五種管口類纖毛蟲的形態(tài)學研究*

趙 璐，潘宏博，馬洪剛，許恒龍

（1.中國海洋大學海洋生物多樣性與進化研究所，山東 青島 266003；2.上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院，上海 201306）

管口類纖毛蟲是周叢生原生動物的重要組成部分。根據(jù)Lynn［1］的分類系統(tǒng)，其隸屬于纖毛門（Ciliophora）、葉咽綱（Phyllopharyngea）、管口亞綱（Cyrtophoria）。除具有纖毛蟲的普遍性狀外，該類群具有獨特的咽管狀口器，纖毛集中于腹側，且大核具有異質(zhì)性［2］。近10年的分子系統(tǒng)學研究普遍認為該類群是一個外延清晰的單源發(fā)生性分類階元［3－5］。目前管口亞綱已有近150種，但由于前人實驗條件和方法的制約，大部分種類缺失重要的活體信息（如：伸縮泡數(shù)目及分布，咽桿數(shù)目等）和纖毛圖式資料，急需詳盡的重描述［2，6－7］。本工作為近年我國海洋纖毛蟲多樣性調(diào)查的一部分，涉及5種已知種類，其中尖絨毛蟲、阿氏直毛蟲和近岸類偏體蟲均為南海新紀錄種。

1 材料與方法

本文所涉纖毛蟲的采樣地和采樣方法較為多樣。乙狀輪毛蟲（Trochiliasigmoides）采于青島棧橋風景區(qū)，在退潮后通過軟毛刷輕輕刷取潮間帶巖石表面積水獲得樣品；尖絨毛蟲（Microxysmaacutum）采用懸掛載玻片法［8］于青島小港的水體中取得；阿氏直毛蟲（Orthotrochiliaagamalievi）利用直接采水法采于青島第一海水浴場；近岸類偏體蟲（Agnathodysterialittoralis）采自湛江東海島養(yǎng)蝦池；斯雷腹溝蟲（Coeloperix sleighi）采于湛江沿海潮間帶退潮后的積水。樣品采集后，在實驗室內(nèi)室溫（約20℃）培養(yǎng)2～3d。具體采集、分離、培養(yǎng)及形態(tài)觀察的方法見文獻［8］，蛋白銀染色參考文獻［9］，名詞術語參照文獻［1-2］。

2 結果與討論

2.1 乙狀輪毛蟲（見圖1A-B，E-J）

2.1.1 形態(tài)學描述 活體大小約（20～28）μm×（15～20）μm，闊卵圓形；左右側扁，寬厚比約1∶2。體左側扁平，右側略隆起，具5～7條明顯的肋紋（見圖1A，F(xiàn)，長箭頭）。體后端具矛狀附著器。伸縮泡2個，位于體前后各1/3處。纖毛長約5μm。纖毛圖式極為穩(wěn)定：恒有4條右區(qū)動基列，其中2條腹前動基列幾乎等長（見圖1B，H）；圍口動基列（見圖1B，H，長箭頭）和左前動基列各2條，在口前方呈“八”字形排布（見圖1B，J，短箭頭）。大核橢球形，并列異質(zhì)，染色后大小約為10μm×5μm。蟲體運動相對緩慢，常于基質(zhì)上緩慢爬行。

2.1.2 比較與討論 輪毛蟲屬目前已知纖毛圖式的種類僅4種，即小輪毛蟲（Trochiliaminuta）、乙狀輪毛蟲、彼氏輪毛蟲（Trochiliapetrani）和膜泡輪毛蟲（Trochiliaalveolata）。它們的纖毛圖式基本一致：4列右區(qū)動基列，2列圍口動基列，2列左前動基列，其區(qū)別僅在于活體大小、背面肋紋和表膜泡有無［4，10］。

2.2 尖絨毛蟲（見圖1C-D，K-N）

2.2.1 形態(tài)學描述 活體大小約（25～45）μm×（15～25）μm，蟲體卵圓形，前端鈍圓，尾端較尖；左右側扁約1∶1.5；背方明顯向外隆起，腹方較平直（見圖1C，K）。胞口位于腹面前端，略向外突起（見圖1M，長箭頭）。矛狀附著器位于尾端（見圖1K，短箭頭）。蟲體無色透明，內(nèi)含多個食物泡。伸縮泡1枚，位于體前1/3處（見圖1N，短箭頭）。11～12條體動基列，其中腹前動基列恒為2條并延伸到體前端。最左側3條動基列相對較長，約由6～10個毛基粒組成（見圖1D，L，長箭頭），其余動基列短小，僅含3～6個毛基粒。圍口動基列2條，平行排布于胞口前方（見圖1D）。赤道動基列片段約由2～7個毛基粒組成。大核卵圓形，染色后約為10μm×5μm。該種常以附著器附著于菌絲上繞體軸旋轉(zhuǎn)。

2.2.2 比較與討論 本種為南海新紀錄種，其形態(tài)特征同Deroux［11］的原始描述完全一致，但香港種群同龔駿在2005年報道的青島種群［10］相比缺少一枚伸縮泡（1vs.2）。通常在僅具1～2個伸縮泡的管口類中，伸縮泡的數(shù)目極為穩(wěn)定。但是考慮到其他特征完全一致，且缺乏分子生物學數(shù)據(jù)，單純依靠一個性狀無法確定二者是不同種。故暫推斷是種群間的差異。

圖1 乙狀輪毛蟲（A，B，E～J）和尖絨毛蟲的活體和蛋白銀染色后顯微照片（C，D，K～N）Fig.1 Trochilia sigmoides（A，B，E～J）and Microxysma acutum （C，D，K～N）from life and after protargol impregnation

2.3 阿氏直毛蟲（見圖2A-B，E-K）

圖2 阿氏直毛蟲（A，B，E～H）和海濱類偏體蟲（C，D，L～P）的活體及蛋白銀染色后的顯微照片F(xiàn)ig.2 Orthotrochilia agamalievi（A，B，E～H）and Agnathodysteria littoralis（C，D，L～P）from life and after protargol impregnation

2.3.1 形態(tài)學描述 活體大小約40μm×20μm，染色后約為27μm×15μm，蟲體瘦卵圓形，背腹扁平，前端鈍圓，后端漸窄（見圖2A，E）。2個伸縮泡位于體右側前、后1/3處（見圖2G，長箭頭）。蟲體中央具單枚卵圓形大核（Ma），并列異質(zhì)，約12μm×7μm大?。ㄒ妶D2F，短箭頭，G）。體動基列共12～14條，在腹面連續(xù)排布。其中腹前動基列2條；其余動基列前端幾乎在胞口下方同一水平。最右側3條體動基列末端向后延伸至體緣并終止于同一水平線，其他動基列后端從右到左急劇縮短。背端動基列片段位于腹前動基列前端附近，約含5個毛基粒。圍口動基列2條，位于胞口前方“八”字排布（見圖2B，J，短箭頭）。蛋白銀染色后，附著器基部?？梢娒邮茹y顆粒（見圖2K，短箭頭）。

2.3.2 比較與討論 該種為南海新紀錄種，其同直毛蟲屬另一已知種環(huán)狀直毛蟲（Orthotrochiliapilula）［12］的區(qū)別主要在于體動基列數(shù)目（12～14列 vs.9列）和口器的咽桿數(shù)目（約40vs.6個）。

2.4 近岸類偏體蟲（見圖2C-D，L-P）

2.4.1 形態(tài)學描述 蟲體無色透明，左右側扁，活體大小約為（35～45）μm×（20～30）μm。腹面觀（見圖2M）為長橢圓形，側面觀（見圖2C，E）為近半圓形。胞口圓形，位于腹前1/4處；咽桿恒為6根。附著器矛頭狀，位于腹面末端偏左位置，長約6～8μm（見圖2L）。伸縮泡2個，位于體右側前、后1/3處。單一大核于蟲體前部。纖毛圖式如圖2J～L所示。穩(wěn)定9條右區(qū)動基列，其后端從中間向兩側逐漸縮短，最右側3列前伸超過口區(qū)并彎向背方，其他6列前端于胞口后方終止。附著器基部具若干嗜銀顆粒（見圖2K，短箭頭）。2條圍口動基列和1條口前動基列幾乎等長，橫向排于口前（見圖2D，N，短箭頭）；左前動基列恒為3條（見圖2D，O，短箭頭）。

2.4.2 比較與討論 本種為南海新紀錄種，在體形、大小和纖毛圖式方面同Deroux［11］的原始描述基本吻合，僅伸縮泡數(shù)目略有差別（2vs.1）。龔駿［10］于青島也曾采到該種，但同樣伸縮泡僅1枚?？紤]到其余性狀完全一致，伸縮泡數(shù)目在不同種群間偶爾會存在細微差異（如尖絨毛蟲，見上文），故推斷鑒定無誤。

2.5 斯雷腹溝蟲（見圖3A-H）

2.5.1 形態(tài)學描述 活體大?。?5～50）μm×（25～35）μm，蟲體卵圓形或腎形。體周邊的橫紋條帶于赤道處分成2段（見圖3B，長箭頭）。咽桿12～16條。2枚伸縮泡，對角線位（見圖3A，D）。大核橢球形，位于體中央。體動基列被口區(qū)分為前后兩部分：前部穩(wěn)定具有4條弧狀體動基列，橫向排布；后部具15或16條動基列，并在體后部形成不太明顯的縫合線（見圖3H，短箭頭）。伸縮泡2枚，對角線位，蛋白銀染色后伸縮泡開口通?？梢姡ㄒ妶D3E，長箭頭）?？趨^(qū)動基列3條，1前2后，均為雙動基系，橫向排布于口前。（見圖3G，長箭頭）。

圖3 斯雷腹溝蟲活體（A～D，F(xiàn)）及蛋白銀染色后（E，G，H）照片F(xiàn)ig.3 Photomicrographs of Coeloperix sleighi from life（A～D，F(xiàn)）and after protargol impregnation（E，G，H）

2.5.2 比較與討論 本南海種群與龔駿的青島種群［13］形態(tài)上完全吻合。

［1］Lynn D.The Ciliated Protozoa，Characterization，Classification and Guide to the Literature.3rdEdition［M］.New York：Springer，2008：348-350.

［2］龔駿，宋微波.青島沿海的管口類纖毛蟲（原生動物，纖毛門，管口目）［J］.動物分類學報，2009，34（4）：949-953.

［3］Gao S，Huang J，Li J，et al.Molecular phylogeny of the cyrtophorid ciliates（Protozoa，Ciliophora，Phyllopharyngea）［J］.Plos One，2012，7（3）：33198.

［4］Pan H，Lin X，Gong J，et al.Taxonomy of five species of cyrtophorids（Protozoa：Ciliophora）including consideration of the phylogeny of two new genera［J］.Zool J-Linn Soc，2012，164：1-17.

［5］Gong J，Stoeck T，Yi Z，et al.Small subunit RNA phylogenies show that the class Nassophorea is not Monophyletic（Phylum Ciliophora）［J］.J Eukaryot Microbiol，2009，56：339-347.

［6］龔駿.青島沿海管口目纖毛蟲的分類學研究及科屬級階元的系統(tǒng)修訂［D］.青島：中國海洋大學，2005.

［7］潘宏博.中國海洋管口目和側口目纖毛蟲多樣性的研究［D］.青島：中國海洋大學，2011.

［8］宋微波，徐奎棟.纖毛蟲原生動物形態(tài)學研究的常用方法［J］.海洋科學，1994，6：6-9.

［9］Wilbert N.Heine verbesserte technik der protargolimpragnation für ciliaten［J］.Mikrokosmos，1975，64：171-179.

［10］龔駿，沃倫 A，宋微波.管口類［M］.//宋微波，沃倫 A，胡曉鐘.中國黃渤海的自由生纖毛蟲.第一版.北京：科學出版社，2009：49-92.

［11］Deroux G.Le plan cortical des Cyrtophorida.III.Les structures différenciatrices chez les Dysteriina［J］.Protistologica，1976，12：505-538.

［12］Song W.On two marine cyrtophorid ciliates from China，with description ofChlamydonelladerouxinov.spec.andOrthotrochiliapilula（Deroux，1976）nov.comb.，and reestablishment of the genusOrthotrochilianov.gen.（Protozoa，Ciliophora，Cyrtophorida）［J］.Hydrobiologia，2003，499：169-177.

［13］Gong J，Song W.Re-establishment of the cyrtophorid genusCoeloperixDeroux，nov.gen.，with a description ofCoeloperix sleighinov.spec.（Protozoa，Ciliophora，Cyrtophorida）［J］.Europ J Protist，2004，40：175-181.