑量組給藥劑量為20 mg/kg；中劑量組給藥劑量為10 mg/kg；低劑量組給藥劑量為5 mg/kg；陽(yáng)性對(duì)照藥維生素E組給藥劑量為5 mg/kg；空白組給相同體積的蒸餾水。每天稱取動(dòng)物體質(zhì)量，按照體質(zhì)量給藥。

2.3 呼吸代謝測(cè)定 實(shí)驗(yàn)結(jié)束前一天給藥后，用CYES-H型O2、CO2氣體測(cè)定儀 （上海精勝科學(xué)儀器有限公司）測(cè)定動(dòng)物RMR，測(cè)定前，將儀器放在新鮮空氣環(huán)境中 （室溫20～25℃，濕度70%），在進(jìn)氣口接一根長(zhǎng)約20 cm的硅膠管，另一端和被測(cè)氣體相連。以空氣中氧濃度21.0%定標(biāo)，待讀數(shù)穩(wěn)定后，再定CO2濃度。之后，把小鼠放入一個(gè)容積為2 L的密閉容器里，用KOH和干燥硅膠吸收呼吸室內(nèi)的CO2和水分，放置在30℃ （小鼠的熱中性區(qū)溫度）恒溫箱內(nèi)1 h，待動(dòng)物穩(wěn)定后，開(kāi)始記錄耗氧量，每隔5 min記錄1次，連續(xù)測(cè)定1 h。選取2個(gè)連續(xù)穩(wěn)定的最低值來(lái)計(jì)算RMR。代謝率 （耗氧量）值均校對(duì)為標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài) （0℃，1個(gè)大氣壓）下。每次完成讀數(shù)后，用新鮮空氣清洗氣路，重新定標(biāo)調(diào)零。重復(fù)3次。以耗氧量 （mL·g-1·h-1）表示其代謝速率。

2.4 血清中各指標(biāo)測(cè)定 末次給藥后1 h，摘眼球取血，為了減少食物對(duì)各指標(biāo)的影響，處死前一天晚上20點(diǎn)開(kāi)始禁食12 h。血液4 000 r/min離心，取血清，血清中超氧化物歧化酶 （SOD）活力、丙二醛 （MDA）水平、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶 （GSH-Px）活力及胰脂肪酶與脂聯(lián)素水平均根據(jù)ELISA試劑盒所附方法及步驟進(jìn)行測(cè)定。

2.5 數(shù)據(jù)處理 所得數(shù)據(jù)運(yùn)用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)性別差異，各組均P＞0.05，故做為整體一起統(tǒng)計(jì)。

結(jié)果用x±s表示。數(shù)據(jù)分析用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，組間比較采用單因素方差分析（one way ANOVA），多重比較采用Turkey HSD方法進(jìn)行分析。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 體質(zhì)量、胃腸濕質(zhì)量和胃腸指數(shù) 單因素方差分析結(jié)果表明：體質(zhì)量在不同處理組間雖然有下降的趨勢(shì)，但統(tǒng)計(jì)上無(wú)顯著性差異 （F4，36=0.634，P＞0.05，one-way ANOVA）。胃腸濕質(zhì)量在各處理組間有顯著性差異（F4，36=5.795，P＜0.01，one-way ANOVA）。胃腸指數(shù)在各處理組間亦有顯著性差異 （F4，36=14.480，P＜0.001，one-way ANOVA）。

多重比較（Turkey HSD）結(jié)果表明：體質(zhì)量無(wú)論與空白組比較，還是與陽(yáng)性對(duì)照藥 （VE）組比較，各組間均無(wú)顯著性差異。胃腸濕質(zhì)量與空白對(duì)照組相比時(shí)，決明子水煎液高劑量組和中劑量組均有顯著性差異，顯著性水平均為P＜0.01，決明子水煎液低劑量組未見(jiàn)顯著性差異；與陽(yáng)性藥組比較時(shí)均無(wú)顯著性差異。胃腸指數(shù)與空白對(duì)照組比較時(shí)，決明子水煎液高劑量組和中劑量組均有顯著性差異，顯著性水平均為P＜0.001，決明子水煎液低劑量組未見(jiàn)顯著性差異；與陽(yáng)性藥組比較時(shí)僅決明子水煎液高劑量組有顯著性差異，P＜0.05。見(jiàn)表1。

3.2 靜止代謝率 （RMR） 單因素方差分析結(jié)果表明：不同組間的靜止代謝率有顯著性差異 （F4，36=3.783，P＜0.05，one-way ANOVA）。多重比較（Turkey HSD）結(jié)果表明：若與空白對(duì)照組相比，決明子高劑量組與中劑量組靜止代謝率有顯著降低，顯著性水平均為P＜0.05，決明子低劑量組無(wú)顯著差異。若與陽(yáng)性對(duì)照藥相比，3個(gè)給藥組則均無(wú)顯著性差異，P＞0.05。見(jiàn)表2。

表1 不同劑量決明子水煎液對(duì)小鼠體質(zhì)量、胃腸濕質(zhì)量、胃腸指數(shù)的影響 （x±s，n=10）

表2 不同劑量決明子水煎液對(duì)小鼠靜止代謝率 （RM R）的影響（x±s，n=10）

3.3 對(duì)血清中GSH-Px、SOD、MDA的影響 單因素方差分析結(jié)果表明：不同組間的GSH-Px質(zhì)量濃度無(wú)顯著性差異（F4，35=0.693，P＞0.05，one-way ANOVA）。不同組間的SOD酶活力有顯著性差異 （F4，36=2.801，P＜0.05，one-way ANOVA）。不同組間的MDA濃度有極顯著性差異（F4，36=4.098，P＜0.01，one-way ANOVA）。

多重比較（Turkey HSD）結(jié)果表明：若與空白對(duì)照組相比，不同給藥組的GSH-Px質(zhì)量濃度、SOD酶，活力均無(wú)顯著變化，P＞0.05，而MDA在決明子高劑量組和中劑量組有顯著降低，P＜0.05，P＜0.05。與陽(yáng)性對(duì)照藥組相比，不同給藥組的GSH-Px水平、SOD酶活、MDA水平均無(wú)顯著變化，P＞0.05。見(jiàn)表3。

表3 不同劑量決明子水煎液對(duì)小鼠血清中GSH-Px、SOD、MDA的影響（x±s，n=10）

3.4 對(duì)血清中胰脂肪酶、脂聯(lián)素的影響 單因素方差分析結(jié)果表明：各組間的胰脂肪酶活力有顯著性差異 （F4，36= 3.329，P＜0.05，one-way ANOVA）。不同組間的脂聯(lián)素水平無(wú)顯著差異（F4，36=0.767，P＞0.05，one-way ANOVA）。

多重比較（Turkey HSD）結(jié)果表明：若與空白對(duì)照組相比，決明子高劑量組和中劑量組的胰脂肪酶活力有顯著降低，P＜0.05。各給藥組脂聯(lián)素水平無(wú)顯著性差異。與陽(yáng)性對(duì)照藥組相比，不同給藥組的胰脂肪酶活力、脂聯(lián)素水平均無(wú)顯著變化，P＞0.05。見(jiàn)表4。

表4 不同劑量決明子水煎液對(duì)小鼠血清中胰脂肪酶、脂聯(lián)素的影響 （x±s，n=10）

3.5 RMR與血清中GSH-Px、SOD、MDA的相關(guān)分析 皮爾遜相關(guān)（Pearson correlation）分析結(jié)果表明：血清中GSH-Px質(zhì)量濃度與靜止代謝率（RMR）之間無(wú)顯著性相關(guān)關(guān)系（R=-0.217，P＞0.05），見(jiàn)圖1；血清中SOD活力與靜止代謝率 （RMR）之間有極顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系（R=-0.580，P＜0.001），見(jiàn)圖2；血清中MDA濃度與靜止代謝率 （RMR）之間有顯著的正相關(guān)關(guān)系（R=0.421，P＜0.05），見(jiàn)圖3。

圖1 血清中GSH-px濃度與靜止代謝率（RM R）之間的相關(guān)關(guān)系

圖2 血清中SOD酶活力與靜止代謝率（RMR）之間的相關(guān)關(guān)系

4 討論

圖3 血清中M DA濃度與靜止代謝率（RMR）之間的相關(guān)關(guān)系

實(shí)驗(yàn)中能量支出與壽命的關(guān)系比較復(fù)雜。很多物種中，靜止代謝率（RMR）和基礎(chǔ)代謝率 （BMR）可能與壽命有關(guān)系［6-7］。 文獻(xiàn)報(bào)道實(shí)驗(yàn)手段增加小鼠［8］及大鼠［9］、 田鼠［10］的能量支出，RMR增加，卻沒(méi)有增加其壽命。也有報(bào)道：適當(dāng)運(yùn)動(dòng)致能量支出增加，小鼠壽命則有延長(zhǎng)［11］。無(wú)脊椎動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果則更多傾向于：能量支出減少，壽命延長(zhǎng)。例如：低溫或巢穴減小造成的家蠅（Musca domestica）和果蠅 （Drosophila.）活動(dòng)減少能增加壽命［12-13］。烏龜亦是如此。目前，后者公認(rèn)度更為廣泛。研究證實(shí)，限制熱量攝入，代謝率降低，是廣泛適用于各類動(dòng)物種屬的抗衰老方法。

本實(shí)驗(yàn)中，隨著決明子劑量增大，小鼠體質(zhì)量、胃腸濕質(zhì)量和胃腸指數(shù)與靜止代謝率等整體指標(biāo)均有顯著性降低，并與劑量呈現(xiàn)明顯量效關(guān)系，這與決明子的潤(rùn)腸通便之功效相符，表明機(jī)體可能通過(guò)胃腸內(nèi)容物減少，體質(zhì)量降低。根據(jù)能量平衡原理，攝入的能量若有減少，則供機(jī)體支出的能量也會(huì)減少，故靜止代謝率會(huì)降低。

自由基學(xué)說(shuō)相聯(lián)系的指標(biāo)，MDA是膜脂過(guò)氧化終產(chǎn)物，衰老時(shí)，活性氧積累誘發(fā)膜脂過(guò)氧化加快，MDA增多。SOD作為生物體內(nèi)的 “垃圾清道夫”，可清除機(jī)體內(nèi)的超氧陰離子自由基。GSH-Px作為機(jī)體中重要的過(guò)氧化物分解酶，對(duì)保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能不受過(guò)氧化物的干擾和損害。在決明子水煎液的作用下，若與空白對(duì)照組相比，血清中MDA在高劑量組和中劑量組有極顯著地降低，SOD和GSH-Px則略有升高，但無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與維生素E組相比，均無(wú)顯著差異。符合預(yù)測(cè)，支持假說(shuō)。

自由基學(xué)說(shuō)把衰老研究與能量代謝聯(lián)系起來(lái)，本實(shí)驗(yàn)對(duì)抗氧化指標(biāo)和靜止代謝率進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果表明：血清中GSH-Px水平與靜止代謝率（RMR）之間無(wú)顯著性相關(guān)關(guān)系（R=-0.217，P＞0.05）：SOD活力與靜止代謝率（RMR）之間有極顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系（R=-0.580，P＜0.001）；MDA濃度與靜止代謝率 （RMR）之間有極顯著的正相關(guān)關(guān)系 （R=0.421，P＜0.05），可推測(cè)：SOD增多，MDA減少，則RMR降低，壽命得到延長(zhǎng)。由此可知，自由基學(xué)說(shuō)在小鼠靜止代謝率和衰老研究中起到了紐帶作用。

在體內(nèi)，脂肪酸的氧化過(guò)程有大量氧化中間產(chǎn)物生成，且過(guò)多的脂肪會(huì)引起肥胖、糖尿病等一系列代謝綜合征，加速衰老進(jìn)程。在對(duì)代謝綜合征的研究中發(fā)現(xiàn)，人體對(duì)食物脂肪的攝入是直接或間接的誘因，控制食物脂肪的攝入，可有效地控制高脂血癥的出現(xiàn)，并可預(yù)防肥胖、糖尿病等疾病的發(fā)生。胰脂肪酶水解膳食脂肪，可調(diào)節(jié)機(jī)體的血脂水平。脂聯(lián)素是脂肪細(xì)胞分泌的一種胰島素增敏激素，可調(diào)節(jié)機(jī)內(nèi)的血糖水平。在決明子水煎液的作用下，與空白對(duì)照組相比，高劑量組和中劑量組血清中胰脂肪酶水平有顯著降低，脂聯(lián)素水平略有升高，但無(wú)顯著差異。該結(jié)果表明決明子降脂作用與胰脂肪酶活性抑制有關(guān)，與研究組前期體外結(jié)果一致［14］，可能是決明子作為傳統(tǒng) “輕身”藥、現(xiàn)代減肥藥的基礎(chǔ)［15］。

《神農(nóng)本草經(jīng)》將決明子列為上品，謂其"主青盲、目淫、膚赤、白膜、眼赤通、淚。服益精光，輕身"。而中醫(yī)中的輕身是指機(jī)體處于健康狀態(tài)，如 “輕身延年”［15-16］?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明中藥有效成分可與體內(nèi)自由基結(jié)合，抑制過(guò)氧化反應(yīng)，降低脂褐素和增齡色素的沉積，延緩衰老［15］。本實(shí)驗(yàn)中，不同劑量的決明子水煎液使小鼠體內(nèi)的抗氧化指標(biāo)SOD、GSH-Px活力有一定升高、MDA濃度有顯著降低，我們推測(cè)，這一結(jié)果與決明子的功效息息相關(guān)：其具有的潤(rùn)腸通便之功效可以排出隨年齡增長(zhǎng)而在體內(nèi)積累的毒素，另外決明子的抗氧化作用可清除糖、脂肪、蛋白質(zhì)代謝過(guò)程中產(chǎn)生的自由基，避免大分子物質(zhì)交聯(lián)，使機(jī)體氧化應(yīng)激能力增強(qiáng)，改善衰老狀態(tài)。符合預(yù)測(cè)，支持了自由基學(xué)說(shuō)。該研究結(jié)果對(duì)于探究決明子的藥理作用機(jī)制提供了理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)，也為指導(dǎo)其臨床合理應(yīng)用提供了強(qiáng)有力的證據(jù)。

［1］Lee H C，Wei Y H.The role ofmitochondria in human aging［J］.JBiomed Sci，1997，4（6）：319-326.

［2］Speakman JR，Selman C，McLaren JS，etal.Living fast，dying when？The link between aging and energetics［J］.J Nutr，2002，132（6 Suppl2）：1583s-1597s.

［3］Pearl R.The rate of living［M］.London，UK：University of London Press，1928：123.

［4］Harman D.The aging process［J］.Proc Natl Acad Sci USA，1981，78（11）：7124-7128.

［5］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：2010年版一部［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：135.

［6］Furness L，Speakman J.Energetics and longevity in birds［J］. Age，2008.30（2-3）：75-87.

［7］Schmidt-Nielsen K.Scaling：why is animal size so important？［M］.London，UK：Cambridge University Press，1984：98.

［8］Selman C，McLaren JS，Collins A R，etal.The impactof experimentally elevated energy expenditure on oxidative stress and lifespan in the short-tailed field vole Microtusagrestis［J］.Proc Biol Sci，2008，275（1645）：1907-1916.

［9］Holloszy JO.Exercise increasesaverage longevity of female rats despite increased food intake and no growth retardation［J］.JGerontol，1993，48（3）：97-100.

［10］Vaanholt L M，Daan S，Schubert K A，et al.Metabolism and aging：effects of cold exposure on metabolic rate，body composition，and longevity in mice［J］.Physiol Biochem Zool，2009，82（4）：314-324.

［11］Chigurupati S，Son TG，Hyun DH，et al.Lifelong running reduces oxidative stress and degenerative changes in the testes of mice［J］.JEndocrinol，2008，199（2）：333-341.

［12］Magwere T.Flight activity，mortality rates，and lipoxidative damage in Drosophila［J］.JGerontol Biol Sci Med Sci，2006，61（2）：136-145.

［13］Yan L J，Sohal R S.Prevention of flight activity prolongs the life span of the housefly，Musca domestica，and attenuates the age-associated oxidative damamge to specific mitochondrial proteins［J］.Free Radic Biol Med，2000，29（11）：1143-1150.

［14］吳宿慧，馬永潔，蔣 娜，等.決明子抗衰老系列實(shí)驗(yàn)Ⅰ：決明子體外抗氧化與抑制胰脂肪酶活性研究［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2013，11（34）：342-344.

［15］朱 平.“輕身”藥辨析［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2013，28（3）：605-608.

［16］王德仁.本草綱目中輕身延年藥梗概［J］.中成藥，1995，17（2）：38-39.

R285.5

：B

：1001-1528（2015）06-1343-05

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.06.042

2014-02-28

河南中醫(yī)學(xué)院博士科研基金 （BSJJ2009-37）；金水區(qū)技術(shù)研究與開(kāi)發(fā)經(jīng)費(fèi)支持項(xiàng)目 （金科 ［2011］31號(hào)項(xiàng)目序號(hào)：45）；河南省教育廳科學(xué)技術(shù)重點(diǎn)資助項(xiàng)目 （14A310023）

吳宿慧，博士，講師，主要從事藥理學(xué)和中藥藥理學(xué)研究。E-mail：iwusuhui@163.com

*通信作者：李根林，教授，主要從事中藥抗衰老作用研究。E-mail：lhb8899@163.com

日期：2014-12-16

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/31.1368.R.20141216.1005.001.html