生物鐘與消化系統(tǒng)疾病

肖文琴，殷國(guó)建，王興鵬，萬(wàn) 榮

1.上海市第十人民醫(yī)院消化內(nèi)科，上海200072;2.蘇州大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院消化內(nèi)科;3.上海市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科

晝夜節(jié)律是自然界中從簡(jiǎn)單的單細(xì)胞生物到各種動(dòng)物直至復(fù)雜的人類(lèi)最普遍存在的一種自然現(xiàn)象。它的存在使生物體的生理、生化、行為等生命現(xiàn)象表現(xiàn)為以近似24 h 為周期的振蕩，是機(jī)體為了更好地適應(yīng)環(huán)境，在進(jìn)化過(guò)程中自然選擇作用下獲得的。晝夜節(jié)律發(fā)生的物質(zhì)基礎(chǔ)是分子計(jì)時(shí)器，即生物鐘(circadian clock)。它是身體內(nèi)部的時(shí)鐘，通過(guò)控制能量、生長(zhǎng)、情緒和衰老來(lái)調(diào)節(jié)器官和活動(dòng)以及休息的周期?，F(xiàn)代生活方式的改變使得晝夜節(jié)律被打亂，這種晝夜節(jié)律的功能障礙被認(rèn)為是造成許多臨床癥狀包括睡眠障礙、代謝綜合征、感染、消化性潰瘍、炎癥性腸病、腸易激綜合征等胃腸道疾病，甚至癌癥發(fā)生的一個(gè)重要促進(jìn)因素。下面就生物鐘的分子機(jī)制、調(diào)節(jié)和在消化系統(tǒng)疾病中的作用作一概述。

1 生物鐘的分子機(jī)制

生物鐘系統(tǒng)很復(fù)雜，其內(nèi)源性機(jī)制主要由以下三個(gè)部分組成:一是以下丘腦的視交叉上核(suprachiasmatic nucleus，SCN)為核心的節(jié)律起搏器，二是以光信號(hào)感受系統(tǒng)為代表的環(huán)境同步信號(hào)輸入系統(tǒng)，三是協(xié)調(diào)全身節(jié)律性活動(dòng)的輸出系統(tǒng)。機(jī)體表現(xiàn)為自由運(yùn)行的晝夜節(jié)律，且這種自由節(jié)律是內(nèi)在固有的，具有內(nèi)源性特征，即當(dāng)外界環(huán)境的節(jié)律信號(hào)消失時(shí)，機(jī)體自身的晝夜節(jié)律仍然存在。一般它的周期不正好是24 h，而是近似24 h，生物節(jié)律系統(tǒng)能夠接受外界環(huán)境的信號(hào)，通過(guò)時(shí)相重置效應(yīng)，調(diào)整內(nèi)源性的生物節(jié)律，使之適應(yīng)外界環(huán)境的變化。

晝夜節(jié)律發(fā)生的物質(zhì)基礎(chǔ)是分子計(jì)時(shí)器，即生物鐘。它由一組核心元件組成，包括Clock、Bmal1、Pers、Crys、Tim 等基因及其編碼的蛋白質(zhì)產(chǎn)物。在高等的多細(xì)胞生物中，生物鐘可以分為中樞鐘(母鐘)和外周生物鐘(子鐘)。哺乳動(dòng)物的母鐘已經(jīng)被定位于SCN［1-3］，它控制著機(jī)體的行為和生理節(jié)律，包括運(yùn)動(dòng)、睡眠、體溫和激素分泌等全身節(jié)律活動(dòng)［4］;子鐘位于外周組織(如肝臟、腎臟、心臟等)細(xì)胞內(nèi)，調(diào)控效應(yīng)器的節(jié)律。

生物節(jié)律的自律振蕩系統(tǒng)由多個(gè)負(fù)反饋環(huán)組成，在晝夜振蕩反饋回路中，正性成分啟動(dòng)生物鐘基因，使之進(jìn)行表達(dá)，包括Clock/Bmal1 等蛋白因子;負(fù)性成分阻斷正性成分的作用，使表達(dá)減弱或停止［5］，包括CRY、PER 等蛋白因子。其中有兩個(gè)環(huán)路是最主要的:(1)轉(zhuǎn)錄因子Clock 和Bmal1 通過(guò)堿性螺旋-環(huán)-螺旋-PAS(bHLH-PAS)結(jié)構(gòu)域形成異二聚體［6］，結(jié)合到節(jié)律基因Per1、Per2、Per3 和Cry1、Cry2 上游啟動(dòng)子的E 盒序列，從而激活基因轉(zhuǎn)錄［7］，其表達(dá)產(chǎn)物PER 和CRY 系列蛋白從胞漿轉(zhuǎn)移至核內(nèi)，而且作為負(fù)反饋系統(tǒng)的負(fù)性元件，與Clock 和/或Bmal1 直接作用，抑制Clock-Bmal1 的活性，從而抑制Per1、Per2、Per3 和Cry1、Cry2 的轉(zhuǎn)錄［8］;(2)Clock 和Bmal1 異二聚體在激活Per 和Cry 系列基因轉(zhuǎn)錄的同時(shí)，也激活孤兒核受體Rev-Erbα 基因轉(zhuǎn)錄，其表達(dá)蛋白R(shí)EV-ERBα 可與Bmal1 啟動(dòng)子結(jié)合，阻遏Bmal1 的轉(zhuǎn)錄(見(jiàn)圖1)。由于基因轉(zhuǎn)錄和蛋白入核需一定時(shí)間，使生物節(jié)律分子振蕩的周期正好維持在24 h 左右。這種分子振蕩不但使許多節(jié)律基因如Per1、Per2、Per3 和Cry1、Cry2等的表達(dá)呈生物節(jié)律性，而且使Clock 和Bmal1 異二聚體的轉(zhuǎn)錄活性也具有生物節(jié)律的特征?？偟膩?lái)說(shuō)，反饋環(huán)之間相互聯(lián)系，通過(guò)24 h 周期結(jié)構(gòu)來(lái)相互控制，且能被光和其他環(huán)境因素重置［9］。

圖1 生物鐘負(fù)反饋調(diào)控機(jī)制Fig 1 The feedback regulation of circadian clock system

2 生物鐘的調(diào)節(jié)

SCN 自身節(jié)律具有內(nèi)源性的遺傳基礎(chǔ)，同時(shí)又受到光信號(hào)以及一些化學(xué)物質(zhì)的影響［10］。外界環(huán)境光-暗變化投射于視網(wǎng)膜上，再由視網(wǎng)膜光感神經(jīng)節(jié)細(xì)胞將信息通過(guò)視網(wǎng)膜下丘腦束傳遞至SCN 腹外側(cè)部，SCN 由大量單細(xì)胞生物鐘組成，它們的同步運(yùn)行時(shí)間可產(chǎn)生協(xié)調(diào)的晝夜節(jié)律輸出信號(hào)，切除后可導(dǎo)致晝夜節(jié)律的消失。SCN 同時(shí)存在許多的鐘控基因，也受到反饋環(huán)路的調(diào)控，可周期性的產(chǎn)生神經(jīng)肽，并可通過(guò)神經(jīng)元間信息傳遞體液途徑將信息輸布于全身［11］。母鐘對(duì)光-暗變化反應(yīng)比較敏感，許多非光因子并不影響母鐘的基因表達(dá)。子鐘的調(diào)節(jié)，則是外源光信號(hào)的強(qiáng)弱變化通過(guò)視網(wǎng)膜-SCN-松果體之間的相互聯(lián)系形成一個(gè)統(tǒng)一協(xié)調(diào)的晝夜節(jié)律振蕩系統(tǒng)，它對(duì)光-暗反應(yīng)不甚敏感，而對(duì)食物信號(hào)的反應(yīng)比較強(qiáng)烈。正常情況下，母鐘可以通過(guò)各種神經(jīng)信號(hào)和體液信號(hào)控制子鐘，使兩者的時(shí)相與外周環(huán)境保持同步，即母鐘與子鐘是偶聯(lián)的。當(dāng)然，子鐘也可以與母鐘解偶聯(lián)，例如在肝臟和胃中，食物的攝入就可以調(diào)節(jié)它們振蕩子的節(jié)律。因此外周生物鐘顯示出了一定的獨(dú)立性，但不同的是:在體外培養(yǎng)的外周器官和(或)組織的生物鐘基因的表達(dá)在幾天后就下調(diào)了;在體外培養(yǎng)的SCN 組織卻不同，它可以長(zhǎng)期維持生物鐘的持續(xù)表達(dá)。目前的研究對(duì)這一表達(dá)的差異沒(méi)有得到明確的機(jī)制［12］，同時(shí)這也為我們將來(lái)在外周器官和組織的生物鐘表達(dá)的研究提出了更多的急需解決的難題，當(dāng)然也為臨床上疾病的診斷、治療、預(yù)后等方面提供了很好的研究方向和平臺(tái)。

在幾乎所有的哺乳動(dòng)物中觀察到，哺乳動(dòng)物的子鐘對(duì)光-暗變化不敏感，而更容易受到食物信號(hào)的影響，這些動(dòng)物在預(yù)期提供食物的時(shí)候出現(xiàn)了中樞神經(jīng)系統(tǒng)的覺(jué)醒-活動(dòng)節(jié)律的波動(dòng)，即稱(chēng)為食物預(yù)期行為，這種行為依賴(lài)于內(nèi)源性晝夜節(jié)律定時(shí)系統(tǒng)，稱(chēng)為FEO(food entrainable oscillators)，F(xiàn)EO 的激活先于進(jìn)食時(shí)間，它可促進(jìn)進(jìn)食行為［13］。泌酸腺細(xì)胞同時(shí)表達(dá)ghrelin(胃饑餓素，一種可促進(jìn)食欲的肽)和晝夜節(jié)律蛋白(例如Per1 和Per2)，隨意進(jìn)食的時(shí)候，Per1 和Per2以及Ghrelin 的表達(dá)在光-暗周期中呈節(jié)律性，但在黑暗中卻保持不變;在無(wú)Per1 和Per2 的情況下，Ghrelin不再呈節(jié)律性表達(dá)。由此可以表明:食物的調(diào)節(jié)與生物鐘密不可分。

褪黑素是SCN 通過(guò)交感神經(jīng)系統(tǒng)控制合成并由松果體產(chǎn)生的一種調(diào)節(jié)睡眠-覺(jué)醒周期的激素，它廣泛存在于自然界中，且在光-暗循環(huán)的黑暗條件下的分泌達(dá)到高峰，通常也被稱(chēng)為“黑暗荷爾蒙”，通過(guò)觀察得知:褪黑素在血漿濃度中存在晝夜節(jié)律。也有研究表明褪黑素不僅在重新同步母鐘和子鐘中起著重要的作用，而且具有強(qiáng)烈的抗氧化作用［14］。這同樣說(shuō)明了生物鐘調(diào)節(jié)對(duì)人類(lèi)的重要性，也為疾病治療，包括給藥時(shí)間、延緩衰老、抑制癌癥等方面提供了很好的研究前景。

3 生物鐘與消化系統(tǒng)疾病

近年來(lái)的研究表明晝夜節(jié)律系統(tǒng)的破壞對(duì)于很多的病理狀態(tài)都是一個(gè)重要的促進(jìn)因素，包括:睡眠障礙、胃腸道和肝臟疾病、代謝綜合征，甚至是癌癥。已有證據(jù)表明生物鐘的慢性破壞影響的是腦-腸軸，它會(huì)促成一些胃腸道疾病的發(fā)生，包括胃食管反流病(GERD)、消化不良、消化性潰瘍、炎癥性腸病(IBD)、腸易激綜合征(IBS)、非酒精性脂肪肝和其他一些功能性疾病，甚至是胃腸道腫瘤(結(jié)直腸癌)等［15］。這幾年也有相關(guān)報(bào)道表明了生物鐘紊亂對(duì)肝硬化和胰腺癌等相關(guān)消化系統(tǒng)疾病的作用。

3.1 生物鐘與胃腸道功能性疾病關(guān)系 晝夜節(jié)律的振蕩系統(tǒng)會(huì)影響胃腸道的動(dòng)力、屏障的維持和更換、免疫力和消化酶的產(chǎn)生等方面。通過(guò)分析表明:倒班工作和跨時(shí)區(qū)的飛行導(dǎo)致的晝夜節(jié)律改變引起了腹痛、便秘或腹瀉的胃腸道癥狀，而所有這些癥狀與腸功能紊亂(IBS、消化性不良)的患者所具有的癥狀相似。

Knutsson 等［16］分析了倒班工作導(dǎo)致的晝夜節(jié)律慢性破壞與胃腸道功能障礙的流行病學(xué)關(guān)聯(lián)，說(shuō)明了倒班工作人員發(fā)生胃腸道癥狀的危險(xiǎn)增加，但是并不是所有的研究都認(rèn)可這種關(guān)聯(lián)性。所以是否真正存在這種關(guān)聯(lián)還需更多的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)一步闡明。

Nojkov 等［17］調(diào)查了從事護(hù)理工作的399 名護(hù)士(214 名白班輪換、110 名夜班輪換和75 名日-夜倒班輪換)，研究結(jié)果表明:日- 夜倒班輪換工作的護(hù)士IBS 的發(fā)生率明顯高于其他兩種，特別是對(duì)腹痛的影響，而且所發(fā)生的腹痛與睡眠質(zhì)量無(wú)關(guān)。由此說(shuō)明:晝夜節(jié)律的紊亂可能在IBS 和腹痛的發(fā)病機(jī)理中發(fā)揮著重要作用。

Thor 等［18］研究表明褪黑素對(duì)致敏的或者發(fā)炎的腸道神經(jīng)系統(tǒng)有許多積極的影響，它可能被作為一個(gè)治療IBS 的候選藥物。在動(dòng)物研究中證明了褪黑素對(duì)胃腸道運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用;在臨床上也有充分的證據(jù)表明褪黑素對(duì)胃腸道運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用，而且許多人都研究和證實(shí)了褪黑素對(duì)IBS 患者有益。Lu 等［19］證明口服褪黑素對(duì)改善女性IBS 患者癥狀有效，其作用在于減輕腹痛、腹脹和排便期間的腹部不適感。

Swanson 等［20］研究表明晝夜節(jié)律的改變導(dǎo)致具有結(jié)腸炎的動(dòng)物模型的情況明顯惡化，同時(shí)對(duì)人類(lèi)的研究也初步表明IBD 使得睡眠模式(生物鐘)改變的風(fēng)險(xiǎn)增加。

3.2 生物鐘與胃腸道黏膜和胃酸分泌的關(guān)系 腸道晝夜節(jié)律生物鐘的改變可能對(duì)胃腸道黏膜的完整性有影響。Brzozowska 等［21］指出晝夜節(jié)律振蕩系統(tǒng)的破壞對(duì)腸道黏膜保護(hù)和細(xì)胞增殖有直接或間接的影響。Pietroiusti 等［22］的研究顯示:相對(duì)于白班輪換工作的人群，倒班工作人群更易發(fā)生十二指腸潰瘍。這一現(xiàn)象發(fā)生的主要原因是倒班工作人員夜間褪黑素合成的減少，因?yàn)橥屎谒卦趯?duì)胃的保護(hù)中起核心作用，它的不足是消化性潰瘍發(fā)生的一個(gè)重要的促進(jìn)因子［23］。Konturek 等［24］的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明褪黑素和它的前體對(duì)胃潰瘍形成具有強(qiáng)大的愈合作用。Ceranowicz 等［25］也指出:除褪黑素之外，Ghrelin 也可促進(jìn)大鼠胃/十二指腸潰瘍的愈合。

晝夜節(jié)律同樣能影響胃酸的分泌，近些年來(lái)，許多學(xué)者在動(dòng)物研究的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn):促膽囊收縮素、胃腸肽、促胃液素等參與胃酸分泌調(diào)節(jié)的下丘腦肽類(lèi)物質(zhì)均在夜間活動(dòng)期的晝夜節(jié)律周期中呈現(xiàn)高峰時(shí)相［26］。

GERD 是與胃酸分泌過(guò)多有關(guān)的最常見(jiàn)疾病之一，GERD 患者訴有頻繁的夜間反流癥狀，而且Dean等［27］也指出這種夜間的GERD 可由于疼痛和睡眠障礙嚴(yán)重影響生活質(zhì)量，從而干擾第二天的精神和機(jī)體功能。至今為止，GERD 導(dǎo)致夜間反流癥狀的具體機(jī)制還未明確闡述，這為將來(lái)在這方面的研究提出了挑戰(zhàn)。

3.3 生物鐘與癌癥的關(guān)系 晝夜節(jié)律系統(tǒng)的破壞對(duì)腫瘤的發(fā)生也有重要的影響。根據(jù)大量關(guān)于夜間持續(xù)光暴露的致癌性的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究以及人類(lèi)少量樣本的研究，國(guó)際癌癥研究機(jī)最近發(fā)布了“輪班工作導(dǎo)致的生理節(jié)律紊亂對(duì)于人類(lèi)來(lái)說(shuō)可能是致癌因素”的推論［28］。有研究證明分子鐘機(jī)制和一些致癌作用如血管發(fā)生、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡和DNA 修復(fù)等有關(guān)，這些致癌作用可能受晝夜節(jié)律系統(tǒng)的控制［29］。

生物鐘基因可能通過(guò)影響其自身蛋白質(zhì)的翻譯過(guò)程參與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。在人類(lèi)大腸癌組織中發(fā)現(xiàn)hPer2 基因和蛋白的表達(dá)被抑制，且hPer 的表達(dá)在結(jié)直腸癌的發(fā)生、進(jìn)展和轉(zhuǎn)移中可能失調(diào)［30］。生物鐘基因也可能通過(guò)其他蛋白質(zhì)的翻譯過(guò)程參與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。Zub-Pokrowiecka 等［31］的研究表明:在健康研究對(duì)象中禁食和進(jìn)餐后的Ghrelin 和促胃液素的血漿水平呈負(fù)相關(guān)，但是進(jìn)行全胃或胃大部切除后的胃癌患者進(jìn)食后血漿Ghrelin 水平不再表現(xiàn)出有意義的增長(zhǎng)，而是表現(xiàn)出禁食和進(jìn)餐后的高促胃液素水平。此研究說(shuō)明在行胃切除術(shù)后的早期胃癌患者中，血漿Ghrelin 和促胃液素水平的反饋關(guān)系不再存在，同時(shí)也說(shuō)明胃癌患者的晝夜節(jié)律生物鐘被打亂。

Oda 等［32］研究證明mPer2(mouse PER2)基因與hPer2(human PER2)基因是同源的，mPer2 基因的高效表達(dá)在抑制小鼠腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的方面起了非常重要的作用。將mPer2 基因轉(zhuǎn)導(dǎo)入人類(lèi)的癌細(xì)胞中，觀察到mPer2 基因同樣在人類(lèi)胰腺癌細(xì)胞中發(fā)揮重要功能，即mPer2 基因與hPer2 基因一樣，在人類(lèi)體內(nèi)表達(dá)了mPER2 蛋白和激活了Bmal1 基因和Clock 基因的轉(zhuǎn)錄。由此說(shuō)明mPer2 生物鐘基因在治療胰腺癌方面具有重要的意義，但具體機(jī)制仍需更多的實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步闡明。

Yu 等［33］研究表明Bmal1 基因在調(diào)節(jié)細(xì)胞活動(dòng)中起著重要的作用，它表達(dá)的紊亂(即節(jié)律的破壞)可能導(dǎo)致異常的細(xì)胞增長(zhǎng)，甚至造成癌癥的發(fā)生;Cry 基因表達(dá)的下調(diào)或功能的阻斷可能在治療某些癌癥方面有著重要的作用。

隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，對(duì)生物鐘的研究也越來(lái)越深入，但是由于其分子機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜，完全闡明其調(diào)控機(jī)制還有待于更進(jìn)一步的研究，而且生物鐘對(duì)全身各系統(tǒng)的功能都會(huì)產(chǎn)生影響，但是其影響方式及途徑尚不十分清楚?，F(xiàn)代生活方式的轉(zhuǎn)變和節(jié)奏的加快，使得胃腸道功能性疾病及肝臟疾病和癌癥等相關(guān)消化系統(tǒng)疾病的發(fā)生率明顯增加。許多行業(yè)(如護(hù)士和航空人員)不可避免的需要倒班工作，那么如何使得這些人群保持生物鐘的正常調(diào)節(jié)呢?如何利用生物鐘調(diào)節(jié)GERD 患者夜間反流的癥狀?如何利用生物鐘基因在癌癥等方面發(fā)揮治療意義?這些急需解決的問(wèn)題促使我們要加快在這些方面專(zhuān)研的腳步，未來(lái)的研究應(yīng)集中于生物鐘基因在消化系統(tǒng)疾病中病理生理方面的具體機(jī)制的闡述，以及晝夜節(jié)律調(diào)節(jié)在消化系統(tǒng)疾病診治中的實(shí)際臨床應(yīng)用。

［1］ Caldelas I，Poirel VJ，Sicard B，et al. Circadian profile and photic regulation of clock genes in the suprachiasmatic nucleus of a diurnal mammal Arvicanthis ansorgei ［J］. Neuroscience，2003，116(2):583-591.

［2］ Honma S，Kawamoto T，Takagi Y，et al. Dec1 and Dec2 are regulators of the mammalian molecular clock［J］. Nature，2002，419(6909):841-844.

［3］ Wang GQ，Tong J. Advances in study on molecular mechanism of circadian clock in pineal gland［J］. Progress in Physiological Sciences，2004，35(3):210-214.王國(guó)卿，童建. 松果體晝夜節(jié)律生物鐘分子機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.生理科學(xué)進(jìn)展，2004，35(3):210-214.

［4］ Wang YH，Wen YL，Qi SRN，et al. Biologial clock gene model in mammals and its research development［J］. Sichuan Journal of Physiological Sciences，2006，28(1):33-35.王艷紅，文勇立，齊莎日娜，等. 哺乳動(dòng)物生物鐘模型及研究進(jìn)展［J］.四川生理科學(xué)雜志，2006，28(1):33-35.

［5］ Hou BK，Yu HM. Recent developments in molecular mechanisms of biological clock［J］. Hereditas (Beijing)，1996，18(4):42-44.侯丙凱，于惠敏. 生物鐘的分子機(jī)制研究進(jìn)展［J］. 遺傳，1996，18(4):42-44.

［6］ Bunger MK，Wilsbacher LD，Moran SM，et al. Mop3 is an essential component of the master circadian pacemaker in mammals［J］. Cell，2000，103(7):1009-1017.

［7］ Gekakis N，Staknis D，Nguyen HB，et al. Role of the CLOCK protein in the mammalian circadian mechanism ［J］. Science，1998，280(5369):1564-1569.

［8］ Li JC，Yu D，Wang F，et al. Advances in studies of biological clock gene［J］. Hereditas (Beijing)，2004，26(1):89-96.李經(jīng)才，于多，王芳，等. 生物鐘基因研究新進(jìn)展［J］. 遺傳，2004，26(1):89-96.

［9］ Ni YH，Wu T，Wang L，et al. Advances in interactions between glucocorticoid hormones and circadian gene expression ［J］. Hereditas(Beijing)，2008，30(2):135-141.倪銀華，吳濤，王露，等. 腎上腺糖皮質(zhì)激素與生物鐘基因表達(dá)調(diào)控的相關(guān)研究進(jìn)展［J］. 遺傳，2008，30(2):135-141.

［10］ Starkey SJ. Melatonin and 5-hydroxytryptamine phase-advance the rat circadian clock by activation of nitric oxide synthesis［J］. Neurosci Lett，1996，211(3):199-202.

［11］ Bao NR，Yu YQ，Zhang HP. The molecular mechanisms of circadian biological clock［J］. Foreign Medical Sciences·Section of Pathophysiology and Clinical Medicine，2003，23(4):416-418.包娜仁，于艷秋，張海鵬. 晝夜節(jié)律性生物鐘的分子調(diào)節(jié)機(jī)制［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè))，2003，23(4):416-418.

［12］ Yagita K，Tamanini F，van Der Horst GT，et al. Molecular mechanisms of the biological clock in cultured fibroblasts ［J］. Science，2001，292(5515):278-281.

［13］ Mistlberger RE. Circadian food-anticipatory activity:formal models and physiological mechanisms［J］. Neurosci Biobehav Rev，1994，18(2):171-195.

［14］ Abbas A，Raju J，Milles J，et al. A circadian rhythm sleep disorder:melatonin resets the biological clock［J］. J R Coll Physicians Edinb，2010，40(4):311-313.

［15］ Hoogerwerf WA. Role of biological rhythms in gastrointestinal health and disease ［J］. Rev Endocr Metab Disord，2009，10 (4):293-300.

［16］ Knutsson A，Bφggild H. Gastrointestinal disorders among shift workers［J］. Scand J Work Environ Health，2010，36(2):85-95.

［17］ Nojkov B，Rubenstein JH，Chey WD，et al. The impact of rotating shift work on the prevalence of irritable bowel syndrome in nurses［J］.Am J Gastroenterol，2010，105(4):842-847.

［18］ Thor PJ，Krolczyk G，Gil K，et al. Melatonin and serotonin effects on gastrointestinal motility［J］. J Physiol Pharmacol，2007，58 Suppl 6:97-103.

［19］ Lu WZ，Gwee KA，Moochhalla S，et al. Melatonin improves bowel symptoms in female patients with irritable bowel syndrome:a doubleblind placebo-controlled study［J］. Aliment Pharmacol Ther，2005，22(10):927-934.

［20］ Swanson GR，Burgess HJ，Keshavarzian A. Sleep disturbances and inflammatory bowel disease:a potential trigger for disease flare?［J］.Expert Rev Clin Immunol，2011，7(1):29-36.

［21］ Brzozowska I，Ptak-Belowska A，Pawlik M，et al. Mucosal strengthening activity of central and peripheral melatonin in the mechanism of gastric defense［J］. J Physiol Pharmacol，2009，60 Suppl 7:47-56.

［22］ Pietroiusti A，F(xiàn)orlini A，Magrini A，et al. Shift work increases the frequency of duodenal ulcer in H.pylori infected workers［J］. Occup Environ Med，2006，63(11):773-775.

［23］ Konturek SJ，Konturek PC，Brzozowski T，et al. Role of melatonin in upper gastrointestinal tract［J］. J Physiol Pharmacol，2007，58 Suppl 6:23-52.

［24］ Konturek PC，Konturek SJ，Burnat G，et al. Dynamic physiological and molecular changes in gastric ulcer healing achieved by melatonin and its precursor L-tryptophan in rats［J］. J Pineal Res，2008，45(2):180-190.

［25］ Ceranowicz P，Warzecha Z，Dembinski A，et al. Treatment with ghrelin accelerates the healing of acetic acid-induced gastrin and duodenal ulcers in rats［J］. J Physiol Pharmacol，2009，60(1):87-98.

［26］ Tian AH. Relationship between the clock gene and gastrointestinal tract［J］. Journal of New Medicine，2012，22(3):193-195.田愛(ài)花.生物鐘基因與胃腸道的關(guān)系［J］. 醫(yī)學(xué)新知雜志，2012，22(3):193-195.

［27］ Dean BB，Aguilar D，Johnson LF，et al. The relationship between the prevalence of nighttime gastroesophageal reflux disease and disease severity［J］. Dig Dis Sci，2010，55(4):952-959.

［28］ Kantermann T，Roenneberg T. Is night-at-light a health risk factor or a health risk predictor?［J］. Chronobiol Int，2009，26 (6):1069-1074.

［29］ Qandeel HG，Alonso F，Hernandez DJ，et al. Role of vagal innervation in diurnal rhythm of intestinal peptide transporter 1 (PEPT1)［J］. J Gastrointest Surg，2009，13(11):1976-1985.

［30］ Wang Y，Hua L，Lu C，et al. Expression of circadian clock gene human Period2 (hPer2)in human colorectal carcinoma［J］. World J Surg Oncol，2011，9:166.

［31］ Zub-Pokrowiecka A，Rembiasz K，Konturek PC，et al. Ghrelin and gastrin in advanced gastric cancer before and after gastrectomy［J］.World J Gastroenterol，2011，17(4):449-458.

［32］ Oda A，Katayose Y，Yabuuchi S，et al. Clock gene mouse period2 overexpression inhibits growth of human pancreatic cancer cells and has synergistic effect with cisplatin［J］. Anticancer Res，2009，29(4):1201-1209.

［33］ Yu EA，Weaver DR. Disrupting the circadian clock:gene-specific effects on aging，cancer，and other phenotypes［J］. Aging (Albany NY)，2011，3(5):479-493.