新輔助化療對含基底細胞樣型乳腺癌中TOPOⅡa及PS2表達的影響及臨床意義*

周 恬，楊海松

(貴州醫(yī)科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院乳腺外科，貴陽 550004)

·經(jīng)驗交流·

新輔助化療對含基底細胞樣型乳腺癌中TOPOⅡa及PS2表達的影響及臨床意義*

周 恬，楊海松

(貴州醫(yī)科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院乳腺外科，貴陽 550004)

目的 新輔助化療對含基底細胞樣型乳腺癌(BLBC)中拓撲異構(gòu)酶-α(TOPOⅡα)、雌激素調(diào)節(jié)蛋白(PS2)表達的影響及臨床意義。方法選取2011年3月至2014年10月該院確診的BLBC患者124例，采用免疫組織化學(xué)法檢測所有患者化療前后組織中TOPOⅡα、PS2的表達，對所有患者隨訪5年，統(tǒng)計分析其與新輔助化療療效及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果化療后，TOPOⅡα、PS2陽性表達患者有效率明顯高于陰性表達患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；TOPOⅡα表達由陽性轉(zhuǎn)陰性患者有效率最高，由陰性轉(zhuǎn)陽性患者有效率最低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；在化療后3年內(nèi)，TOPOⅡα、PS2陽性表達患者總生存率明顯高于陰性表達患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論BLBC患者新輔助化療后可導(dǎo)致組織中TOPOⅡα、PS2的表達發(fā)生改變，TOPOⅡα、PS2的表達變化可作為預(yù)測療效、生存預(yù)后的重要指標。

新輔助化療；基底細胞樣型乳腺腫瘤；拓撲異構(gòu)酶-α；雌激素調(diào)節(jié)蛋白

乳腺癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，基底細胞樣型乳腺癌(basal-like breast car-cinomas，BLBC)是乳腺癌的一種亞型，其臨床治療、預(yù)后水平較其他亞型差[1]。乳腺由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成，屬于非維持機體生命活動的器官，因此BLBC并不致命，但機體在發(fā)生BLBC時，其癌細胞具有較高的松散性，可隨機脫落并通過血液、淋巴液等途徑轉(zhuǎn)移至全身，導(dǎo)致其他重要組織或器官發(fā)生病變，危及患者的生命安全[2]。乳腺切除術(shù)是治療乳腺癌的傳統(tǒng)治療手段，依據(jù)是否全部切除乳腺分為全乳切除術(shù)和病灶局部廣泛切除術(shù)，可有效切除局部腫瘤組織[3]。但因其具有局部復(fù)發(fā)及遠處轉(zhuǎn)移特性，且BLBC對內(nèi)分泌治療不敏感，預(yù)后差[4]。目前，化療仍是治療BCBL的主要手段。由于個體、病情等差異，化療療效也具有較為明顯的差異[5]。因此，依據(jù)有效預(yù)測化療療效的生物學(xué)標志物對化療方案進行指導(dǎo)是重點關(guān)注的問題，本院通過檢測新輔助化療前后BLBC患者組織中拓撲異構(gòu)酶-α(topoisomerase-α，TOPOⅡα)、雌激素調(diào)節(jié)蛋白(presenilin，PS2)的表達，以研究其與化療療效和預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2010年3月至2014年10月本院確診的BLBC患者124例，所有患者均為女性，年齡34～68歲，平均(47.29±10.27)歲，腫瘤大小2.00～5.96 cm，平均腫瘤大小(4.41±0.67)cm，臨床分期Ⅱ期45例，Ⅲ期61例，Ⅳ期18例，所有患者均經(jīng)雙乳彩超、X線和粗芯針穿刺獲得組織進行病理診斷首次確診為BLBC，且排除其他腫瘤發(fā)病，術(shù)前均接受4～6個周期的新輔助化療治療，所有患者均簽署知情同意書且經(jīng)本院醫(yī)藥倫理委員會審批通過。

1.2方法 對所有患者采用粗芯針穿刺獲得乳腺組織標本，并對標本通過10%福爾馬林液固定，常規(guī)包埋，切片[6]。根據(jù)病理及免疫組織化學(xué)結(jié)果，確診為浸潤性乳腺癌患者術(shù)前給予4～6個周期的新輔助化療治療，用免疫組織化學(xué)法檢測所有患者化療前后組織中TOPOⅡα、PS2的表達，具體方法如下。

1.2.1新輔助化療療法[7]新輔助化療方案為 4～6周期的 CE 方案 (環(huán)磷酰胺聯(lián)合表阿霉素)，具體實施操作為：每天對患者通過靜脈注射600 mg/m2環(huán)磷酰胺、60 mg/m2表柔比星，每個周期間隔時間為14～21 d，總化療時間為4～6個周期(依據(jù)患者病情、不良反應(yīng)等實際情況進行延長或縮短)，化療期間給予適量的抗腫瘤藥物治療，新輔助化療結(jié)束后行術(shù)前評估，達部分緩解(PR)或完全緩解(CR)者行手術(shù)治療，手術(shù)分為常規(guī)乳腺癌改良根治術(shù)、局部廣泛切除加腋窩淋巴結(jié)清掃、局部廣泛切除術(shù)加前哨淋巴結(jié)活檢術(shù)。

1.2.2免疫組織化學(xué)法檢測[8]對所有乳腺組織標本采用磷酸鹽緩沖液沖洗切片，采用常規(guī)免疫組織化學(xué)法檢測TOPOⅡα、PS2的表達，陽性檢測一抗(TOPOⅡα、PS2)均按1∶100制成稀釋液，陽性對照檢測均使用已知陽性切片，陰性對照檢測均使用磷酸鹽緩沖液代替一抗，TOPOⅡα、PS2檢測試劑由北京中杉公司提供，所有操作均嚴格在無菌條件下依據(jù)試劑盒說明書和相關(guān)規(guī)定由同一名醫(yī)師進行。

1.2.3觀察指標和標準 對所有切片標本由2名經(jīng)驗豐富的病理科醫(yī)師采用雙盲法進行閱片并判斷因子陰陽性表達，意見不一時，由另外一名同等資格醫(yī)師進行審閱決定，每份標本隨機抽取3個高倍鏡視野下進行讀數(shù)、計數(shù)，同時通過電話方式進行為期5年的隨訪，統(tǒng)計分析其與BLBC病理特征、生存預(yù)后的關(guān)系。TOPOⅡα、PS2的表達均依據(jù)二級計分法進行判斷[9]：(1)細胞數(shù)計數(shù)(CN)：<5%為0分，5%～<25%為1分，25%～<50%為2分，50%～75%為3分，>75%為4分；(2)染色深淺(RN)：無明顯染色為0分，染色呈黃色為1分，呈棕黃色為2分，棕褐色為3分；(3)陰陽性判定：CN+RN≥4分為陽性，<4分為陰性。新輔助化療療效評估[10]：依據(jù)WHO制訂的實體瘤療效評價標準進行評估，通過B超或X線片對乳腺部位腫瘤進行檢測，結(jié)果顯示未發(fā)現(xiàn)腫瘤、臨床癥狀基本消失為CR，乳房腫塊縮小高于50%、臨床癥狀明顯緩解為PR，乳房腫塊縮小但未高于50%或增大低于20%，臨床癥狀無變化為穩(wěn)定(SD)，乳房腫塊增大高于20%且臨床癥狀加重為進展(PD)，化療有效率=(CR+PR)/總例數(shù)×100%。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行分析，計數(shù)資料以率表示，比較采用χ2檢驗，多組資料之間對比采用F檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1新輔助化療前TOPOⅡα表達與BLBC患者化療療效的關(guān)系 化療后，TOPOⅡα陽性表達患者有效率為90.79%，陰性表達患者有效率為66.67%，前者明顯高于后者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 新輔助化療前TOPOⅡα表達與BLBC患者化療療效的關(guān)系(n)

2.2新輔助化療前PS2表達與BLBC患者化療療效的關(guān)系 化療后，PS2陽性表達患者有效率為87.97%，陰性表達患者有效率為70.97%，前者明顯高于后者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

2.3新輔助化療前后TOPOⅡα表達與BLBC患者化療療效的關(guān)系 化療后，TOPOⅡα表達由陽性轉(zhuǎn)陰性患者有效率最高，陽性不變患者次之，陰性不變患者低于陽性不變患者，由陰性轉(zhuǎn)陽性患者有效率最低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

2.4新輔助化療前后PS2表達與BLBC患者化療療效的關(guān)系 化療后，PS2表達由陽性轉(zhuǎn)陰性患者有效率最高，由陰性轉(zhuǎn)陽性患者有效率最低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；陽性不變患者與陰性不變患者有效率基本相同，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表4。

表2 新輔助化療前PS2表達與BLBC患者化療療效的關(guān)系(n)

表3 新輔助化療前后TOPOⅡα表達與BLBC患者化療療效的關(guān)系(n)

表4 新輔助化療前后PS2表達與BLBC患者化療療效的關(guān)系(n)

圖1 化療后5年內(nèi)組織中PS2陽性表達與陰性表達BLBC患者生存曲線

2.5化療后3年內(nèi)PS2、TOPOⅡα表達與BLBC患者生存情況的關(guān)系 在化療后5年內(nèi)，TOPOⅡα陽性表達BLBC患者總生存率為79.45%(58/73)，陰性表達患者總生存率為43.14%(22/51)，前者明顯高于后者；PS2陽性表達BLBC患者總生存率為78.57%(66/84)，陰性表達患者總生存率為35.00%(14/40)，前者明顯高于后者；差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見圖1、2。

圖2 化療后5年內(nèi)組織中TOPOⅡa陽性表達與陰性表達BLBC患者生存曲線

3 討 論

BLBC是較為常見的一種乳腺癌，主要臨床表現(xiàn)為乳腺無痛性腫塊，BLBC腫瘤細胞易發(fā)生病變組織松脫，形成轉(zhuǎn)移，嚴重影響患者的身心健康[11]。新輔助化療屬于一種全身性治療方式，通過應(yīng)用抗癌藥可有效調(diào)控癌細胞的生命活動，對癌細胞的增殖、分化具有較高的抑制作用[12]。因此，在乳腺切除術(shù)治療前進行新輔助化療，可有效提高對患者的治療效果，有助于提高患者的生存預(yù)后[13]。但臨床上采用新輔助化療的患者其療效具有較為明顯的差異，因此尋找具有指導(dǎo)意義的生物學(xué)指標是提高化療療效中重點關(guān)注的問題[14]。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，因子表達在新輔助化療療效及預(yù)后預(yù)測方面逐漸顯示出重要的臨床意義和價值，具有一定的化療方案指導(dǎo)作用[15]。

本研究通過檢測化療前后BLBC患者組織中TOPOⅡα、PS2表達情況，結(jié)果顯示：化療后，TOPOⅡα陽性表達患者有效率明顯高于陰性表達患者，PS2陽性表達患者有效率明顯高于陰性表達患者；TOPOⅡα表達由陽性轉(zhuǎn)陰性患者有效率最高，由陰性轉(zhuǎn)陽性患者有效率最低，PS2表達由陽性轉(zhuǎn)陰性患者有效率最高，由陰性轉(zhuǎn)陽性患者有效率最低；在化療后3年內(nèi)，PS2陽性表達BLBC患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率明顯高于陰性表達患者，TOPOⅡα陽性表達患者總生存率明顯高于陰性表達患者。研究發(fā)現(xiàn)，TOPOⅡα屬于機體中重要的一種核酶，由于直接參與DNA分子的修復(fù)、重組、轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的過程，同時作為細胞增殖中重要的因子，BLBC癌變可促進TOPOⅡα呈現(xiàn)出高表達，形成惡性循環(huán)，提高腫瘤的癌變程度；同時TOPOⅡα主要分布于細胞內(nèi)細胞核漿，且作為蒽環(huán)類抗癌藥物潛在的重要靶點，可有效與抗腫瘤藥物結(jié)合，使藥物更為準確、有效作用于腫瘤細胞，抑制腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移、增殖，故TOPOⅡα陽性表達患者在進行化療時，藥物可更為有效滅殺癌變細胞；同時在化療治療過程中，抗腫瘤藥物誘導(dǎo)了增殖的腫瘤細胞重新表達受體，使腫瘤細胞形成選擇性克隆，致使受體陽性或者陰性細胞選擇性存活，同時腫瘤細胞中多藥耐藥基因的擴增使其對藥物產(chǎn)生了耐藥性，因此TOPOⅡα表達由陽性轉(zhuǎn)陰性患者表明化療使大量的腫瘤細胞死亡，致使TOPOⅡα表達水平下降，而陰性轉(zhuǎn)陽性患者治療過程中使陰性腫瘤細胞選擇性存活，并發(fā)生異常的增殖，而TOPOⅡα作為細胞增殖的重要因子，可有效反映細胞增殖情況，故陰性轉(zhuǎn)陽性患者表現(xiàn)為TOPOⅡα高表達。此外，PS2作為雌激素誘導(dǎo)蛋白之一，可有效反映機體雌激素受體水平，間接反映機體內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能、狀態(tài)，在機體發(fā)病時，由于癌細胞的異常、快速增殖，可致細胞核大量的增生，破壞了機體內(nèi)分泌平衡，使PS2表達發(fā)生改變，因此PS2間接反映了BLBC癌變情況；因此，在化療過程中，PS2的表達水平可有效作為細胞增殖活性檢測的敏感和重要指標，PS2陽性表達提示機體對化療具有較高的敏感性，而治療后PS2陽性表達轉(zhuǎn)為陰性，提升腫瘤細胞減少，化療療效較好，而治療后PS2陰性表達轉(zhuǎn)為陽性，提示腫瘤細胞增多，化療療效較差。因此醫(yī)師在進行化療治療時，通過檢測組織中TOPOⅡα、PS2表達情況，有利于制訂針對性臨床治療方案，同時為指導(dǎo)BLBC的化療提供重要的參考指標，避免無效或過度治療對患者造成的不良影響，以提高對患者的治療效果和生存預(yù)后水平。此外，研究還發(fā)現(xiàn)由于通過檢測化療后組織中TOPOⅡα、PS2表達情況，可有效反映患者化療的療效，間接有效判斷患者手術(shù)治療后生存預(yù)后水平，有助于醫(yī)師對患者制訂更為合適的預(yù)后治療方案。

綜上所述，組織中TOPOⅡα、PS2可作為BLBC患者新輔助化療療效的重要指標，有助于醫(yī)師制定合適的治療、預(yù)后方案，避免無效或過度治療對患者造成不良的影響，值得臨床作進一步推廣。

[1]張子娟,鄭國沛,張志杰，等.干擾TGFβRⅠ增加乳腺癌細胞MDA-MB-231對化療藥物的敏感性[J].中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報,2014,30(6):584-590.

[2]張?zhí)?胡康,趙洪遠，等.乳腺癌 IDO 蛋白表達與新輔助化療療效相關(guān)性研究[J].中國婦幼保健,2014,29(18):2984-2986.

[3]孫建娜,駱瑞珍,孔令軍，等.自動乳腺全容積成像結(jié)合彩超評價乳腺癌新輔助化療療效的應(yīng)用分析[J].中國腫瘤臨床,2014,41(14):913-916.

[4]Guo JH,Xu BH,Ma F,et al.Efficacy and safety of trastuzumab plus different chemotherapy regimens in treatment of the patients with HER-2-positive advanced breast cancer[J].Chinese J Oncol,2014,36(5):372-376.

[5]袁松林,許勇,黃麗娓.新輔助化療中應(yīng)用多西他賽聯(lián)合順鉑治療對蒽環(huán)類耐藥的局部晚期乳腺癌的療效研究[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2014,24(19):66-68.

[6]張彥收,劉運江.乳腺癌組織中BCRP的表達與新輔助化療療效的關(guān)系[J].腫瘤防治研究,2014(5):434-438.

[7]陳偉財,何勁松,吳恢升，等.TCH與TAC新輔助化療在HER-2過表達乳腺癌中的療效觀察[J].中國腫瘤臨床,2014,41(6):373-376.

[8]Liu FL,Zhao FH,Wang JS,et al.Expression of CXCL12 and its receptor CXCR4 in breast carcinoma and their significance[J].Chinese J Diagnostic Pathol,2013,20(6):336-339.

[9]Wang J,Zheng RS.Clinical significance of ALDH1 and TGFp2 expression in breast cancer[J].Cancer Research on Prevention and Treatment,2013,40(11):1054-1058.

[10]朱寧生,邱惠,呂鋼，等.乳腺癌患者新輔助化療對雌激素受體表達的影響[J].重慶醫(yī)學(xué),2011,40(11):1044-1045.

[11]Zhang ZS,Li CY,Wang N,et al.Effect of expression of E-cadherin of RNA interference on chemosensitivity of pa-clitaxel in breast cancer cells[J].Maternal and Child Health Care of China,2014,29(7):1106-1108.

[12]桑果,王本忠.乳腺癌新輔助化療不同方案近期療效觀察及化療前后Ki-67的表達變化[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2011,46(11):1181-1184.

[13]Xiao G,Sun DL,Liu ZY,et al.Expression and the significance of XIAP and Smac in breast cancer tissues expressing different levels of CerbB-2 and ER[J].Modern Preventive Medicine,2013,40(22):4150-4152.

[14]張穎,郭楊,閻雪晶，等.TOPⅡ表達與乳腺癌新輔助化療療效的關(guān)系分析[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2011,40(5):462-464.

[15]Wang D,Liu QJ,Zhang XM,et al.Promoter hypermethylation of GATA5 and its impact on clinical outcome of invasive breast cancer[J].Basic Medical Sciences and Clinics,2014,34(6):753-756.

10.3969/j.issn.1671-8348.2015.20.029

貴州省科學(xué)技術(shù)基金項目(c030303)。

周恬(1981-)，主治醫(yī)師，碩士，主要從事乳腺腫瘤的研究。

R737.9

B

1671-8348(2015)20-2821-04

2015-01-16

2015-03-28)