豬瘟特異性轉(zhuǎn)移因子對(duì)豬瘟疫苗免疫抗體水平影響的研究

王得文，南金魚

（酒泉市畜牧獸醫(yī)局動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 酒泉735000）

豬瘟又稱豬霍亂，是由黃病毒科豬瘟病毒屬的豬瘟病毒引起的一種急性、發(fā)熱、接觸性傳染病，具有高度傳染性和致死性，是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）規(guī)定的A 類傳染病之一，我國《動(dòng)物防疫法》也將其列為一類傳染病，是目前危害我國養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的主要疫病之一。在我國，使用疫苗進(jìn)行免疫接種是控制豬瘟的最重要的手段，但是在生產(chǎn)中仍存在免疫失敗的情況，使用免疫增強(qiáng)劑來提高動(dòng)物免疫力，提高豬瘟的免疫效果，已成為豬瘟防控的熱點(diǎn)之一。特異性轉(zhuǎn)移因子是指采用某種特定病原感染或免疫人群、動(dòng)物后再提取的含該抗原特異活性的轉(zhuǎn)移因子，將這種特異的轉(zhuǎn)移因子應(yīng)用到其他動(dòng)物，會(huì)將這種免疫信息傳遞給該動(dòng)物，激發(fā)特異性免疫。特異性轉(zhuǎn)移因子的應(yīng)用范圍雖遠(yuǎn)不如非特異性轉(zhuǎn)移因子廣泛，但在腫瘤，免疫缺陷癥、各種病毒感染等方面已經(jīng)取得明顯優(yōu)于非特異性轉(zhuǎn)移因子的效果。豬瘟特異性轉(zhuǎn)移因子具有抗原特異性，可以將供體特定的細(xì)胞免疫功能特異地傳遞給受體。本研究旨在探討豬瘟特異性轉(zhuǎn)移因子和豬瘟疫苗聯(lián)合應(yīng)用，對(duì)豬瘟疫苗免疫初免和二次免疫抗體的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試劑 豬瘟間接血凝抗體檢測(cè)試劑盒，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)。

1.1.2 疫苗 豬瘟活疫苗（兔源），某獸用生物制品有限公司生產(chǎn)。

1.1.3 試驗(yàn)動(dòng)物 同一圈舍內(nèi)，同品種，體重相近，未接種豬瘟疫苗，30日齡仔豬采集血清，進(jìn)行母源抗體檢測(cè)，篩選母源抗體為陰性的仔豬用于試驗(yàn)。

1.2 方法

1.2.1 特異性轉(zhuǎn)移因子的制備 用豬瘟疫苗4頭份／頭給仔豬，首免；5d 后，8 頭份／頭，二免；10d后，16頭份／頭，三免；15d后，32頭份／頭，四免；20 d和30d 后，分別64 頭份／頭，五免和六免。45d后，處死，無菌采取脾臟，除去其表面被膜、脂肪及結(jié)締組織，絞碎并稱重后與等量蒸餾水混勻，勻漿，反復(fù)凍融后，離心取上清，用截留相對(duì)分子質(zhì)量為5 ku的超濾膜進(jìn)行超濾，超濾液經(jīng)過0.22μm 的濾膜過濾除菌，進(jìn)行理化性質(zhì)分析，-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 普通轉(zhuǎn)移因子的制備 選擇健康仔豬進(jìn)行飼喂，不進(jìn)行任何免疫、不使用任何藥物，90日齡時(shí)處死，無菌采取脾臟，除去表面被膜、脂肪及結(jié)締組織，絞碎并稱重后與等量蒸餾水混勻，勻漿，反復(fù)凍融后，離心取上清，用截留相對(duì)分子質(zhì)量為5ku的超濾膜進(jìn)行超濾，超濾液經(jīng)過0.22μm 的濾膜過濾除菌，進(jìn)行理化性質(zhì)分析，-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 免疫 首免：將試驗(yàn)仔豬隨機(jī)分為A、B、C三組，每組15頭豬。35日齡時(shí)進(jìn)行初免，A 組每頭注射豬瘟疫苗2頭份＋5mL特異性轉(zhuǎn)移因子，B組每頭注射豬瘟疫苗2 頭份＋5 mL 普通轉(zhuǎn)移因子。C組每頭注射豬瘟疫苗2頭份＋5mL生理鹽水。

二次免疫：于65日齡時(shí)進(jìn)行二次強(qiáng)化免疫。A組每頭注射豬瘟疫苗2頭份＋5mL特異性轉(zhuǎn)移因子，B組每頭注射豬瘟疫苗2頭份＋5mL普通轉(zhuǎn)移因子，C 組每頭注射豬瘟疫苗2 頭份＋5 mL 生理鹽水。

2 結(jié)果與分析

依照豬瘟間接血凝抗體檢測(cè)試劑盒使用說明書進(jìn)行操作和判定，分別于首免后第4、7、14、21d，二免后第4、7、14、21、28、60、90d采集血清，進(jìn)行免疫抗體檢測(cè)（結(jié)果見表1）。

表1 豬瘟特異性轉(zhuǎn)移因子對(duì)豬瘟免疫抗體水平影響 log2

結(jié)果顯示，A 組與C 組之間達(dá)到差異極顯著水平（P＜0.01），A 組與B 組之間達(dá)到差異顯著水平（P＜0.05），B 組與C 組之間也達(dá)到差異顯著水平（P＜0.05）。

3 討論

豬瘟疫苗首免和二免時(shí)配合轉(zhuǎn)移因子，對(duì)提高免疫抗體具有明顯的效果。本研究中豬瘟特異性轉(zhuǎn)移因子對(duì)提高豬瘟免疫抗體效果極為顯著，與使用普通轉(zhuǎn)移因子相比也有明顯的效果。特異性轉(zhuǎn)移因子是指轉(zhuǎn)移因子能將供體特有的細(xì)胞免疫功能轉(zhuǎn)移給原本無此反應(yīng)的受體，轉(zhuǎn)移速度迅速，通?？稍谑荏w接受轉(zhuǎn)移因子后的4h～24h便可獲得相應(yīng)的細(xì)胞免疫功能，可維持?jǐn)?shù)月或數(shù)年之久。在本試驗(yàn)中，A 組首免和二免后第4d抗體水平明顯高于對(duì)照組，充分說明豬瘟特異性轉(zhuǎn)移因子刺激啟動(dòng)了細(xì)胞免疫功能；90d后，A 組抗體水平仍然很高，達(dá)到了激發(fā)快速產(chǎn)生抗體，延長有效保護(hù)時(shí)間的效果。

在我國，疫苗免疫是預(yù)防豬瘟的主要方法。國內(nèi)疫苗生產(chǎn)廠家多以“頭份”為注射單位，每次免疫要求每頭注射1頭份。但在實(shí)際生產(chǎn)中，由于運(yùn)輸、儲(chǔ)存、注射部位、注射劑量等因素，注射1頭份難以達(dá)到預(yù)期效果，廣大養(yǎng)殖戶均采取加大劑量的辦法，提高免疫質(zhì)量。多數(shù)養(yǎng)殖戶每次免疫注射2頭份／頭，更有甚者每次免疫注射4頭份／頭。

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