枯草芽孢桿菌水分散粒劑防治黃瓜立枯病效果及對黃瓜的促生作用

黃大野+姚經(jīng)武+朱志剛等

摘要：研究枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）水分散粒劑防治黃瓜立枯病效果及對黃瓜的促生作用。盆栽試驗表明，1012 CFU/g 枯草芽孢桿菌水分散粒劑對黃瓜立枯病具有良好的防效并具有一定的促生作用。在濃度為2 000 μg/mL和1 000 μg/mL時，對黃瓜立枯萎病的防效為71.48%和52.02%。在濃度為2 000 μg/mL時，黃瓜發(fā)芽率、株高、根長和鮮重分別較對照提高了10.57%、28.58%、29.63%和27.46%。

關(guān)鍵詞：枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）；水分散粒劑；黃瓜立枯??；促生作用

中圖分類號：S436.5 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2014）18-4327-02

立枯絲核菌（Rhizoctonia solani）是一種毀滅性的土傳病害病原菌，能侵染多種大田和園藝作物，如棉花、水稻和黃瓜等，并引起嚴(yán)重減產(chǎn)[1-3]。目前預(yù)防由立枯絲核菌引起的病害主要依靠栽培技術(shù)[4]，當(dāng)危害特別嚴(yán)重時，往往要使用化學(xué)殺菌劑[5]。然而，目前的栽培技術(shù)和化學(xué)防治不能完全有效控制病害的發(fā)生，并且化學(xué)藥劑的使用會造成環(huán)境污染。

生物防治是防治立枯病的一種有效和環(huán)境友好的方法。多種微生物，如深綠木霉（Trichoderma atroviride）、哈慈木霉（Trichoderma harzianum）、熒光假單胞桿菌（Pseudomonas fluorescens）和枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）已經(jīng)被證明能有效防治由立枯絲核菌引起的植物病害，其中，應(yīng)用最多的是枯草芽孢桿菌[6-9]。目前，國內(nèi)外已經(jīng)有多種優(yōu)良性狀的野生菌株登記用于防治多種作物的葉部和土傳病害，生產(chǎn)上所使用的劑型多為可濕性粉劑，本研究利用自主研發(fā)的枯草芽孢桿菌環(huán)保型新劑型水分散粒劑防治黃瓜立枯病，為枯草芽孢桿菌水分散粒劑推廣應(yīng)用于防治黃瓜立枯病奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

病原菌：立枯絲核菌，由湖北省生物農(nóng)藥工程研究中心分離保存。

供試藥劑：1012 CFU/g枯草芽孢桿菌水分散粒劑，由湖北省生物農(nóng)藥工程研究中心研制；枯草芽孢桿菌可濕性粉劑Serenade，由美國AgraQuest公司提供，50%多菌靈可濕性粉劑，由江蘇百靈農(nóng)化股份有限公司生產(chǎn)。

供試植物：黃瓜，品種為中農(nóng)8號

1.2 方法

1.2.1 枯草芽孢桿菌水分散粒劑防治黃瓜立枯病試驗 將立枯絲核菌從保存斜面轉(zhuǎn)到PDA培養(yǎng)基進(jìn)行活化，27 ℃培養(yǎng)5 d， 隨后將其加入含有3%風(fēng)干燕麥粉的砂土進(jìn)行混合，接種的混合物在27 ℃和20%濕度條件下培養(yǎng)21 d，然后將培養(yǎng)物以3∶100比例與草炭土混合[10]，成為帶菌土，用于播種黃瓜。

將黃瓜種子浸泡于3%次氯酸鈉水溶液中10 min，然后用無菌水反復(fù)沖洗5次。隨后將黃瓜種子放于墊有紗布的培養(yǎng)皿中，28 ℃催芽48 h。將發(fā)芽種子分別浸種于2 000 μg/mL 枯草芽孢桿菌水分散粒劑、1 000 μg/mL 枯草芽孢桿菌水分散粒劑、500 μg/mL 多菌靈和無菌水中2 h，然后播種于裝有帶菌土的穴盤中，溫室條件下常規(guī)管理，播種10 d后觀察幼苗發(fā)病情況并統(tǒng)計病株數(shù)。每個處理3次重復(fù)，每個重復(fù)20株苗。

1.2.2 枯草芽孢桿菌對黃瓜的促生作用試驗 對黃瓜種子進(jìn)行表面消毒，方法同“1.2.1”，將消毒種子分別浸種于2 000 μg/mL枯草芽孢桿菌水分散粒劑、2 000 μg/mL Serenade和無菌水中，25 ℃浸種24 h后催芽并統(tǒng)計各處理發(fā)芽率。每個處理3次重復(fù)，每個重復(fù)100粒種子。將每個處理芽長一致的種子播種于育苗缽中，溫室常規(guī)管理，在試驗過程中不添加任何營養(yǎng)物質(zhì)。20 d后測定株高、根長、鮮重，每個處理3次重復(fù)，每個重復(fù)20株苗。計算種子活力，種子活力=發(fā)芽率×（平均根長+平均株高）[11]。

2 結(jié)果與分析

盆栽試驗結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌水分散粒劑浸種對黃瓜立枯病具有良好的防治效果（表1），在2 000 μg/mL條件下浸種對黃瓜立枯病的防效達(dá)到71.48%，1 000 μg/mL時防效也達(dá)到50%以上，防效低于對照化學(xué)藥劑多菌靈。

枯草芽孢桿菌水分散粒劑對黃瓜具有明顯的促生作用（表2），2 000 μg/mL浸種處理，種子發(fā)芽率從82.00%提高到90.67%，發(fā)芽率、株高、根長和鮮重分別較對照提高了10.57%、28.58%、29.63%和27.46%，并且種子活力有了明顯的提高，促生作用與商品化的枯草芽孢桿菌制劑Serenade相當(dāng)。

3 討論

枯草芽孢桿菌是一種低毒微生物殺菌劑，對多種作物表現(xiàn)出良好的防病與促生作用[12]。但目前生產(chǎn)上常用的劑型主要是10億活芽孢/g可濕性粉劑、1 000億活孢子/g可濕性粉劑，劑型較為單一?？蓾裥苑蹌┡渲茋姙⒁簳r容易發(fā)生藥粉飛揚(yáng)，對操作人員造成危害，包裝袋內(nèi)殘剩的藥粉污染環(huán)境，而水分散粒劑則是最具發(fā)展前景的劑型之一，可以避免可濕性粉劑中粉塵對操作者的毒害以及對環(huán)境的污染，并且性能優(yōu)異，生物活性較高[13]。

本研究中的枯草芽孢桿菌水分散粒劑是一種較為理想的微生物殺菌劑劑型，其在活體條件下對黃瓜立枯病表現(xiàn)出良好的防病與促生作用，其田間防治效果還有待進(jìn)一步的研究。同時，對其他病害，特別是葉部病害的防治效果需要進(jìn)一步的研究，為其進(jìn)一步的推廣應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

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