紫椴花多糖的微波提取及體外抗氧化活性

王婧杰， 陳玉霞， 穆立薔*

（1.東北林業(yè)大學 林學院，黑龍江 哈爾濱 150040；2.哈爾濱市園林科學研究所，黑龍江 哈爾濱150040）

紫椴（Tilia amurensis Rupr.）是我國東北地區(qū)重要的經濟樹種，是優(yōu)質的蜜源和木材[1]?！吨腥A本草》記載，紫椴花具有清熱解表的藥效[2]。椴樹屬植物是傳統(tǒng)的藥用植物，可以作為鎮(zhèn)靜劑、利尿劑、祛痰劑和發(fā)汗劑[3-4]。紫椴花中含有較多的多糖、黃酮類化合物、酚類、香豆素等多種天然活性物質[5]。紫椴花乙醇提取物具有較好的抗急性炎癥及鎮(zhèn)痛作用[6]，紫椴樹皮提取物中的黃烷和脂肪酸能夠抑制DNA拓撲異構酶的活性[7]。紫椴花中多糖含量豐富，盛花期可達到約163.21 mg/g[8-9]，是一種理想的植物多糖原料。國內外學者采用熱水浸提[10]、微波輔助[11]、超聲波輔助[12]、酶法輔助[13]等諸多方法提取植物中的多糖并對多種植物多糖進行了抗氧化活性評價。目前尚未發(fā)現(xiàn)對紫椴花多糖生物活性進行研究的相關文獻報道。作者采用響應面法優(yōu)化了紫椴花多糖的微波提取工藝，并對其體外抗氧化活性進行了研究，旨在為紫椴資源的合理開發(fā)和深度利用提供科學的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與設備

紫椴花，采于東北林業(yè)大學校園，經東北林業(yè)大學穆立薔教授鑒定為紫椴花，自然風干，粉碎后過60目篩；市售鮮雞蛋；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH），美國Sigma公司產品；其他試劑均為國產分析純。

756PC紫外可見分光光度計，北京通用儀器有限公司制造；WD800LG微波爐，天津樂津電子有限公司制造；NKTHZ-A空氣恒溫搖床，常州諾基儀器有限公司制造；TDL-40B-W臺式低速大容量離心機，湖南星科科學儀器有限公司制造；FW-100型高速萬能粉碎機，天津市泰斯特儀器有限公司制造；TGL-16G高速離心機，北京佳源興業(yè)科技有限公司制造；TDA-8002型恒溫水浴鍋，上海博迅實業(yè)有限公司制造；ALC-110型電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司制造；RE-52A旋轉蒸發(fā)器，上海亞榮生化儀器廠制造；LGJ-10臺式冷凍干燥機，北京松源華興科技發(fā)展有限公司制造；Magna-IR560型傅里葉變換紅外光譜儀，美國尼高力（Nicolet）公司制造。

1.2 實驗方法

1.2.1 紫椴花多糖提取工藝流程 紫椴花干粉→石油醚脫脂→微波提取→離心→提取液濃縮→Sevage法除蛋白質→體積分數(shù)95%乙醇沉淀→洗滌沉淀→冷凍干燥→紫椴花粗多糖。

1.2.2 葡萄糖標準曲線的繪制 采用苯酚-硫酸比色法[14]，得到葡萄糖標準曲線回歸方程：

式（1）中，y為反應液在490 nm處的吸光值；x為反應液中的葡萄糖質量濃度，μg/mL。

1.2.3 提取液中多糖得率計算方法 多糖提取液定容至100 mL，再吸取1.0 mL定容至25 mL。取定容液2.0 mL，按標準曲線的步驟操作測定吸光度，根據(jù)標準曲線回歸方程計算多糖得率。

1.2.4 單因素實驗 考察微波時間（min）、微波功率（W）和料液比（g/mL）3個因素對紫椴花多糖得率的影響，每個處理實驗重復3次。

1.2.5 響應面法優(yōu)化紫椴花多糖提取工藝 在單因素實驗基礎上利用Minitab16.0軟件，以紫椴花多糖得率為響應值，設計微波時間、微波功率和料液比三因素三水平Box-Benhnken中心組合實驗，建立二次回歸方程模型，優(yōu)化微波提取紫椴花多糖工藝參數(shù)，并進行驗證實驗。Box-Benhnken實驗設計因素水平見表1。

表1 Box-Benhnken實驗設計因素水平表Table 1 Factors and levels of Box-Benhnken experiment design

1.2.6 紫椴花粗多糖定性分析及紅外光譜分析

觀察紫椴花粗多糖的顏色、狀態(tài)及其在水、甲醇、無水乙醇、丙酮等試劑中的溶解性。配制1 mg/mL紫椴花粗多糖溶液，分別通過硫酸-咔唑反應、碘化反應、斐林試劑和班氏試劑反應、考馬斯亮藍反應和三氯化鐵反應，檢測紫椴花粗多糖中是否含有糖醛酸、淀粉、還原糖、蛋白質和酚類化合物。精確稱取紫椴花粗多糖粉末2 mg，在遠紅外燈照射下與干燥的KBr研磨混合壓片后，以KBr為本底，用紅外光譜儀在4 000～400 cm-1紅外波數(shù)范圍內進行掃描。

1.2.7 紫椴花粗多糖體外抗氧化活性研究

1）紫椴花粗多糖清除DPPH自由基能力的測定：參照文獻[15]方法，以VC作陽性對照?？寡趸瘎┣宄鼶PPH自由基的能力（E0）由式（2）計算：

式（2）中，A0為2 mL DPPH甲醇溶液+2 mL溶劑的吸光度值；A1為2 mL甲醇+2 mL多糖溶液的吸光度值；A2為2 mL DPPH甲醇溶液+2 mL多糖溶液的吸光度值。

2）紫椴花粗多糖總還原能力的測定：參照文獻[16]的方法，略做修改，以VC作陽性對照。

3）紫椴花粗多糖清除羥自由基能力的測定：參照文獻[17]的測定方法，略做調整，以VC作陽性對照。羥自由基清除率（E1）計算公式如下式（3）：

式 （3）中，A為不同多糖質量濃度下的吸光度；Aj為用水代替水楊酸時測得某質量濃度多糖的本底吸光度；A0為用水代替抗氧化劑時測得的空白對照吸光度。

4）紫椴花粗多糖抗脂質過氧化能力的測定：參照文獻[18]的方法，略做修改，以VC作陽性對照。抑制率（E2）計算公式為

式（4）中，A0為空白對照組吸光度值，A為不同質量濃度抗氧化劑作用體系的吸光度值。

2 結果與分析

2.1 單因素實驗結果分析

2.1.1 微波時間對多糖得率的影響 由圖1（a）可知，紫椴花多糖得率隨著微波作用時間的延長而提高，微波作用時間達到8 min時，紫椴花多糖得率達到最大，而后有下降的趨勢。出現(xiàn)這種趨勢的原因可能是較短時間內，微波對植物細胞壁及細胞膜的破壞作用大，導致細胞內物質大量溶出，多糖得率顯著提高；另一方面，隨著細胞破碎程度越來越大，細胞中其他雜質的溶出也增加，多糖得率反而下降[19]。因此，8 min為較優(yōu)的微波作用時間，選擇6 min、8 min、10 min作為響應面實驗的3個水平。

2.1.2 微波功率對多糖得率的影響 由圖1（b）可知，紫椴花多糖得率隨著微波功率的提高呈現(xiàn)先升高而后略有下降的趨勢，微波功率為480 W時，多糖得率最大。出現(xiàn)這種趨勢的原因可能是在一定范圍內，微波功率升高時，物料吸收的微波熱能隨之增加，有效促進植物細胞的破碎，溶出物質增加；當微波功率達到一定水平后，會引起多糖降解，多糖得率稍有下降[20]。因此，480 W為較優(yōu)的微波輸出功率，選擇320 W、480 W、640 W作為響應面實驗的3個水平。

2.1.3 料液比對多糖得率的影響 由圖1（c）可知，紫椴花多糖得率隨著料液比的增加呈現(xiàn)先升高而后下降的趨勢，料液比為 1∶60（g/mL）時，多糖得率達到最大值。出現(xiàn)這種趨勢的原因可能是在一定范圍內，水量的增加使得原料與水邊界層濃度差增大，有利于多糖的溶出和擴散，傳質速率提高；隨著水量進一步增加，溫度上升趨于緩慢，能耗效率下降，同時雜質溶出增加，相當于多糖被稀釋，得率反而降低[21]。 因此，1∶60（g/mL）為較優(yōu)的料液比，選擇1∶50、1∶60、1∶70（g/mL）作為響應面實驗的 3 個水平。

圖1 微波時間、微波功率和料液比對多糖得率的影響Fig.1 Effect of microwave time，microwave power and ratio of raw material to liquid on the extraction rate of polysaccharides

2.2 響應面實驗結果分析

2.2.1 工藝優(yōu)化實驗設計方案及結果 Box-Benhnken實驗設計方案及結果見表2。

2.2.2 數(shù)學二次回歸模型的建立及方差分析 根據(jù)實驗結果進行多元擬合分析，得到的二次多項回歸方程模型為

式（5）中，Y代表多糖得率，A、B、C分別代表微波時間、微波功率和料液比。

對上述模型進行方差分析，結果見表3。回歸方程F檢驗P＜0.01，差異極顯著；失擬檢驗P=0.310＞0.05，不顯著；相關系數(shù)R2=98.13%。綜上所述，響應值的變化有98.13%來源于所選變量，模型對實驗實際情況擬合較好，可用來預測不同提取條件下的紫椴花多糖理論得率。

表2 Box-Benhnken實驗設計方案及結果Table 2 Program and resultofBox-Benhnken experiment design

表3 Box-Benhnken設計二次模型方差分析Table 3 Variance analysis of the regression quadmtic model of Box-Benhnken design

回歸方程系數(shù)顯著性檢驗見表4。可知，對多糖得率的影響達到極顯著水平的項為A、B、A2和B2；達到顯著水平的項為C、AC和C2。其中微波功率對多糖得率影響最大，微波時間次之。圖2為根據(jù)回歸方程模型做出的3個因素之間交互作用的三維曲面圖。自變量的改變對響應值的影響可以通過三維曲面圖直觀地反映出來。

2.2.3 提取工藝的優(yōu)化結果與驗證實驗 根據(jù)二次回歸方程，將得率Y設定為最大值，計算相應的變量值，得到提取工藝的優(yōu)化結果：微波時間9.14 min，微波功率 585 W，料液比 1∶67（g/mL），多糖得率模型理論預測值為12.57%。由于實驗所用微波爐功率設定的局限性，選擇微波時間9 min，微波功率 640 W，料液比 1∶67（g/mL）的工藝條件進行驗證實驗，在此條件下實際多糖得率為12.05%，模型理論預測值為12.11%，實際值與理論值接近，說明可以通過該模型對實際操作條件下的理論多糖得率進行相對準確的預測。

表4 二次模型回歸方程系數(shù)顯著性檢驗Table 4 Coefficient estimates of regression quadratic model

圖2 微波時間、微波功率和料液比交互作用影響的三維曲面圖Fig.2 Response surface plot of mutual-influence for microwave time，microwave power and solidliquid ratio on yield

2.3 紫椴花多糖的定性分析及紅外光譜分析結果

2.3.1 物化性質分析結果 紫椴花粗多糖為淡黃色纖維狀固體，溶于水和甲醇，不溶于無水乙醇和丙酮。碘化反應、斐林試劑反應、班氏試劑反應及三氯化鐵反應呈陰性，說明紫椴花粗多糖中不含淀粉、還原糖及酚類化合物；硫酸-咔唑反應和考馬斯亮藍反應呈陽性，說明紫椴花粗多糖中含有糖醛酸和蛋白質。

2.3.2 紅外光譜分析結果 由圖3可見，3 418 cm-1處的吸收峰是很強的O—H鍵的伸縮振動吸收峰；2 926 cm-1處的吸收峰是 CH3、CH2和 CH的 C—H鍵的伸縮振動吸收峰；1 727 cm-1處的吸收峰為羰基吸收峰，說明含有糖醛酸[22]；1 419 cm-1和1 378 cm-1處的多重吸收峰是C—H的伸縮和變角振動吸收峰[23]；1 323 cm-1處是C—H彎曲振動吸收峰；1 043 cm-1處的則是醇羥基—OH的變角振動吸收峰；1 150 cm-1處的吸收峰是環(huán)上碳—氧（C—O）吸收峰；909 cm-1處的小吸收峰是β-糖苷鍵吸收峰，說明存在β-糖苷鍵；813 cm-1處的吸收峰是甘露糖的特征吸收峰，表明多糖的糖基中含有甘露糖[24]；在 1 616 cm-1處有 NH2和—NH3+的特征吸收峰，說明紫椴花粗多糖中有蛋白多糖。

圖3 紫椴花多糖紅外光譜掃描圖Fig.3 Infra-red spectrogram of polysaccharides of Tilia amurensis Rupr

2.4 紫椴花多糖體外抗氧化活性的測定結果分析

2.4.1 紫椴花粗多糖清除DPPH自由基能力的測定結果分析 DPPH自由基在有機溶劑中是一種穩(wěn)定的自由基，溶液在波長517 nm處有特征吸收峰，呈紫紅色。自由基清除劑可與其單電子配對而使其吸收減弱，減弱程度與其所接受的電子數(shù)成定量關系，因此可用分光光度法評價自由基的清除情況[25]。如圖4（a）所示，一定質量濃度范圍內的VC和紫椴花多糖對DPPH自由基都具有一定的清除效果，隨著質量濃度的增加，VC對DPPH的清除率基本保持在50%左右，沒有顯著的量效關系。大多數(shù)研究植物多糖清除DPPH自由基活性的文獻報道中，VC對DPPH自由基的清除率基本上能達到100%，本實驗中未出現(xiàn)這一現(xiàn)象的原因可能是由于DPPH的溶劑不同造成的，因為紫椴花多糖遇乙醇沉淀，故選擇用甲醇溶解DPPH；紫椴花多糖對DPPH的清除效果在較低質量濃度范圍內時呈現(xiàn)較好的量效關系，質量濃度達到600 μg/mL后，逐漸趨于穩(wěn)定；且同質量濃度的VC對DPPH的清除效果優(yōu)于紫椴花多糖的。

2.4.2 紫椴花粗多糖總還原能力的測定結果分析抗氧化劑的抗氧化能力與其還原力有關，還原力越大，抗氧化能力越強?？寡趸瘎┠軌蛟谝欢ǖ臈l件下將Fe3+還原為Fe2+。根據(jù)1.2.7之2）的方法，反應后的生成物在700 nm處的吸光度的大小即反映了其抗氧化能力的大小，值越大則樣品的還原能力越強[26]。 如圖 4（b）所示，不同質量濃度（8～80 μg/mL）的紫椴花多糖溶液具有一定的總還原能力，且隨著質量濃度增加呈現(xiàn)線性升高趨勢，與同質量濃度的VC相比，紫椴花多糖的總還原能力相對較弱。

2.4.3 紫椴花粗多糖清除羥自由基能力的測定結果分析 H2O2與FeSO4反應（Fenton反應）會產生羥自由基，羥自由基具有很強的氧化能力，通過攻擊水楊酸分子中的苯環(huán)使其發(fā)生氧化反應，生成的有色物質在510 nm處的吸光值與羥自由基的量成正比[27]。若在反應體系中加入抗氧化劑，羥自由基受到抑制，有色物質生成量將會減少。如圖4（c）所示，不同質量濃度（200～1800 μg/mL）的紫椴花多糖對羥自由基具有明顯的清除作用，且清除率隨著質量濃度的增加而升高，當其質量濃度為1 800 μg/mL時，對羥自由基的清除率高達88.19%。VC對羥自由基的清除能力強于同質量濃度的紫椴花多糖，當VC質量濃度為1 800 μg/mL時，羥自由基清除率達到100%。

2.4.4 紫椴花粗多糖抑制脂質過氧化能力的測定結果分析 Fe2+能誘導卵黃中磷脂C-2位上所含的多不飽和脂肪酸（PUFA）發(fā)生脂質過氧化反應，生成的過氧化產物丙二醛（MDA）等在加熱條件下可與硫代巴比妥酸（TBA）反應生成粉紅色的化合物，在波長532 nm處有特征吸收峰，抗氧化劑可在一定程度上延緩或抑制脂質過氧化過程[28-29]。如圖4（d）所示，不同質量濃度（400～2000 μg/mL）的紫椴花多糖對Fe2+誘發(fā)的脂質過氧化具有顯著的抑制作用，且質量濃度越大，抑制作用越強。當紫椴花多糖質量濃度為1 600 μg/mL時，其對脂質過氧化的抑制作用已接近于同質量濃度的VC；當紫椴花多糖質量濃度為2 000 μg/mL時，對脂質過氧化的抑制率已達到75.42%，高于相同質量濃度的VC。

圖4 紫椴花多糖和VC的體外抗氧化活性Fig.4 Antioxidant activity in vitro of Tilia amurensis Rupr.polysaccharides and VC

3 結語

微波輔助提取技術具有時間短、效率高、節(jié)能等特點。采用微波法提取紫椴花多糖，在單因素實驗的基礎上，以多糖得率為響應值，微波時間、微波功率和料液比作為自變量，利用Minitab軟件進行響應面優(yōu)化設計實驗，得到微波提取紫椴花多糖的最佳工藝條件：微波時間9.14 min，微波功率585 W，料液比1∶67（g/mL），多糖得率模型理論預測值可達到12.57%。驗證實驗表明，回歸模型可以較準確地對實際操作條件下的多糖得率進行預測。

研究表明，機體的衰老、炎癥、癌癥和免疫疾病等均與體內過剩氧自由基（ROS）有關，其中羥基自由基（·OH）可直接作用于生物膜，引起脂質過氧化反應，危害最大[30-31]。植物多糖作為一類天然自由基清除劑，能夠清除和平衡多種活性氧自由基，減少自由基對人體的損傷。本實驗的研究結果表明，紫椴花多糖具有還原能力，能夠清除DPPH自由基和Fenton反應產生的·OH，同時對Fe2+誘發(fā)的脂質過氧化反應有較強的抑制作用，顯示出較好的體外抗氧化活性。與同質量濃度的VC相比，其還原力、清除自由基能力稍弱，但其抑制脂質過氧化的效果在達到一定質量濃度后，有強于同質量濃度VC的趨勢。紫椴花多糖清除自由基的機制可能與多糖鏈的結構有關，抑制脂質過氧化的機理可能是其具有螯合金屬離子的能力，使其不能產生啟動脂質過氧化反應的羥自由基，進而抑制脂質過氧化反應的發(fā)生[32]。

作者對紫椴花多糖粗提物進行了體外抗氧化活性評價，有必要在此基礎上對其純化組分的結構、功能及單糖組成進行更加深入的研究，以期為其構效關系提供更加充分的理論依據(jù)。同時，可在體外抗氧化實驗的基礎上對紫椴花多糖的體內抗氧化活性進行研究，為開發(fā)安全性高的天然抗氧化劑和保健產品奠定理論基礎。

[1]馬微微，許穎，穆立薔．紫椴的研究進展及其資源的開發(fā)利用[J]．中國林副特產，2009（2）：88-90．MA Weiwei，XU Ying，MU Liqiang．The resource development and research progress of Tilia amurensis Rupr.[J]．Forest Byproduct and Specialty in China，2009（2）：88-90．（in Chinese）

[2]國家中醫(yī)管理局《中華本草》編委會．中華本草［M］．上海：上?？茖W技術出版社，1999：4312．

[3]Ahn D K．Illustrated Book of Korean Medicinal Herbs[M].Seoul：Kyo-Hak Publishing Co Ltd，2003：56．

[4]Park J H．Medicinal Plants of Korea[M].Seoul：Shinil Book Co，2004：896-900．

[5]穆立薔，鄭健，王洋，等．紫椴花和果實化學成分及其地理變異[J]．林業(yè)科學，2009，45（4）：46-52．MU Liqiang，ZHENG Jian，WANG Yang，et al．Chemical compositions and geographic variation in flowers and fruits of Tilia amurensis[J]．Scientia Silvae Sinicae，2009，45（4）：46-52．（in Chinese）

[6]馬微微．紫椴花抗炎鎮(zhèn)痛及抗菌的藥效學研究[D]．哈爾濱：東北林業(yè)大學，2009．

[7]Choi J Y，Seo C S，Zheng M S，et al．Topoisomerase I and II inhibitory constituents from the bark of Tilia amurensis[J]．Archives of Pharmacal Research，2008，31（11）：1413-1418．

[8]劉立平.紫椴地上器官化學成分的初步研究[D]．哈爾濱：東北林業(yè)大學，2009．

[9]MU Liqiang，LIU Liping，MA Dalong．Optimal ultrasonic extraction condition and determination of polysaccharides in Tilia amurensis flowers[J]．Journal of Forest Research，2010，21（1）：77-80．

[10]WU Yan，Steve W Cui，TANG Jian，et al．Optimization of extraction process of crude polysaccharides from boat-fruited sterculia seeds by response surface methodology[J]．Food Chemistry，2007，105：1599-1605．

[11]盧丹，呂淼華，姚善涇．微波輔助法提取獼猴桃多糖的條件優(yōu)化[J]．食品與生物技術學報，2010，29（3）：401-405．LU Dan，LV Miaohua，YAO Shanjing．Optimization of the extraction of polysaccharides with microwave-assisted extraction from Actinidia chinensis[J]．Journal of Food Science and Biotechnology，2010，29（3）：401-405．（in Chinese）

[12]ZHONG Kui，WANG Qiang．Optimization of ultrasonic extraction of polysaccharides from dried longan pulp using response surface methodology[J]．Carbohydrate Polymers，2010，80：19-25．

[13]郭輝娟，魏定國．半夏多糖提取工藝優(yōu)化及其清除自由基能力研究[J]．安徽農業(yè)科學，2010，38（34）：19341-19342，19345．GUO Huijuan，WEI Dingguo．Study on optimization of extraction process of Pinellia ternate （Thunb.） Breit.polysaccharide and its scavenging effect on radical[J]．Journal of Anhui Agricultural Sciences，2010，38（34）：19341-19342，19345．（in Chinese）

[14]孟憲軍，孫希云，朱金艷，等．藍莓多糖的優(yōu)化提取及抗氧化性研究[J]．食品與生物技術學報，2010，29（1）：56-60．MENG Xianjun，SUN Xiyun，ZHU Jinyan，et al．Extraction and antioxidant capability of blueberry polysaccharides[J]．Journal of Food Science and Biotechnology，2010，29（1）：56-60．（in Chinese）

[15]SONG Houfang，ZHANG Quanbin，ZHANG Zhongshan，et al．In vitro antioxidant activity of polysaccharides extracted from Bryopsis plumosa[J]．Carbohydrate Polymers，2010，80：1057-1061．

[16]謝佳，張靜．不同苦瓜多糖的體外抗氧化活性研究[J]．廣州化工，2010，38（5）：87-90．XIE Jia，ZHANG Jing．Study on antioxidant activity in vitro of different polysaccharides from Momordica charantia[J]．Guangzhou Chemical Industry，2010，38（5）：87-90．（in Chinese）

[17]王希，吳向陽，仰榴青，等．大麥多糖的提取及清除羥自由基活性研究[J]．食品研究與開發(fā)，2008，29（11）：64-67．WANG Xi，WU Xiangyang，YANG Liuqing，et al．Study on extraction and ability to scavenge hydroxyl radicals of polysaccharides from barely[J]．Food Research and Development，2008，29（11）：64-67．（in Chinese）

[18]張爾賢，方黎，張捷，等．菊花提取物的抗氧化活性研究[J]．食品科學，2000，21（7）：6-9．ZHANG Erxian，F(xiàn)ANG Li，ZHANG Jie，et al．Study on anti-oxidative activity of flos chrysanthemum extract[J]．Food Science，2000，21（7）：6-9．（in Chinese）

[19]楊穎，孫文武，周晨，等．響應曲面法優(yōu)化玉竹水溶性多糖提取及體外抗氧化研究[J]．食品與生物技術學報，2013，32（3）：298-306．YANG Ying，SUN Wenwu，ZHOU Chen，et al．Optimization of water-soluble polysaccharides extraction from rhizome of Polygonatum odoratum using response surface methodology and its antioxidant activities in vitro[J]．Journal of Food Science and Biotechnology，2013，32（3）：298-306．（in Chinese）

[20]陳小梅，甘純璣，陳彩玲，等．響應面法優(yōu)化微波輔助提取滸苔多糖工藝[J]．食品研究與開發(fā)，2011，32（4）：44-48．CHEN Xiaomei，GAN Chunji，CHEN Cailing，et al．Microwave-assisted extraction of polysaccharides from Enteromorpha prolifera（EP） by response surface methodology[J]．Food Research and Development，2011，32（4）：44-48．（in Chinese）

[21]王磊，劉秀鳳，邱芳萍，等．微波輔助提取玉米須多糖及其組成的研究[J]．食品與生物技術學報，2009，28（1）：72-75．WANG Lei，LIU Xiufeng，QIU Fangping，et al．Extraction of corn-silk polysaccharides by microwave-assisted technology[J]．Journal of Food Science and Biotechnology，2009，28（1）：72-75．（in Chinese）

[22]夏朝紅，戴奇，房韋，等．幾種多糖的紅外光譜研究[J]．武漢理工大學學報，2007，29（1）：45-47．XIA Chaohong，DAI Qi，F(xiàn)ANG Wei，et al．Research on the IR spectrscopy of kinds of polysaccharide[J]．Journal of Wuhan University of Technology，2007，29（1）：45-47．（in Chinese）

[23]張賽金，李文權，鄧永智，等．海洋微藻多糖的紅外光譜分析初探[J]．廈門大學學報：自然科學版，2005，44（z1）：212-214．ZHANG Saijin，LI Wenquan，DENG Yongzhi，et al．Analysis of marine microalgal polysaccharides by gas chromatography and IR spectroscopy[J]．Journal of Xiamen University：Natural Science，2005，44（z1）：212-214．（in Chinese）

[24]蓋英萍，牟志美，冀憲領，等．桑葉多糖的提取與分析[J]．蠶業(yè)科學，2005，31（1）：31-35．GAI Yingping，MU Zhimei，JI Xianling，et al．The extracting and analyses of polysaccharides in mulberry leaf[J]．Acta Sericologica Sinica，2005，31（1）：31-35．（in Chinese）

[25]張匯，鄢嫣，聶少平，等．黑靈芝不同部位多糖成分分析及抗氧化活性[J]．食品科學，2011，32：56-61．ZHANG Hui，YAN Yan，NIE Shaoping，et al．Monosaccharide composition and antioxidant activity in vitro of polysaccharides from different parts of Ganoderma atrum[J]．Food Science，2011，32：56-61．（in Chinese）

[26]LIU Xin，SUN Zhenliang，ZHANG Miansong，et al．Antioxidant and antihyperlipidemic activities of polysaccharides from sea cucumber Apostichopus japonicus[J]．Carbohydrate Polymers，2012，90：1664-1670．

[27]XIONG Shuangli，LI Anlin，HUANG Ni，et al．Antioxidant and immunoregulatory activity of different polysaccharide fractions from tuber of Ophiopogon japonicus[J]．Carbohydrate Polymers，2011，86：1273-1280．

[28]曹煒，宋紀蓉，陳衛(wèi)軍，等．蜂膠對脂質過氧化的抑制作用[J]．食品科學，2004，25（1）：34-36．CAO Wei，SONG Jirong，CEHN Weijun，et al．Study on the action of propolis inhibit the peroxidation of polyunsaturated fatty acid from yelk lipoprotein induced by Fe2+[J]．Food Science，2004，25（1）：34-36．（in Chinese）

[29]張強，王松華，孫玉軍，等．洋蔥中黃酮類化合物體外抗氧化活性研究[J]．農業(yè)機械學報，2009，40（8）：139-142．ZHANG Qiang，WANG Songhua，SUN Yujun，et al．Study on antioxidant activity in vitro of onion flavonoids[J]．Transactions of the Chinese Society for Agricultural Machinery，2009，40（8）：139-142．（in Chinese）

[30]丁紅秀，高蔭榆，晁紅娟，等．毛竹葉多糖體內抗氧化作用研究[J]．食品科學，2008，29（5）：427-430．DING Hongxiu，GAO Yinyu，CHAO Hongjuan，et al．Study on antioxidation effect in vivo of polysaccharide from moso bamboo leaves[J]．Food Science，2008，29（5）：427-430．（in Chinese）

[31]王德才，高麗君，高艷霞．泰山四葉參多糖體外抗氧化活性的研究[J]．中國生化藥物雜志，2008，29（2）：104-106．WANG Decai，GAO Lijun，GAO Yanxia．Antioxidative effects of polysaccharide extracted from Radix Codonopsis Lanceolatae from Mount Taishan in vitro[J]．Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics，2008，29（2）：104-106．（in Chinese）

[32]梁俊，李建科，趙偉，等．石榴皮多酚體外抗脂質過氧化作用研究[J]．食品與生物技術學報，2012，31（2）：159-165．LIANG Jun，LI Jianke，ZHAO Wei，et al．Effect of pomegranate peel polyphenols on lipid peroxidation in vitro[J]．Journal of Food Science and Biotechnology，2012，31（2）：159-165．（in Chinese）