HPLC法測(cè)定消積祛瘀合劑中莪術(shù)醇的含量

湯獻(xiàn)彪

【摘要】目的：研究消積祛瘀合劑中莪術(shù)醇的含量測(cè)定方法。方法：色譜柱：Hanbang ODS-2 C18（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相：0.05%甲酸乙腈-0.05%甲酸水（45∶55）；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：216nm；流速：1.0ml/min。結(jié)果：該方法的線性范圍為0.406～2.03μg （r=0.9998），平均回收率為99.1%。結(jié)論：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、可行、靈敏度高、重現(xiàn)性好，可用于消積祛瘀合劑的成分含量測(cè)定。

【關(guān)鍵詞】高效液相色譜法；消積祛瘀合劑；莪術(shù)醇；含量

【中圖分類號(hào)】R284.1【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2014）23-0012-01

消積祛瘀合劑由三棱、莪術(shù)、三七、桃仁等中藥組成，具有活血化瘀、軟堅(jiān)散積之功，對(duì)治療子宮肌瘤等氣滯血凝癥具有較好的療效。在臨床使用過程中，有的患者反映每次效果不同，有的患者反映每次口味有差異，分析原因可能與原料及制備工藝相關(guān)。為了保持消積祛瘀合劑每批次的相對(duì)一致性，本研究對(duì)消積祛瘀合劑中莪術(shù)醇含量進(jìn)行測(cè)定，并確定一個(gè)限值，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)過程報(bào)告如下。

1儀器與試藥

1.1儀器Waters 515高效液相色譜儀，P200高壓泵，Waters 2487紫外檢測(cè)器及GJ605型高壓六通進(jìn)樣閥。

1.2試藥莪術(shù)醇對(duì)照品（批號(hào)：0842-200302，中國(guó)藥品生物制品檢定所），消積祛瘀合劑（批號(hào)：20130613、20130718、20130820、20130929）由本院自制；其他試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)[1]色譜條件：色譜柱：Hanbang ODS-2 C18（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相：0.05%甲酸乙-0.05%甲酸水（45∶55）；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：216nm；流速：1.0ml/min；進(jìn)樣量：20μl，采樣時(shí)間65min。為了保證本實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性，莪術(shù)醇峰的分離度>1.5，理論塔板數(shù)不低于3000。

2.2供試品溶液的制備取消積祛瘀合劑5支，從中精密量取50ml，用流動(dòng)相加至100ml，超聲處理20min，微孔濾膜過濾為供試品溶液。

2.3對(duì)照品溶液的制備稱取莪術(shù)醇對(duì)照品8.12mg，用流動(dòng)相超聲制備成0.0812mg/ml對(duì)照品溶液。

2.4線性關(guān)系取莪術(shù)醇對(duì)照品溶液進(jìn)樣，濃度為0.406μg的對(duì)照品溶液的1、2、3、4和5倍，進(jìn)行線性回歸，回歸方程為：Y=16363.4742X+834.5632（r=0.9998），說明在本實(shí)驗(yàn)條件下有線性關(guān)系。

2.5回收率、精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)按照上述含量測(cè)定方法，測(cè)定回收率為99.1%，精密度試驗(yàn)顯示RSD為0.98%，重復(fù)性試驗(yàn)RSD為1.51% ，取批號(hào)（20130613）的供試品溶液分別在24 h內(nèi)間隔進(jìn)樣5次，每次20μl，結(jié)果RSD為1.43% ，說明本方法可控可重復(fù)。

2.6樣品測(cè)定取消積祛瘀合劑（批號(hào)：20130613、20130718、20130820、20130929）按所述方法測(cè)定樣品中的莪術(shù)醇含量，結(jié)果批號(hào)20130613的消積祛瘀合劑含量為1.412mg/支，RSD為0.79%；批號(hào)20130718的樣品含量為1.362mg/支，RSD為0.82%；批號(hào)20130820的樣品含量為1.338mg/支，RSD為0.61%；批號(hào)20130929的樣品含量為1.428mg/支，RSD為0.78%。

3討論

根據(jù)所測(cè)四批樣品的含量結(jié)果，消積祛瘀合劑中莪術(shù)醇的平均含量為1.385mg/支，因此規(guī)定消積祛瘀合劑中莪術(shù)醇不得少于1.30mg/支。在實(shí)驗(yàn)過程中，也用過甲醇、乙醇等方法來提取，發(fā)現(xiàn)效果都沒有本方法好，波長(zhǎng)的選擇也是發(fā)現(xiàn)此波長(zhǎng)下分離度最好。如果每一批生產(chǎn)的產(chǎn)品含量達(dá)到規(guī)定值，其口味和效果及病人的感受會(huì)相對(duì)一致，有利于藥物發(fā)揮最大的作用。

參考文獻(xiàn)

[1] 賈東明，姜義娜，薛勝霞.反相高效液相色譜法測(cè)定莪術(shù)油凝膠劑中莪術(shù)醇和吉馬酮含量[J].溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，37（5）：500-501.

（收稿日期：2014.09.11）