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    紫錐菊的生藥學研究

    2015-01-11 04:38:50鐘英杰張會梅付海寧周風琴郭慶梅
    天然產物研究與開發(fā) 2015年2期
    關鍵詞:腺毛先端表皮

    鐘英杰,張會梅,付海寧,周風琴,郭慶梅*

    1 山東中醫(yī)藥大學,濟南 250355;2 青島蔚藍生物股份有限公司,青島 266111

    紫錐菊屬(Echinacea Moenck.)為原產于美洲的一類菊科植物,也稱“松果菊”,是西方歷史中最為悠久的植物藥之一,也是聞名世界的“免疫”植物,具有突出的免疫促進和抗感染作用。該屬植物共有8 種及數(shù)個變種,其中已開發(fā)為藥品的主要為紫錐菊(紫松果菊)、狹葉紫錐菊(松果菊)及白松果菊三種,我國已將此三種紫錐菊引種成功。

    目前,在歐洲紫錐菊屬植物主要作為動物免疫調節(jié)劑,以紫錐菊為原料的產品連續(xù)數(shù)年銷量在植物藥市場中名列前茅,美國藥用植物銷售排名中,紫錐菊在1995、1996、1997、1999 年均排名第一,2000~2002 年間,在草藥銷售額排行榜中分別居第4、2和3 位[1]。在素以用藥嚴格、謹慎著稱的德國,紫錐菊成為用量最大、用途最廣的醫(yī)院用植物藥之一,主要用于治療和預防各種病原體導致的感染,對上呼吸道感染尤為有效。

    為了更好地開發(fā)其藥用價值,對本品進行了系統(tǒng)的生藥學研究。

    1 來源鑒定

    1.1 實驗材料

    本試驗用藥材購自安徽桐城維慶藥用植物有限責任公司,由山東中醫(yī)藥大學中藥鑒定室周風琴教授鑒定為紫錐菊Echinacea purpurea(L.)Moench.。

    1.2 植物形態(tài)

    紫錐菊Echinacea purpurea(L.)Moench.,多年生草本。主根圓錐形,長14~30 cm,生多數(shù)側根及須根;根莖部易于萌生側芽及不定根。莖直立,高80~100 cm,表面綠色,具褐紫色條斑及白色糙毛,中部以上具分枝。基生葉叢生,葉片卵狀披針形或寬披針形,長3.5~18 cm,寬1.8~6 cm,邊緣具疏齒,有長柄。頭狀花序,總苞4~5 層,綠色,邊緣略膜質;花序生于莖端,舌狀20 余朵,粉紫紅色或紫紅色,長條形,花后期自基部向下折;管狀花黃色,密集于半球形或闊圓錐形花序托上,小苞片狹長,包被于管狀花的外側,先端具銳刺。瘦果,2 心皮?;?、果期5~10 月。

    2 性狀鑒定

    圖1 各時期紫錐菊植物形態(tài)圖Fig.1 The morphology of different period of E.purpurea

    紫錐菊的地上部分為莖葉花序的混合物。莖為圓柱形小段,直徑0.5~1.2 cm,表面灰綠色至灰褐色,并有紫褐色縱斑紋,疏生白色倒刺;體輕,質堅韌;斷面較平坦,皮部呈淡綠色,木部呈類白色,髓部類白色;氣微,味淡。葉多破碎;完整者展平后呈長卵形或寬披針形,長3.5~18 cm,寬1.8~6 cm;表面紫綠色,被白色硬毛,主脈3~5 條,邊緣具疏齒;葉柄黃棕色;質脆,易破碎;氣微,味淡。頭狀花序類圓球形或圓錐形,直徑2.2~3cm,褐色或紅褐色;總苞盤狀,總苞片4~5 層,棕綠色,披針形至卵狀披針形,近革質,外面被毛,中間數(shù)層先端外折;花托圓錐形,有托片;舌狀花12~20 余朵,暗紅褐色或褐色,狹長條形,皺縮;管狀花極多,托片龍骨狀,長于管狀花,先端尖成長刺狀;體輕,質韌;氣微香,味淡。未成熟瘦果倒圓錐形,長4~6 mm,直徑1.5~2 mm。表面灰白色,具四棱;頂端四棱處呈刺狀,中央凹陷;果皮薄,纖維性,內表面灰褐色,易與種子剝離,內有種子1 粒;氣微,破開后微具辛香氣,味微辛辣。以干燥、莖嫩色綠褐、葉多色紫綠、花序多色紫褐者為佳。

    3 顯微鑒定

    取紫錐菊全草藥材,按照2010 年版《中華人民共和國藥典》附錄18 頁顯微鑒別法,對紫錐菊藥材分部位按常規(guī)進行石蠟切片、粉末制片、表面制片、解離組織制片、細胞及細胞內含物測量、細胞壁和細胞內含物性質檢定等[2]。以相應的顯微技術觀察、描述、顯微照相或繪制墨線圖。

    圖2 紫錐菊根橫切面圖Fig.2 Transverse section organization structure chart of E.purpurea root

    3.1 根橫切面

    木栓層為多列薄壁細胞,內含黃棕色物質,常脫落而殘留1~3 列細胞。皮層為10~14 列略切向延長的類長圓形或類多角形薄壁細胞,排列較疏松,有裂隙,內皮層細胞呈類方形,沿垂周壁內側有明顯的凱氏帶;靠近內皮層處散有小型的裂生性分泌腔,內含黃棕色或紅棕色分泌物。無限外韌型維管束。韌皮部較寬廣,外側常形成大型裂隙,韌皮部篩管成群,射線寬廣。形成層成環(huán)。木質部寬廣,導管單個散在,或2~5 個成群,徑向排列,內側排列稀疏,外側中部由薄壁性木纖維和木薄壁細胞包圍導管,形成明顯的木化環(huán)層,其間射線寬1~3 列細胞;木質部導管分化到中部,無髓。有的薄壁細胞中含菊糖。

    3.2 莖橫切面

    表皮細胞一列,類方形,外被角質層,角質層外緣呈細齒狀;表面稀疏分布有兩種多細胞非腺毛,一種長圓錐形,先端銳尖,長446~1040 μm;一種棒狀,長134~180 μm;厚角組織細胞2~3 列,于角隅處增厚。皮層較狹,薄壁細胞呈類圓形或橢圓形,排列疏松。無限外韌型維管束,斷續(xù)環(huán)列,常大小相間;維管束外側散有多數(shù)小型的裂生性分泌腔,內含黃棕色或紅棕色分泌物。韌皮部狹窄,細胞排列緊密,外方有盔帽狀排列的初生韌皮纖維束;束中形成層明顯;木質部導管單個徑向排列。髓部極發(fā)達,細胞類圓形或圓多角形,具單紋孔;髓緣或靠近維管束內側散有多數(shù)小型分泌腔。有的薄壁細胞中含有菊糖。

    圖3 紫錐菊莖橫切面圖Fig.3 Transverse section organization structure chart of E.purpurea stem

    3.3 葉橫切面

    典型的兩面葉。上、下表皮各一列類長方形細胞,外被角質層,疏被多細胞非腺毛,以下表皮為多,非腺毛長約560 μm;氣孔主要分布于下表皮。葉肉組織分柵欄組織和海綿組織;柵欄組織由兩列長柱形柵狀細胞組成,不通過中脈,外層柵狀細胞長50~75 μm,垂周壁平直且排列緊密,內層柵狀細胞長22~58 μm,排列較疏松;海綿組織厚78~112 μm,由多列不規(guī)則形細胞組成,具有大型細胞間隙;葉肉組織細胞中含葉綠體。主脈和主側脈部位均向下表面極度突出。上、下表皮細胞外方被細紋狀角質層,內方為厚角組織;主脈維管束無限外韌型,2~3 個呈弧形分布,大小不一,木質部位于上方,導管徑向排列成列,形成層明顯,韌皮部位于下方成半包圍狀;主側脈維管束1 個;小側脈維管束縱橫分布于葉肉組織中,外被一列薄壁細胞組成的鞘。

    3.3.1 葉表面制片

    上表皮細胞呈不規(guī)則多角形,長56~112 μm,寬25~67 μm,排列緊密,垂周壁呈微波狀彎曲,偶見不定式氣孔。下表皮細胞呈不規(guī)則形,長34~90 μm,寬22~45 μm,垂周壁呈深波狀彎曲,氣孔不定式,周圍副衛(wèi)細胞4~5 個。非腺毛較密集,一種為長圓錐形非腺毛,長490~560 μm,3~6 個細胞,先端銳尖,壁較厚,具多數(shù)疣刺狀突起,主要分布于葉脈處;一種為棒狀毛,長110~180 μm,3~5 細胞組成,壁薄,先端略鈍圓,較少,分布于表皮細胞上。

    3.3.2 紫錐菊葉柄橫切面

    切面呈新月形,兩側邊緣形成翼狀。表皮細胞1 列,近長方形,外被角質層,內側有1~3 列厚角組織細胞,在角隅處加厚。薄壁細胞近圓形,細胞間隙較大。無限外韌型維管束12~14 個,大小不一,排成圓弧形,大型維管束的外側有新月形的初生韌皮纖維束;形成層明顯,木部導管呈徑向排列。

    圖4 紫錐菊葉橫切面圖Fig.4 Transverse section organization structure chart of E.purpurea leaf

    3.4 紫錐菊粉末特征

    3.4.1 根粉末特征:黃棕色

    石細胞無色或淡黃色,呈條形、類方形或不規(guī)則形,長56~130 μm,直徑28~34 μm;壁較厚,孔溝細密,胞腔較大,有的內含棕黃色或棕紅色物質。導管多為網(wǎng)紋或梯狀網(wǎng)紋導管和具緣孔紋導管,少見螺紋導管,直徑22~56 μm。纖維較少,細長梭形,多碎斷,直徑13~22 μm,壁微木化。木栓細胞棕黃色,呈類方形,長45~78 μm,寬22~47 μm,排列較整齊,有的中間具分隔,細胞壁多呈連珠狀增厚,胞腔內含棕黃色物質。菊糖含于薄壁細胞中或散在。淀粉粒少見,類圓形或長圓形,直徑約3.4 μm(圖5)。

    3.4.2 莖粉末特征:黃白色

    圖5 紫錐菊根粉末圖Fig.5 Powder of E.purpurea root

    表皮碎片多見,細胞呈徑向長方形、梭形或多角形,長40~170 μm,直徑19~43 μm;垂周壁多平直,外平周壁具縱向平行的線形角質紋理;偶見不定式氣孔。纖維眾多,狹長條形,多碎斷,直徑8~16 μm,壁稍厚,胞腔狹細。髓薄壁細胞成群或散在,無色或淡黃色,長方形,長78~171 μm,寬34~75 μm,紋孔密集。導管成束或散在,主為螺紋導管,少見網(wǎng)紋、具緣孔紋導管,直徑11~45 μm。非腺毛偶見,多細胞,大多斷裂,長圓錐形,長213~500 μm,先端銳尖,細胞壁表面疣狀突起多而明顯。菊糖充塞于薄壁細胞中或散在。淀粉粒少見,類圓形或長圓形,直徑1~4.5 μm(圖6)。

    圖6 紫錐菊莖粉末圖Fig.6 Powder of E.purpurea stem

    3.4.3 葉粉末特征:暗綠色

    葉肉組織碎片多見,上下表皮各1 列,柵欄組織細胞長柱形,1~2 列;海綿組織細胞呈不規(guī)則形,細胞間隙大。上表皮細胞表面觀呈不規(guī)則多角形,長56~112 μm,寬25~67 μm,垂周壁微波狀彎曲,偶見不定式氣孔;下表皮細胞表面觀呈不規(guī)則形,長34~90 μm,寬22~45 μm,垂周壁深波狀彎曲,不定式氣孔眾多,副衛(wèi)細胞4~5 個。非腺毛有兩種:一種為長圓錐形毛,由2~5 個細胞組成,長280~347 μm,基部細胞寬闊,直徑22~34 μm,頂端細胞長漸尖,先端銳尖,壁較厚,壁上具多數(shù)明顯的疣狀突起;另一種為短棒狀毛,由4~6 個細胞組成,壁較薄,長60~140 μm,直徑15~24 μm,細胞呈類方形,頂端細胞圓鈍。導管多數(shù),主為螺紋和梯紋導管,少見網(wǎng)紋導管,直徑12~36 μm(圖7)。

    3.4.4 花序粉末特征:黃褐色

    圖7 紫錐菊葉粉末圖Fig.7 Powder of E.purpurea leaf

    花粉粒眾多,無色或淡黃色,球形,直徑24~37 μm,外壁具刺狀突起及細顆粒狀雕紋,萌發(fā)孔3 個,兩萌發(fā)孔間有4~6 個刺狀突起,刺長4.5~5.6 μm。石細胞成群或單個,無色,類方形、長條形或不規(guī)則形,長16~74 μm,寬12~22 μm,周圍有黑色素包繞,壁較厚,孔溝細密,胞腔小,內含棕紅色物。總苞上表皮細胞類長方形或長多角形,垂周壁多平直。下表皮細胞長多角形或多角形,垂周壁略彎曲,平周壁具細密縱向角質層紋理,氣孔處角質層紋理呈放射狀;不定式氣孔密集,副衛(wèi)細胞3~5 個。中果皮碎片多見,細胞長方形或長多角形,壁略增厚,具極密集的細小紋孔。舌狀花碎片棕色或黃棕色,表皮細胞向外呈圓鈍毛狀或乳頭狀突起,有的毛狀突起脫落而散在?;ǚ勰覂缺诩毎书L多角形,直徑13~25 μm,外平周壁和垂周壁增厚,表面觀增厚部位呈紡錘形或橢圓形,兩端增厚部位呈點狀。非腺毛兩種:一種為長圓錐形毛,由2~5 個細胞組成,基部細胞較寬闊,先端細胞長漸尖;另一種呈短棒狀,由4~6 個細胞組成,頂端細胞圓鈍。內果皮厚壁纖維常見,直徑10~16 μm,表面被有棕紅色色素物質,未覆蓋部分可見1 至數(shù)個單斜紋孔。柱頭表皮細胞突起呈單細胞棒狀毛,或呈囊狀、乳頭狀突起,頂端稍尖或鈍圓(圖8)。

    圖8 紫錐菊花序粉末圖Fig.8 Powder of E.purpurea inflorescences

    3.4.5 紫錐菊藥材地上部分粉末特征:灰綠色

    纖維眾多,細長,常碎斷,直徑13~16 μm,成束或散在,壁厚,胞腔狹窄。葉肉組織碎片常見,表皮細胞1 列,柵欄細胞長柱形,1~2 列;海綿組織細胞不規(guī)則形,細胞間隙大。莖髓薄壁細胞成群,無色,長方形或長多角形,長72~168 μm,直徑22~48 μm,紋孔多。舌狀花碎片棕色或黃棕色,表皮細胞向外呈圓鈍毛狀或乳頭狀突起,有的毛狀突起脫落而散在。花粉粒無色或淡黃色,球形,直徑24~37 μm,外壁具刺狀突起及細顆粒狀雕紋,萌發(fā)孔3 個,兩萌發(fā)孔間有4~6 個刺狀突起,刺長4.5~5.6 μm。葉上表皮細胞呈不規(guī)則多角形,垂周壁微波狀彎曲;下表皮細胞不規(guī)則形,垂周壁深波狀彎曲,氣孔不定式,副衛(wèi)細胞4~5 個。多細胞非腺毛常斷裂,完整者長圓錐形,3~6 個細胞,先端長漸尖,表面具明顯的疣狀突起。偶見棒狀非腺毛,3~5 個細胞組成,壁薄,先端略鈍圓。莖表皮細胞長方形、梭形或多角形,垂周壁多平直,長40~170 μm,直徑19~43 μm;平周壁具平行角質線紋;偶見不定式氣孔。導管成束或散在,多為網(wǎng)紋(部分導管紋孔整齊排列成梯形)、孔紋,直徑10~22 μm。內果皮厚壁纖維成片,表面被棕紅色或暗棕色色素物質,未覆蓋部分可見細胞壁或1 至數(shù)個單斜紋孔。石細胞少數(shù),成群或散在,無色,類方形、長條形或不規(guī)則形,長16~74 μm,直徑12~22 μm,壁較厚,孔溝細密,胞腔小,內含棕紅色物,周圍有黑色色素物質包繞。中果皮碎片,細胞長方形或長多角形,細胞壁略增厚,細小紋孔極密集。此外還有花粉囊內壁細胞、苞片表皮細胞、菊糖、分泌腔碎片等(圖9)。

    4 理化鑒別

    圖9 紫錐菊(地上部分)粉末圖Fig.9 Powder of E.purpurea(above ground part)

    取紫錐菊藥材粉末各0.1 g,加70%甲醇10 mL,加熱回流30 min,放冷,濾過,濾液真空蒸干,殘渣加甲醇1 mL 使溶解,作為供試品溶液。另取菊苣酸對照品,加甲醇制成每1 mL 含0.4 mg 的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗,吸取上述溶液各5 μL,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上,以乙酸乙酯-甲酸-水(6∶0.5∶1)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點。該方法簡單、靈敏,菊苣酸分離度好,熒光清楚,重現(xiàn)性、專屬性好。

    圖10 紫錐菊的薄層鑒別圖Fig.10 TLC chromatogram of E.purpurea

    5 結論

    本文對紫錐菊的植物來源、藥材性狀、顯微及理化鑒別等作了系統(tǒng)的研究,為開發(fā)利用紫錐菊這一新藥資源、制定藥材質量標準提供了理論依據(jù)。

    1 Wang M(王鳴),Yuan CQ(袁昌齊),F(xiàn)eng X(馮煦).歐美藥用植物(一).Chin Wild Plant Res(中國野生植物資源),2003,22(3):56-57

    2 Chinese Pharmacopoeia Commission(國家藥典委員會).Pharmacopoeia of the People’s Republic of China(中華人民共和國藥典).Beijing:China Medical Science Press,2010.Vol I,18.

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