蜜蜂巢脾提取物的降血脂研究

趙紅霞，黃文忠，鄒宇曉，沈維治，林光月，梁 勤，羅岳雄*

1 廣東省昆蟲研究所，廣州 510260;2 廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，廣州 510640;3福建農(nóng)林大學(xué)，福州 350002

巢脾是指由蜜蜂蠟腺分泌蠟質(zhì)后建造的雙面巢房結(jié)構(gòu)，是蜜蜂棲息繁衍育子、貯存花蜜花粉的場所，含有大量的生物活性成分。我國是世界第一的養(yǎng)蜂大國［1］，提供了豐富的優(yōu)質(zhì)蜂產(chǎn)品，但是巢脾作為蜂群的副產(chǎn)物，研究開發(fā)的程度較低且養(yǎng)蜂生產(chǎn)淘汰下來的巢脾數(shù)量相當(dāng)驚人［2］。近年來研究表明蜜蜂巢脾對鼻炎、乙型肝炎、急性乳腺炎等炎癥以及抑菌殺菌、攻毒殺蟲、祛風(fēng)鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗氧化(清除自由基)功能等生物學(xué)以及藥理學(xué)價值［2-8］。尤其是，巢脾提取物具有抑菌效果，吳國棟等通過巢脾抑菌試驗表明，巢脾提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、沙門氏桿菌、傷寒桿菌產(chǎn)生明顯抑制作用［9］。朱俊彥等報道0.5 g/mL 和0.25 g/mL(終濃度)意蜂巢脾水提液對短小桿菌、金黃色葡萄球菌、八疊桿菌、大腸桿菌和蠟狀桿菌都有很好的抑制作用［10］。龔蜜等研究表明，巢脾提取物對金黃色葡萄球菌均有抑制作用，并且抑制效果呈濃度依賴效應(yīng)［11］。巢脾對多種細菌具有抑制作用，且對革蘭氏陽性細菌的抑制效果優(yōu)于對革蘭氏陰性細菌的抑制效果。自由基對人體危害極大，必須補充有效的抗氧化物來抑制自由基，所以天然優(yōu)質(zhì)的抗氧化物選擇非常重要，老蜂巢具有清除自由基的作用［12］。褚亞芳等得出巢脾水提物對于對二甲苯致小鼠耳腫脹和角叉菜膠致小鼠足腫脹等急性炎癥有顯著的抑制作用［13］;匡邦郁等應(yīng)用巢脾提取物治療急性傳染性肝炎、慢性肝炎、遷延性肝炎、早期肝硬化214 例，同時對各種鼻炎294 例，包括慢性鼻炎、慢性副鼻竇炎、過敏性鼻炎、肥大性鼻炎、單純性鼻炎［14］。程茂盛等通過巢脾提取物對試驗菌株金黃葡萄球菌、銅綠假單胞菌、表皮葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌抑制有良好的抑制效果［15，16］。目前，民間有記載關(guān)于巢脾提取物用于降血脂的功效，但其藥效成分和作用機理尚不明確，因此本文探討了蜜蜂巢脾提取物對高脂血癥小鼠的降血脂作用，為巢脾在醫(yī)藥保健領(lǐng)域的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，為巢脾的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)提供有效的技術(shù)保障。

1 材料與儀器

1.1 蜜蜂巢脾提取物

冰凍破碎并過篩后，2 kg 蜜蜂巢脾和1 kg 水混勻，煮至完全溶解，過濾，除去蜂蠟后，再將濾渣和濾液混合，慢火(80～86 ℃)煮2～3 h，過濾去渣，剩余濾液慢火(80～86 ℃)煮至濃縮為500 g。小鼠高、中、低劑量分別設(shè)為10 g/kg·bw·d，5 g/kg·bw·d，2.5 g/kg·bw·d。

1.2 實驗動物

雄性KM 小鼠(20±2 g)，購自廣州中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心，許可證號SCXK(粵)2008-0020。

1.3 試劑

高脂飼料(上海起發(fā)實驗試劑有限公司)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C 選擇性沉淀法)試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司);甘油三酯(TG 酶法)試劑盒，總膽固醇(CHO 酶法)試劑盒，均由浙江東甌診斷產(chǎn)品有限公司提供，其余試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.4 儀器

AL204 電子天平(上海梅特勒托利多儀器有限公司);HWS26 電熱恒溫水浴鍋(上海一恒有限公司);MM-2 型快速旋渦振蕩器(江蘇省姜堰市沈高康健生化器具廠);SB25-12DTD 超聲波清洗機(寧波新芝生物科技股份有限公司);D-37520 離心機(Thermo Electron LED GmbH);酶標(biāo)儀;計時器

2 實驗方法

2.1 實驗小鼠

KM 雄性小鼠喂飼基礎(chǔ)飼料，適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，按體重隨機分為6 組，每組10 只小鼠:①空白對照組:飼喂基礎(chǔ)飼料和灌喂生理鹽水;②高血脂對照組:飼喂高脂飼料和灌喂生理鹽水;③陽性對照組:飼喂高脂飼料和灌喂陽性藥物(辛伐他汀);④高劑量組:飼喂高脂飼料和巢脾提取物(10 g/kg·bw·d);⑤中劑量組:飼喂高脂飼料和巢脾提取物(5 g/kg·bw·d);⑥低劑量組:飼喂高脂飼料和巢脾提取物(2.5 g/kg·bw·d)。每飼喂7 d 后禁食12 h，進行眼眶取血，測定小鼠的總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇等三項血脂指標(biāo)(按試劑盒使用說明測定)。

2.2 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計

本實驗數(shù)據(jù)用SPSS17.0 statistics 統(tǒng)計軟件中鄧肯氏新復(fù)極差檢驗分析，結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示。

3 實驗結(jié)果

3.1 實驗小鼠體重變化

從實驗第1 周開始至第5 周實驗結(jié)束，各組小鼠的體重呈增長趨勢。其中，相對于空白對照組而言，高血脂對照組、陽性對照組和低劑量組小鼠的體重增長較快，但是實驗過程中各組間的體重沒有顯著性差異(P＞0.05)(表1)。

3.2 血脂指標(biāo)檢測

3.2.1 對小鼠血清總膽固醇(TCH)的影響

實驗第一周，各組小鼠血清中總膽固醇水平均無顯著性差異(P＞0.05)。到實驗中期(第3 周)，給藥組(包括高血脂對照組，陽性對照組，高、中、低劑量組)的總膽固醇水平明顯高于空白對照組，存在顯著性差異(P＜0.05)。到實驗后期(第5 周)，所有劑量組的總膽固醇顯著低于高血脂對照組的總膽固醇水平。其中，高劑量組降總膽固醇水平最明顯，中劑量組次之，低劑量組最小。高劑量組和陽性對照組之間無顯著性差異(P＞0.05)(見表2)。

表1 各組小鼠的體重變化Table 1 Body weights of mice among different groups

表2 巢脾提取物對小鼠血清總膽固醇的影響Table 2 The effects of honeybee comb on serum TC in mice

3.2.2 對小鼠甘油三酯的影響

實驗第一周，各組小鼠血清中甘油三酯水平均無顯著性差異(P＞0.05)。實驗中期(第3 周)，給藥組(包括高血脂對照組，陽性對照組及高、中、低劑量組)的甘油三酯水平顯著高于空白對照組(P＜0.05)，而陽性對照組和高、中、低劑量組的甘油三酯水平均顯著低于高血脂對照組(P＜0.05)。到了實驗后期(第5 周)，所有劑量組的甘油三酯水平均顯著低于高脂對照組(P＜0.05)。其中，高劑量組降甘油三酯水平最為明顯，中劑量組次之，低劑量組最小。高劑量組與陽性對照無顯著性差異(P＞0.05)(見表3)。

表3 巢脾提取物對小鼠血清甘油三酯的影響Table 3 The effects of honeybee comb on serum TG in mice

3.2.3 對小鼠高密度脂蛋白的影響

實驗第一周，各組小鼠血清中高密度脂蛋白水平均無顯著性差異(P＞0.05)。到實驗中期(第3周)，給藥組(包括高脂對照組，陽性對照組及高、中、低各劑量組)的高密度脂蛋白水平顯著低于空白對照組(P＜0.05)，給藥組組間無顯著差異(P＞0.05)。到了實驗后期(第5 周)，給藥組高密度脂蛋白顯著高于高脂對照組(P＜0.05)，且陽性對照組和高劑量組顯著高于中、低劑量組(P＜0.05)(見表4)。

表4 巢脾提取物對小鼠高密度脂蛋白的影響Table 4 The effects of honeybee comb on HDL-C in mice

4 討論

高脂血癥是指由于脂肪代謝或運轉(zhuǎn)異常使血漿一種或多種脂質(zhì)高于正常，表現(xiàn)為高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥或兩者兼有，因此，本研究對實驗動物膽固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白水平進行了測定。本實驗結(jié)果顯示，巢脾提取物能較好地降低高脂血癥小鼠血清中膽固醇和甘油三酯水平，提高高密度脂蛋白的含量，且具劑量依賴性，說明巢脾提取物能較顯著地降低高脂血癥模型小鼠的血脂水平。

目前，臨床上常用的降血脂藥物主要有降甘油三酯為主的貝特類藥物和降膽固醇為主的他汀類藥物，然而，這些藥物長期服用不可避免地產(chǎn)生較多的不良反應(yīng)［17］。民間有記載高血脂患者通過食用巢脾物，降低血脂的功效;未見相關(guān)的動物試驗及其深入的機理研究［2］。通過本研究，不僅證實了相關(guān)的記載或報道，而且探討了巢脾提取物對高血脂小鼠的降血脂功效。

本研究表明，巢脾提取物具有良好的降血脂作用，有望開發(fā)成為安全有效的降脂藥物，其確切作用機制有待進一步研究。

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