動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)O型孕婦lgG抗A(B)效價(jià)與新生兒溶血病關(guān)系的探討

邱 芬，胡安華，田雪梅，古力巴哈提，阿斯木古麗，迪娜爾，文新貞 (.新疆伊犁州奎屯醫(yī)院輸血科，新疆 奎屯800;.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科，新疆 烏魯木齊 80054;.新疆伊犁州友誼醫(yī)院輸血科，新疆 伊犁 85000)

新生兒溶血病(hemolytic disease of newborn，HDN)一般特指母嬰血型不合而引起的胎兒或新生兒免疫性溶血性疾病。在我國(guó)HDN中ABO血型系統(tǒng)較多，以母親為O型，子女為A型或B型的發(fā)病率為最高，檢測(cè)母親血清中有無(wú)IgG性質(zhì)的抗A(B)抗體及其效價(jià)，即可預(yù)測(cè)ABO系統(tǒng)HDN發(fā)生的可能性［1］。我們動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)464對(duì)O型孕婦(其丈夫非O型)產(chǎn)前IgG抗A(B)抗體檢測(cè)，探討其與HDN發(fā)生率的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料:2010年4月至2012年8月在我院定期產(chǎn)前檢查妊娠20周以上的O型RhD陽(yáng)性血孕婦464例，年齡為20～43歲，按孕產(chǎn)次1次，多于1次分為兩組，首次妊娠253例(占54.5%)，二次及以上妊娠211例(占45.5%)，病例排除孕婦不規(guī)則抗體檢測(cè)陽(yáng)性。其丈夫血型為A型186例、B型194例、AB型84例。在孕20周開(kāi)始檢測(cè)血清中IgG抗A(B)的效價(jià)，以后每4周動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)一次。對(duì)孕婦所生的新生兒檢查ABO、RhD血型，并對(duì)有臨床HDN癥狀者檢測(cè)血清學(xué)3項(xiàng)(直接抗球蛋白試驗(yàn)、血清游離抗體試驗(yàn)及抗體釋放試驗(yàn))。

1.2 試劑及儀器:0.2 mol/L 2-巰基乙醇(2-M e)、抗-A、抗-B、抗-D、多特異性抗球蛋白試劑、反定型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞(A、B、O)、抗體篩選紅細(xì)胞均為上海市血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供。KA-2000型血庫(kù)專(zhuān)用離心機(jī)(日本KUBOTA公司)，HHW.21-420型水浴恒溫箱(北京永光明有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 孕婦血型抗體效價(jià)檢測(cè):在O型孕婦(其丈夫非O型)妊娠20周開(kāi)始進(jìn)行孕婦IgG抗A(B)血型抗體效價(jià)、母體不規(guī)則抗體測(cè)定，以后每4周復(fù)檢一次;①效價(jià)檢測(cè)采用間接抗球蛋白試管法，將孕婦血清0.1 ml與等量2-Me應(yīng)用液混合放37℃ 水浴30 min，處理后的血清0.05 ml用生理鹽水倍比稀釋?zhuān)尤朐袐D丈夫3% ～5%紅細(xì)胞0.05 ml(丈夫?yàn)锳B型的，同時(shí)做抗A和抗B，加對(duì)應(yīng)的反定型紅細(xì)胞)離心檢測(cè)其殘存鹽水效價(jià)，再放37℃水浴30 min后三洗加多特異性抗球蛋白試劑離心，檢測(cè)IgG效價(jià)。②不規(guī)則抗體篩查，操作按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3.2 新生兒血型血清學(xué)檢測(cè):檢測(cè)O型血孕婦所分娩的新生兒ABO、RhD血型;新生兒溶血病血清學(xué)檢測(cè) (直接抗人球蛋白試驗(yàn)、游離抗體檢測(cè)、抗體釋放試驗(yàn))。按文獻(xiàn)［2］方法操作。

1.4 結(jié)果判定

1.4.1 IgG抗A(B)血型抗體效價(jià):用肉眼觀察結(jié)果，IgG效價(jià)≥殘存鹽水效價(jià)2管為實(shí)驗(yàn)有效，呈弱凝集反應(yīng)(±)第一管的最高稀釋倍數(shù)的倒數(shù)即為該抗體的效價(jià)。IgG抗A(B)效價(jià)＜64者判斷為正常，≥64者為陽(yáng)性。

1.4.2 ABO-HDN診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］:ABO母嬰血型不合，結(jié)合臨床表現(xiàn)，HDN三項(xiàng)檢查陽(yáng)性，或直接抗球蛋白試驗(yàn)(DAT)和紅細(xì)胞抗體釋放試驗(yàn)其中一項(xiàng)陽(yáng)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間比較采用t檢驗(yàn)，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同孕次孕婦IgG抗A(B)效價(jià)與妊娠周數(shù)的關(guān)系:464例O型孕婦，按不同孕次分組，孕婦IgG抗A(B)效價(jià)與妊娠周數(shù)的關(guān)系見(jiàn)圖1。由圖1可以看出，隨著孕期的增加，抗體效價(jià)也隨著升高，孕1次組孕婦gG抗A(B)效價(jià)水平低于孕2次及以上組。在本研究對(duì)象中也有24例孕婦的抗體效價(jià)隨著孕期的增加而降低。

2.2 抗體效價(jià)升降與新生兒的關(guān)系:464例O型孕婦按不同孕次，將孕婦孕早期抗體效價(jià)與孕晚期的抗體效價(jià)作比較，孕1次組和孕2次以上組抗體效價(jià)升高2個(gè)及以上滴度，HDN發(fā)病率與抗體效價(jià)升高1個(gè)、相同組比較有顯著性差異(P＜0.05)。孕婦抗體效價(jià)升降的滴度與HDN的關(guān)系見(jiàn)表1。

圖1 不同孕次孕婦IgG抗A(B)效價(jià)與妊娠周數(shù)的關(guān)系

表1 孕晚期較孕早期IgG抗A(B)抗體效價(jià)升降滴度與新生兒溶血的關(guān)系［例(%)］

2.3 孕婦抗體效價(jià)與HDN的關(guān)系:不同孕次O型孕婦孕晚期抗體效價(jià)與HDN的關(guān)系見(jiàn)表2。隨抗體效價(jià)的升高，HDN的發(fā)生率也升高，孕2次級(jí)以上組HDN的發(fā)生率高于孕1次組(P＜0.05)。

表2 孕婦孕晚期IgG抗A(B)血型抗體效價(jià)與HDN的關(guān)系

3 討論

本研究結(jié)果顯示，464例O型孕婦隨著孕期的增加，IgG抗-A(B)效價(jià)水平孕晚期較孕早期有所升高。這與文獻(xiàn)［4］報(bào)道的結(jié)果一致。有研究認(rèn)為在孕早期，由于進(jìn)入母體的胎兒紅細(xì)胞相對(duì)較少，所以母體產(chǎn)生抗體的量少，抗體效價(jià)低。隨著孕期的增加，由于絨毛膜的破裂，進(jìn)入母體的胎兒紅細(xì)胞增加，不斷刺激母體，使母體產(chǎn)生抗體量增加，抗體效價(jià)升高［5］。當(dāng)抗體的效價(jià)上升超過(guò)機(jī)體的保護(hù)機(jī)制時(shí)，導(dǎo)致HDN的發(fā)生。但從本研究中還可看出IgG抗-A(B)效價(jià)≥64的190例孕婦，分娩的新生兒發(fā)生 ABO-HDN的39例，占20.5%，多數(shù)抗體效價(jià)在較高水平的孕婦分娩的新生兒沒(méi)有發(fā)病，一般認(rèn)為這可能與胎兒A、B抗原的強(qiáng)弱、血型物質(zhì)的含量、胎盤(pán)的屏障作用以及IgG亞類(lèi)不同有關(guān)［6］。

將孕婦孕早期抗體效價(jià)與孕晚期的抗體效價(jià)作比較，在本研究中，抗體效價(jià)升高2滴度的孕婦所分娩的新生兒，HDN發(fā)生率為孕1次組25%和孕2次及以上組為37.5%，明顯高于抗體效價(jià)升高1個(gè)、相同組?？梢?jiàn)，孕早期到孕晚期IgG抗A(B)效價(jià)升高2個(gè)滴度可以作為預(yù)測(cè)發(fā)生HDN的一個(gè)十分重要的指標(biāo)。研究提示，隨抗體效價(jià)的升高，HDN的發(fā)生率也升高。孕2次及以上組抗體效價(jià)升高水平高于孕1次組，HDN發(fā)生率也高于孕1次組。

在本次研究中，也發(fā)現(xiàn)24例孕早期時(shí)的IgG效價(jià)就偏高，通過(guò)對(duì)癥治療，隨著孕期的增加，抗體效價(jià)逐漸下降。對(duì)孕婦所生產(chǎn)的新生兒進(jìn)行跟蹤，均未發(fā)生HDN。是機(jī)體清除了抗體，還是治療控制了效價(jià)的升高，具體原因有待于進(jìn)一步探討。

動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)孕婦血清IgG抗A(B)效價(jià)，結(jié)合孕婦孕次、抗體效價(jià)的高低，可以更加準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)HDN的發(fā)生，為臨床及早采取預(yù)防、治療措施，有效地降低HDN的發(fā)病率，提供依據(jù)。

［1］ 劉達(dá)莊.免疫血液學(xué)［M］.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，2002:128-144.

［2］ 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.第3版.南京:東南大學(xué)出版社，2006:246-270.

［3］ 金漢珍，黃德珉，官希吉，等.實(shí)用新生兒學(xué)［M］.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2005:531-550.

［4］ 李 坤，李 琳.動(dòng)態(tài)檢測(cè)“O”型孕婦血型抗體效價(jià)的臨床意義［J］.吉林醫(yī)學(xué)，2011，32(13):2580.

［5］ Mohamed H，Turner JN，Caggana M.Biochip forseparating fetal cells from maternal circulation［J］.J Chromatogr A，2007，1162(2):187.

［6］ 李 勇，楊貴貞:人類(lèi)紅細(xì)胞血型學(xué)實(shí)用理論與實(shí)驗(yàn)技術(shù)［M］.北京:中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社，1999:175.