微柱凝膠法在輸血患者不規(guī)則抗體的篩檢中應(yīng)用

王忱　曹志剛　張艷

[摘 要] 目的：探討微柱凝膠法在臨床輸血患者不規(guī)則抗體篩檢中的應(yīng)用價(jià)值。方法：采用微柱凝膠法和凝聚胺法對(duì)我院2010年1月至2014年3月申請(qǐng)輸血治療的4087例患者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，陽(yáng)性結(jié)果用譜細(xì)胞進(jìn)行抗體鑒定，分析比較兩種方法進(jìn)行臨床輸血前不規(guī)則抗體篩查的優(yōu)缺點(diǎn)。結(jié)果：4087例申請(qǐng)輸血患者中，發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者28例，不規(guī)則抗體陽(yáng)性率為0.69%（28/4087），有既往輸血或妊娠史22例（構(gòu)成比為78.57%），無輸血或妊娠史6例（構(gòu)成比為21.43%）。微柱凝膠法檢出28例，凝聚胺法檢出22例，漏檢6例，漏檢率為0.15%。微柱凝膠法敏感性較高，但兩種方法檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.724，P=0.295）。結(jié)論：采用微柱凝膠法輸血前對(duì)不規(guī)則抗體進(jìn)行篩查具有較高的準(zhǔn)確性，敏感性，且方便、快速、易于標(biāo)準(zhǔn)化。

[關(guān)鍵詞] 微柱凝膠法；輸血；凝聚胺法；不規(guī)則抗體；篩檢

中圖分類號(hào)：R446.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-5200（2014）06-071-02

不規(guī)則抗體即意外抗體，是指血清中抗-A、抗-B以外的其他血型抗體。人體含有的血清抗體主要有IgG及IgM兩大類，其中ABO血型內(nèi)的抗-A、抗-B為IgM型，其余血型系統(tǒng)內(nèi)的抗體則歸屬于IgG型。其他血型系統(tǒng)內(nèi)的不規(guī)則抗體是輸血反應(yīng)的重要誘因，一旦發(fā)病患者輕則出現(xiàn)發(fā)熱、寒戰(zhàn)，重則出現(xiàn)紅細(xì)胞不配合及壽命縮短，溶血性輸血反應(yīng)，直接危及患者生命安全[1]。由于傳統(tǒng)鹽水血型鑒定及交叉配血實(shí)驗(yàn)僅能檢測(cè)ABO血型系統(tǒng)內(nèi)的不規(guī)則抗體，而對(duì)其他血型系統(tǒng)無效，因此尋求一種有效的不規(guī)則抗體篩檢技術(shù)成為臨床研究的重要內(nèi)容[2]。微柱凝膠法是一種新型的血型鑒定技術(shù)，可應(yīng)用于不規(guī)則抗體篩檢工作，但其實(shí)際篩查效果如何，臨床報(bào)道較少。因此，筆者選取我院2010年1月至2014年3月申請(qǐng)輸血治療的4087例患者采用微柱凝膠法篩檢，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究對(duì)象為我院2010年1月至2014年3月申請(qǐng)輸血治療的4087例患者，其中男性2457例，女性1630例，年齡18～75歲，平均年齡（41.3±18.4）歲。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

選用西班牙Diana公司提供的微柱凝膠孵育器、全自動(dòng)配血系統(tǒng)儀器、微柱凝膠離心機(jī)以及微柱凝膠Coombs卡。篩選細(xì)胞l號(hào)、Ⅱ號(hào)和Ⅲ號(hào)及鑒定譜細(xì)胞由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供；凝聚胺試劑盒由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

微柱凝膠法先將篩選細(xì)胞l號(hào)、Ⅱ號(hào)和Ⅲ號(hào)按1：5比例稀釋為0.9濃度的備用細(xì)胞液，并置于試劑槽內(nèi)。對(duì)微柱凝膠Coombs卡進(jìn)行編號(hào)，置于儀器卡欄內(nèi)。取患者5mL靜脈血，常規(guī)離心后編號(hào)，并置于標(biāo)本槽內(nèi)。選取不規(guī)則抗體篩查程序，啟動(dòng)全自動(dòng)配血系統(tǒng)儀器，儀器自動(dòng)稀釋、溫育、離心，最終判讀結(jié)果。陽(yáng)性結(jié)果標(biāo)本根據(jù)譜細(xì)胞反應(yīng)格局來判斷其不規(guī)則抗體特異性類型。凝聚胺法按試劑盒操作說明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

所有收集數(shù)據(jù)錄入Excel2003，在spss17.0中進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以（x±s）表示，計(jì)量資料采用兩樣本獨(dú)立t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則陽(yáng)性抗體患者特異性抗體分布

4087例申請(qǐng)輸血患者中，發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者28例，不規(guī)則抗體陽(yáng)性率為0.69%（28/4087），其中男性15例（構(gòu)成比為53.57%），女性13例（構(gòu)成比為46.43%）。有既往輸血或妊娠史22例（構(gòu)成比為78.57%），無輸血或妊娠史6例（構(gòu)成比為21.43%）。

2.2 兩種不規(guī)則抗體檢測(cè)方法檢查結(jié)果

微柱凝膠法檢出28例，采用譜細(xì)胞鑒定均為陽(yáng)性，凝聚胺法檢出22例，采用譜細(xì)胞鑒定均為陽(yáng)性，凝聚胺法漏檢6例，漏檢率為0.15%。兩種檢查方法的檢出結(jié)果比較差異不顯著（χ2=0.724，P=0.295）。

3 討論

輸血中受血者的不規(guī)則抗體如接受對(duì)應(yīng)抗原血液制品，受血者可能出現(xiàn)嚴(yán)重免疫性溶血性輸血反應(yīng)，這將危機(jī)患者生命[3]。不規(guī)則抗體生成在輸血人群中較為少見，本次研究中4087例申請(qǐng)輸血患者僅發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者28例，不規(guī)則抗體陽(yáng)性率為0.69%。不規(guī)則抗體篩查意義主要有以下幾點(diǎn)[4]：（1）對(duì)獻(xiàn)血者的血清、血漿篩查可避免含不規(guī)則抗體血液輸入受血者體內(nèi)，避免受血者發(fā)病免疫性溶血性輸血反應(yīng)。（2）對(duì)受血者篩查有利于血液選擇，醫(yī)師可以根據(jù)檢測(cè)結(jié)果確定患者具體需求血液，避免患者因輸入血液相關(guān)抗原而出現(xiàn)溶血性輸血反應(yīng)。（3）孕婦人群的不規(guī)則抗體篩查，可盡早明確孕婦是否伴有不規(guī)則抗體，可為孕期新生兒溶血病防治提供參考。

目前，臨床應(yīng)用的血清抗體檢測(cè)有鹽水血型鑒定、交叉配血試驗(yàn)等。其中鹽水血型鑒定原理是IgM型抗體可于鹽水介質(zhì)內(nèi)與對(duì)應(yīng)抗原紅細(xì)胞凝結(jié)，但是IgG型抗體無法在鹽水環(huán)境內(nèi)容出現(xiàn)凝結(jié)，僅可能于酶學(xué)實(shí)驗(yàn)、抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)內(nèi)才可能出現(xiàn)凝結(jié)[5]。交叉配血試驗(yàn)是確定受血者能否行輸血操作的重要依據(jù)，但該種檢測(cè)技術(shù)易受待檢紅細(xì)胞懸液濃度、外部環(huán)境影響，其檢測(cè)敏感度較低[6]。微柱凝膠法檢測(cè)是一種基于經(jīng)典抗人蛋白實(shí)驗(yàn)的一種新型檢測(cè)技術(shù)，已在歐美地區(qū)得到廣泛的應(yīng)用。該技術(shù)原理是通過微柱凝膠內(nèi)微小孔隙的過濾能力及免疫化學(xué)抗原抗體的特異反應(yīng)，再結(jié)合離心技術(shù)將出現(xiàn)凝結(jié)反應(yīng)的紅細(xì)胞阻滯于微柱凝膠內(nèi)，而未發(fā)生凝結(jié)反應(yīng)的單體紅細(xì)胞可通過微柱凝膠孔隙運(yùn)動(dòng)至柱底，最終顯示篩檢結(jié)果[7]。具有高靈敏度，結(jié)果精確等優(yōu)勢(shì)[8]。此外，微柱凝膠法檢測(cè)技術(shù)自動(dòng)化水平極高，檢測(cè)操作難度低，操作流程一目了然，利于推廣[9]。凝聚胺試驗(yàn)是在LIM下多聚季氨鹽促使紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異性凝集反應(yīng)[10]，具有靈敏度高、價(jià)廉、快速、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，但凝聚胺法需手工操作，對(duì)操作者要求較高，必須正確振搖細(xì)胞，嚴(yán)格按照規(guī)定時(shí)間判定結(jié)果。對(duì)有些低濃度抗體易漏檢。本次研究中，微柱凝膠法檢出28例，凝聚胺法檢出22例，凝聚胺法敏感性較低。

綜上所述，采用微柱凝膠法輸血前對(duì)不規(guī)則抗體進(jìn)行篩查準(zhǔn)確度高，該技術(shù)發(fā)展成熟，具有較高自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化水平，檢測(cè)操作難度較低，檢測(cè)速度較快，檢測(cè)相關(guān)費(fèi)用低，值得臨床推廣。

參 考 文 獻(xiàn)

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