血清高爾基體膜蛋白73在原發(fā)性肝癌早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值

李慶芝

(附屬菏澤市立醫(yī)院，山東菏澤274000)

血清高爾基體膜蛋白73在原發(fā)性肝癌早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值

李慶芝

(附屬菏澤市立醫(yī)院，山東菏澤274000)

目的探討原發(fā)性肝癌血清中高爾基體膜蛋白-73的表達(dá)水平及其早期診斷價(jià)值。方法選擇住院患者和健康體檢人群，分別用酶聯(lián)免疫吸附法和化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)63例原發(fā)性肝癌、56例肝硬化、87例慢性乙型肝炎、48例其他惡性腫瘤、58例健康對(duì)照組血清高爾基體膜蛋白-73與AFP水平，分析兩指標(biāo)各組間差別，繪制其診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線。結(jié)果高爾基體膜蛋白-73在不同年齡、性別、腫瘤大小間及不同AFP濃度的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，高爾基體膜蛋白-73、AFP在PHC鑒別診斷的ROC曲線下面積分別為0.808、0.758。高爾基體膜蛋白-73診斷PHC組敏感性及特異性分別為88.6%，92.1%，均顯著高于AFP。結(jié)論血清高爾基體膜蛋白-73對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值優(yōu)于AFP，有望成為原發(fā)性肝癌早期診斷的血清標(biāo)記物。

肝；腫瘤；肝癌/診斷；GP73/診斷應(yīng)用

原發(fā)性肝癌（PHC）是一種惡性程度高、進(jìn)展快、治療難度大、病死率高的惡性腫瘤，隨著影像技術(shù)的發(fā)展，使得部分小肝癌患者得以及時(shí)發(fā)現(xiàn)，但影像學(xué)檢查對(duì)肝內(nèi)小的惡性病變發(fā)現(xiàn)仍很困難，而腫瘤越小，手術(shù)效果越好。因此，早發(fā)現(xiàn)、早診斷對(duì)提高PHC患者的生存率非常重要，目前PHC所依賴的早期診斷手段臨床尚不滿意。在診斷PHC的血清標(biāo)志物中，AFP是最常用的指標(biāo)，但其陽(yáng)性率僅50%~ 60%，在小肝癌中陽(yáng)性率僅30%，且在部分良性肝病、妊娠期女性中也會(huì)增高，這使得AFP用于PHC預(yù)警和監(jiān)測(cè)帶來(lái)一定的限制。高爾基體膜蛋白-73（GP73）是近年新發(fā)現(xiàn)的存在于高爾基體的一種跨膜糖蛋白，其在正常人的肝組織中有所表達(dá)，近來(lái)國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)GP73在PHC患者血清和肝組織中表達(dá)顯著升高，提示其可作為一種新發(fā)現(xiàn)的早期診斷PHC的血清腫瘤標(biāo)志物[1]。為此，我們對(duì)GP73在正常人群組、肝炎組、肝硬化組、原發(fā)性肝癌患者及其他惡性腫瘤患者血清中的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，判斷其作為PHC診斷標(biāo)志物的敏感性與特異性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料收集2012年10月-2014年10月我院住院、門診患者和健康查體人群，分為5組，分別為原發(fā)性肝癌組（PHC）63例，男50例、女13例，年齡40~76歲，平均51歲；乙肝后肝硬化組56例，男38例、女18例，年齡21~68歲，平均52歲；乙型病毒性肝炎組：87例，男58例、女29例，年齡20~68歲，平均40歲；其他惡性腫瘤組48例（胃癌20例、胰腺癌8例、食管癌10例、結(jié)腸癌3例、膽囊癌2例、直腸癌3例、十二指腸癌2例），男35例、女15例，年齡21~ 85歲，平均63歲。健康對(duì)照組58例，男30例、女28例，年齡20~70歲，平均36歲。

1.2 方法GP73測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法檢測(cè)；AFP測(cè)定采用電化學(xué)發(fā)光法，儀器為瑞士羅氏公司Cobas6000全自動(dòng)生化免疫分析儀，試劑盒為儀器配套試劑。據(jù)實(shí)體或影像學(xué)檢查測(cè)量腫瘤病灶的大小，將原發(fā)性肝癌患者分為瘤體≥5 cm及<5 cm兩組。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理SPSS17.0，所獲數(shù)據(jù)采用方差分析和秩和檢驗(yàn)。方差不齊的使用秩和檢驗(yàn)，設(shè)定P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)對(duì)GP73和AFP在原發(fā)性肝癌的診斷進(jìn)行ROC曲線分析，確定診斷PHC的臨界值。GP73的參考值為0～150μg/L，當(dāng)≥150μg/ L時(shí)為陽(yáng)性；AFP參考值為0~200μg/L，當(dāng)≥200μg/ L時(shí)為診斷PHC臨界值。

2 結(jié)果

2.1 原發(fā)性肝癌組不同年齡、性別、腫瘤大小及AFP濃度的水平原發(fā)性肝癌組＞55歲患者45例，血清GP73水平為454.045±114.852μg/L；≤55歲患者18例，血清GP73水平為423.260±98.615μg/L。男性患者50例，血清GP73水平為438.840±99.313μg/ L；女性患者13例，血清GP73水平為436.375± 122.616μg/L。原發(fā)性肝癌組患者中，腫瘤直徑＞5 cm的39例，血清GP73水平為439.833±109.108μ g/L；腫瘤直徑≤5 cm的24例，血清GP73水平為414.061±88.251μg/L。甲胎蛋白濃度＞200μg/L的患者36例，血清GP73水平為448.045±104.832 μg/L；甲胎蛋白濃度≤200μg/L的患者27例，血清GP73水平為423.260±95.625μg/L。63例肝臟腫瘤患者中，不同年齡、性別、腫瘤大小及不同AFP濃度的患者血清GP73水平進(jìn)行比較，差異無(wú)顯著性，P> 0.05。

2.2 各組待檢血清GP73和AFP的表達(dá)水平見(jiàn)表1。各組血清GP73和AFP水平比較所有患者血清均可測(cè)出GP73、AFP，原發(fā)性肝癌患者血清GP73、AFP水平均顯著高于其他各組人群，P<0.05。

表1 各組GP73和AFP測(cè)定值比較(μg/L)

2.3 血清GP73和AFP的ROC曲線分析應(yīng)用ROC曲線分析GP73和AFP鑒別診斷PHC的效能。GP73曲線下面積為0.808(95%可信區(qū)間：0.761～0.854)，AFP的曲線下面積為0.758(95%可信區(qū)間：0.706~ 0.809)。根據(jù)ROC曲線以及“敏感度+特異度”取最大值的原則，確立GP73用于診斷PHC的臨界值為150 μg/L，AFP用于診斷PHC的臨界值為200μg/L。

2.4 血清GP73和AFP檢測(cè)對(duì)原發(fā)性肝癌診斷中的靈敏度、特異度及陽(yáng)性率AFP診斷PHC敏感性為65.3%、特異性為61.2%及陽(yáng)性率為60.6%，而GP73診斷的敏感性為88.6%及特異性為92.1%及陽(yáng)性率為90.6%。GP73的敏感性、特異性及陽(yáng)性率均高于AFP，P<0.05。

3 討論

原發(fā)性肝癌是一種惡性程度高，病程進(jìn)展快，死亡率很高的惡性腫瘤。早期發(fā)現(xiàn)并有效治療可以大大提高患者的生活質(zhì)量和生存期。血清中甲胎蛋白(alpha-fetop rotein，AFP)作為肝癌的診斷及療效隨訪觀察指標(biāo)已應(yīng)用30多年，特別是屬于肝癌高危監(jiān)測(cè)人群的慢性肝炎、肝硬化患者，鑒于血清AFP檢測(cè)診斷PHC的敏感度和特異度都存在一定的局限性，所以臨床急切需要敏感的PHC標(biāo)記物用來(lái)診斷早期階段肝癌。GP73是存在于高爾基體的一種跨膜糖蛋白，是在研究成人巨細(xì)胞性肝炎病原學(xué)時(shí)發(fā)現(xiàn)的[2],并于2000年首先描述了在正常的人體肝組織中，GP73主要由膽管上皮細(xì)胞表達(dá)，而肝細(xì)胞表達(dá)很少或不表達(dá)，但當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，患者血清GP73水平顯著上調(diào)。通過(guò)對(duì)352例血清標(biāo)本行蛋白質(zhì)印跡技術(shù)分析，證實(shí)PHC患者血清GP73水平顯著高于肝硬化者，其早期發(fā)現(xiàn)PHC的敏感度較AFP顯著升高[3]。國(guó)內(nèi)多項(xiàng)研究亦證實(shí)血清GP73的監(jiān)測(cè)有助于早期診斷PHC[4-6]。認(rèn)為GP73可能成為臨床上一個(gè)新的、比AFP更有效的PHC早期診斷的腫瘤標(biāo)志物[7]。本研究則通過(guò)檢測(cè)原發(fā)性肝癌、肝炎后肝硬化、慢性乙型肝炎、其他惡性腫瘤及健康對(duì)照者血清中GP73、AFP水平，結(jié)果提示PHC患者血清GP73及AFP水平顯著高于其他各組，所有患者血清中均有GP73表達(dá)，在不同年齡、性別、腫瘤大小及不同AFP濃度間，GP73的表達(dá)水平差異無(wú)顯著性，本研究應(yīng)用ROC曲線客觀地評(píng)價(jià)了GP73診斷肝癌的準(zhǔn)確性，將它用于肝癌的診斷時(shí)，其靈敏度、特異度均優(yōu)于AFP，尤其在AFP陰性的肝癌患者中有較高的檢出率，提示血清GP73對(duì)PHC具有較高的診斷價(jià)值,應(yīng)用ELISA法檢測(cè)血清GP73具有方便、重復(fù)性好、易操作等優(yōu)點(diǎn)，盡管GP73的生理功能還不清楚，其升高的具體機(jī)制和分泌途徑也尚未完全研究透徹，但已經(jīng)顯示出比傳統(tǒng)的AFP更好的應(yīng)用價(jià)值。

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The Clinical Va lue o f Serum Go lgi p ro tei73 in M ak ing Early D iagnosis of Prim ary Hepatoce llu lar Carcinom a

LiQingzhi
(Heze Muninal Hospital Affiliated to Heze Medical College,Heze 274000,Shandong)

ObjectiveTo investigate theexpression levelof serum Golgiprotein 73（GP73）in patientsw ith prima?ry hepatocellular carcinoma（HCC）and to discuss its clinical value in making early diagnosis.MethodsAmong w ards, out-patients and healthy check people in our hospital from October 2012 to October 2014,63 HCC,56 hepatic cirrhosis, 87 HBV carriers，48 other Malignant Tumor,and 58 healthy control people were involved in the study.GP73 in serum wasmeasured by ELISA and AFPwasmeasured by ADVIA Centaur XP Immunoassay System.The sensitivity,specifica?tionwere calculated.ResultsThe serum levelsof GP73 in differentages,gender,tumor sizesand concentriationsof AFP was not significantly different.The area of AFP,GP73 under the ROC curve in the differential diagnosis of PHC were 0.758,0.808.The sensitivity and specificity value of GP73 were 88.6%and 92.1%,higher than those of AFP.Conc lu?sion In diagnosing HCC，the expression level of serum GP73 is superior to AFP.It is hopeful that serum GP73may be proved to be an early serum tumormarker for HCC.

Liver;Tumor;Liver cancer/diagnosis;Golgiprotein-73/diagnostic use

R735.7

A

1008-4118（2015）02-0032-03

10.3969/j.issn.1008-4118.2015.02.012

2015-03-15