不同方向捻轉補瀉手法對血虛證大鼠血紅蛋白、網織紅細胞百分率的影響＊

褚亞宇 肖敏佳 谷世喆 劉清國 王朝陽

北京中醫(yī)藥大學針灸推拿學院（北京100029）

捻轉補瀉手法作為針刺基本補瀉手法之一，是臨床應用最廣，也是學者爭論最多的一種針刺手法。關于捻轉補瀉手法的定義，陸壽康編著的針灸教材中規(guī)定：拇指向前左轉用力為補，拇指向后右轉用力為瀉［1］，認為捻轉補瀉手法主要與捻轉方向及捻轉力度相關。諸多臨床及實驗研究證明，補瀉手法的療效是客觀存在的［2］［3］。捻轉力度的不同，可直接導致補瀉效應的差異［4－6］；至于捻轉方向是否與捻轉補瀉手法直接相關，以往的臨床及實驗研究甚少。本實驗采用放血加限食法復制血虛證動物模型，觀察左右利手不同捻轉方向對血虛證大鼠Hb、RETIC%的影響，探討捻轉補瀉手法與具體捻轉方向間的關系。

1 材料與方法1.1 實驗動物 Wistar大鼠（SPF級）80只，雄性，體重180～200g，由北京維通利華動物中心提供（許可證號：SCXK（京）2012－0001）。北京中醫(yī)藥大學提供標準實驗室與動物房，室溫為22℃～23℃，濕度40%～50%，自由飲食。

1.2 主要試劑及儀器 德國 Greiner非可替0.5mL及2mL真空采血管（購于北京康暉煜生物科技有限公司）。

直徑0.25mm、長13mm毫針（天津華鴻醫(yī)材有限公司制）；XE－5000型全自動血細胞分析儀（日本sysmex公司制）；電子稱（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司制）；1N圓筒測力計（余姚市低塘街道輝旺塑料模具廠制）；自制針具：自制5mm寬紙條固定于針體上端，紙條顏色前面紅色，后面綠色，控制捻轉幅度及捻轉深度。

1.3 分組與造模 購置大鼠后，常規(guī)飼養(yǎng)3d，待適應環(huán)境后，根據(jù)隨機數(shù)字表，將購置大鼠隨機分為7組：A組（10只），B組（10 只），C 組（12只），D 組（12只），E 組（12 只），F(xiàn) 組（12只），G組（12只），后5組統(tǒng)稱為治療組。除A組外，其余6組均采用放血加限食法制成血虛證動物模型［7］：以75%酒精擦拭鼠尾，待尾部血管充血后，剪斷距尾尖，長度為2～3mm，隔日1次，每只每次放血約1.5mL，共計5次。自造模之日起改變正常喂養(yǎng)規(guī)律，半量與足量飲食隔日交替給予。制成的血虛證大鼠外觀精神萎靡、毛枯蓬松、唇色淡白、食欲下降、體重減輕，外周血紅細胞計數(shù)及血紅蛋白含量降低達20%以上。

1.4 取穴 大鼠“足三里”穴［8］：膝關節(jié)后外側，約腓骨小頭下5mm。

1.5 各組處置方法 治療前，將大鼠裝入自制的布袋中固定，充分暴露治療穴位。造模完成后第2天開始針刺，隔日1次，共計10次。

A組：不進行任何處理，正常同步喂養(yǎng)。

B組：僅造模，不針刺治療，與各針刺組同步捆綁固定，每次20min。

C組：造模后針刺大鼠雙側“足三里”，刺入5mm，留針20min，不行補瀉手法。

D組：右利手操作，造模后針刺大鼠雙側“足三里”，進針后，按預先錄制好的操作口令操作：右手前捻時用力重，力度約0.08N（彈簧測力計測得），還原力輕，捻轉幅度360°/次（用自制紙條不同的顏色控制轉動幅度），捻轉頻率60次/min（機械鬧鐘每秒響4次，規(guī)定捻轉頻率與機械鬧鐘一致：前捻耗時0.25s，停頓用時0.5s，還原用時0.25s），捻轉深度控制在5～8mm（自制紙條固定了捻轉深度），每側做1min×2次手法，剩余時間留針，共20min。

E組：右利手操作，右手后捻用力重，還原力輕，捻轉力度、幅度、深度同右手前捻組，捻轉頻率規(guī)定：后捻耗時0.25s，停頓用時0.5s，還原用時0.25s。

F組：左利手操作，左手前捻用力重，還原力輕，捻轉幅度、力度、深度及頻率同右手前捻組。

G組：左利手操作，左手后捻用力重，還原力輕，其余操作同右手后捻組。

1.6 檢測指標 分別在治療前1d、治療第7天、14天、21天，檢測大鼠血液中Hb及RETIC%。每次剪去大鼠尾部約1mm，每只每次取血0.2mL，輕搖以確保無凝血及溶血，4h內送檢。

1.7 統(tǒng)計學處理 應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理，各組數(shù)據(jù)均采用均數(shù)加減標準差（±s）的形式表示，2組間比較用t檢驗，多組比較用ANOVA方差分析或者 Welch＇s ANOVA方差分析，組間兩兩比較用SNK檢驗，以P＜0.05作為具有顯著性差異的標準，以P＜0.01作為具有極顯著性差異的標準。

2 結 果2.1 不同治療時間點各組大鼠Hb值的比較針刺處理前，與A組相比，其余6組大鼠外周血中Hb值明顯降低，差異顯著（P＜0.01），說明造模成功；此外，B、C、D、E、F、G各組組間比較，各組間無顯著性差異（P＞0.05），說明這6組均衡可比。

針刺治療第7d，C、D、E、F、G這5組Hb值明顯高于B組，有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），此外，A、B、C、D、E、F、G各組組間比較，C、D、F組3組之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），A、E、G3組之間差異不明顯（P＞0.05），但前3組Hb含量顯著高于后3組（P＜0.05）。

針刺治療第14d，A組Hb值低于其余6組，有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），但B、C、D、E、F、G各組組間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結果見圖1。

2.2 不同治療時間點各組大鼠RETIC%的比較 針刺處理前，與A組相比，其余6組大鼠RETIC%明顯升高，差異顯著（P＜0.01）；此外，B、C、D、E、F、G各組組間比較，各組間無顯著性差異（P＞0.05），說明這6組均衡可比。

針刺治療第7d、14d、21d，各組大鼠RETIC%均無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。

圖1 不同治療時間點各組大鼠Hb值的比較

圖2 不同治療時間點各組大鼠RETIC%的比較

3 討 論中醫(yī)血虛證的現(xiàn)代研究中，往往將其與現(xiàn)代醫(yī)學的“貧血”相對稱，貧血的診斷主要依靠外周血的血紅蛋白（Hb）及網織紅細胞百分率（RETIC%）檢測。本研究中，通過觀察左右利手不同捻轉方向對血虛證模型大鼠Hb、RETIC%的效應差異，探討捻轉補瀉手法與捻轉方向的關系。

在本實驗中，對于大鼠Hb的檢測，發(fā)現(xiàn)在針刺治療第7d，各組差異最敏感：與模型組相比，留針組、右手前捻組、右手后捻組、左手前捻組、左手后捻組大鼠 Hb均明顯升高（P＜0.05），說明了針刺手法的有效性及其良性調節(jié)作用。同時，留針組、右手前捻組、左手前捻組三組大鼠Hb變化無明顯差異（P＞0.05），右手后捻組、左手后捻組兩組大鼠Hb變化不明顯（P＞0.05），但前三組大鼠 Hb含量高于后兩組（P＜0.05），說明捻轉補瀉手法與左右捻針方向無關，無論何手持針，只要是拇指前捻用力效應一致，則為“補”；拇指后捻用力效應一致，即為“瀉”。

此外，對于RETIC%的檢測，除了造模結束后，各造模組大鼠RETIC%明顯升高外，其余各時間段檢測，各組同空白組相比，無論針刺與否，差異均無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。說明因單純失血所致的血虛證，對骨髓的造血機能的影響較小。

綜上所述，針刺對機體有良性調整作用，在虛證的情況下，無論行“補法”還是“瀉法”，針刺治療均可促進機體恢復。但是，捻轉補法與捻轉瀉法還是存在明顯的效應差異，“補法”優(yōu)于“瀉法”。此外，捻轉補瀉的方向需要建立統(tǒng)一的標準：拇指前捻用力為“補”，拇指后捻用力為“瀉”，與具體向左或者向右水平方向無關。

［1］陸壽康.刺法灸法學［M］.第2版.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2007：70.

［2］支建梅，王朝陽，王 麗，等.不同刺激量捻轉補瀉手法對應激性高血壓大鼠頸交感神經放電的影響［J］.中醫(yī)雜志，2009，50（9）：811－813.

［3］陳 中.太沖穴針刺捻轉瀉法對原發(fā)性高血壓即刻效應影響的臨床研究 ［D］.北京：北京中醫(yī)藥大學針灸推拿學院，2013.

［4］張露芬.實驗針灸學［M］.北京：化學工業(yè)出版社，2010：81－84.

［5］張月.捻轉補瀉手法對自發(fā)性高血壓大鼠心肌p38/MAPK信號轉導通路影響的機制研究 ［D］.北京：北京中醫(yī)藥大學針灸推拿學院，2013.

［6］睢明河，周宇姝，馬文珠，等.大小刺激量捻轉補瀉法對血虛證大鼠紅細胞計數(shù)的影響［J］.針刺研究，2004，29（3）：213－216.

［7］苗明三，方曉艷，孫艷紅.血虛動物模型復制的思考［J］.光明中醫(yī)，2003，18（10）：8－9.

［8］王 芳.石氏捻轉補瀉手法對健康小鼠“足三里”穴位局部及遠端能量代謝相關酶類影響的實驗研究 ［D］.天津：天津中醫(yī)學院，2001：5.