電子交叉配血技術(shù)中供血者不規(guī)則抗體篩查的臨床研究

劉家瑞，王遠(yuǎn)杰，陳 亮，李紅梅，馮俊程

(四川省遂寧市中心醫(yī)院輸血科，四川 遂寧 620900)

電子交叉配血是指在供受血者血型鑒定和紅細(xì)胞血型抗體篩查(簡稱抗體篩查)的基礎(chǔ)上，直接由計(jì)算機(jī)系統(tǒng)為患者選擇ABO/RhD血型相容的血液，而不再進(jìn)行傳統(tǒng)血清學(xué)交叉配血試驗(yàn)。這一技術(shù)在部分發(fā)達(dá)國家已使用多年，并展現(xiàn)出提高輸血安全的重要作用，以及較之傳統(tǒng)血清學(xué)交叉配血更多的優(yōu)勢［1］。電子交叉配血的優(yōu)點(diǎn)包括節(jié)省人力和減少工作量(相當(dāng)于65%血清學(xué)配血的工作量)［2］，減少輸血需求，縮短配血時間，降低血清學(xué)交叉試驗(yàn)對基本耗材和試驗(yàn)設(shè)備的經(jīng)費(fèi)支出，而且因?yàn)椴挥妙A(yù)留指定的血清學(xué)交叉配血試驗(yàn)相容的血液，可以更靈活地運(yùn)用資源，減少血液過期報(bào)廢。最重要的是，可以減輕血庫技術(shù)員的工作壓力。如果工作人員能嚴(yán)格遵守規(guī)定及執(zhí)行相關(guān)操作程序，電子交叉配血的安全性高于血清學(xué)交叉配血，且工作效率更高［3］，用計(jì)算機(jī)進(jìn)行信息核對和血液發(fā)放，不但能降低輸血費(fèi)用，還能大幅減少人工操作環(huán)節(jié)。

開展電子交叉配血技術(shù)，除供受血者ABO/RhD血型需一致外，二者抗體篩查結(jié)果還必須是陰性。受血者抗體篩查為臨床輸血的常規(guī)試驗(yàn)，但供血者抗體篩查尚無相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)與要求，加之有傳統(tǒng)血清學(xué)交叉配血作為輸血安全的補(bǔ)充環(huán)節(jié)，臨床不會對供血者進(jìn)行抗體篩查。為探索臨床電子交叉配血技術(shù)應(yīng)用的安全性與可行性，我們對供血者血液進(jìn)行抗體篩查的研究。

1 資料與方法

1.1 血液樣本 2011年3月至2012年12月遂寧市中心血站提供的紅細(xì)胞成分，共14746袋。取供血者血袋辮子于玻璃試管內(nèi)，用干凈竹簽去除血凝塊，避免溶血。3000 r/min離心5 min，分離血漿，制作血樣。

1.2 試劑與儀器 微柱凝集卡(IgG、C3d檢測卡、血型鑒定卡)為美國強(qiáng)生公司產(chǎn)品;抗體篩查試劑紅細(xì)胞為市售4個不同廠家產(chǎn)品，其中2種為進(jìn)口試劑紅細(xì)胞，2種為國產(chǎn)試劑紅細(xì)胞;譜細(xì)胞(10種)，抗-A、抗-B試劑、抗-D試劑均為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司產(chǎn)品。凝聚胺試劑盒為臺灣BASO公司產(chǎn)品。主要儀器為全自動血型鑒定及交叉配血分析儀，血型工作站均為美國強(qiáng)生公司產(chǎn)品。血庫專用離心機(jī)為臺灣BASO公司產(chǎn)品。

1.3 輸血管理系統(tǒng) 安全輸血質(zhì)量管理智能化軟件系統(tǒng)(簡稱輸血管理系統(tǒng))為重慶圖珀信息技術(shù)有限公司產(chǎn)品，參考文獻(xiàn)［4］進(jìn)行電子交叉配血功能模塊開發(fā)，并實(shí)現(xiàn)與全自動血型鑒定及交叉配血分析儀的連接。

1.4 方法

1.4.1 血型檢測 參考文獻(xiàn)［5］用鹽水介質(zhì)法先行ABO血型正反定型與RhD血型鑒定，以確定供血者血型的正確性。

1.4.2 抗體篩查 用全自動血型鑒定及交叉配血分析儀(微柱凝集法)進(jìn)行抗體篩查，結(jié)果陰性者，審核后自動傳入輸血管理系統(tǒng)。結(jié)果陽性者，用譜細(xì)胞進(jìn)行抗體特異性鑒定，另行處理。

1.4.3 交叉配血 電子交叉配血規(guī)則:①患者必須至少有2次相符的ABO/RhD血型鑒定結(jié)果(ABO血型正反定型不符者不采用電子交叉配血)，其中1次必須來自當(dāng)前的標(biāo)本;②患者抗體篩查必須為陰性，且沒有抗體篩查陽性的既往記錄;③計(jì)算機(jī)系統(tǒng)必須能夠阻止不相容血液的發(fā)放;④計(jì)算機(jī)系統(tǒng)及其它關(guān)鍵設(shè)備必須經(jīng)過嚴(yán)格確認(rèn);⑤必須有確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確錄入和數(shù)據(jù)自動傳輸?shù)目刂瞥绦?⑥計(jì)算機(jī)能對患者既往不符合電子交叉配血條件的信息進(jìn)行報(bào)警提示;⑦供血者ABO/RhD血型鑒定正確，抗體篩查陰性。供血者抗體篩查陰性，與符合電子交叉配血規(guī)則受血者由輸血管理系統(tǒng)根據(jù)所需血液成分及數(shù)量、庫存血液情況等自動顯示供血者列表供選擇，完成電子交叉配血程序。傳統(tǒng)血清學(xué)交叉配血試驗(yàn)采用凝聚胺法，平行操作，主側(cè)不相容者另行處理，次側(cè)不相容者，用譜細(xì)胞進(jìn)行抗體特異性鑒定。

2 結(jié)果

14746袋供血者紅細(xì)胞成分，ABO/RhD血型檢測符合率100%;篩查出不規(guī)則抗體陽性12例，陽性率0.08%;用譜細(xì)胞進(jìn)行抗體特異性鑒定，結(jié)果見表1。去除抗體篩查陽性供血者血液12份，余14734份血樣均符合電子交叉配血規(guī)則，由計(jì)算機(jī)實(shí)施電子交叉配血，用凝聚胺法進(jìn)行傳統(tǒng)血清學(xué)交叉配血平行檢測，未發(fā)現(xiàn)次側(cè)不相容者。13215份供血者紅細(xì)胞成分發(fā)出，無溶血性輸血不良反應(yīng)發(fā)生。

表1 供血者不規(guī)則抗體分類結(jié)果

3 討論

早在1997年，瑞典斯德哥爾摩開始電子交叉配血的臨床應(yīng)用，并報(bào)道了電子交叉配血及電子血液發(fā)放的控制。當(dāng)時他們已經(jīng)擁有12年使用電子交叉配血的經(jīng)驗(yàn)，發(fā)出超過250000 U的血液，認(rèn)為電子交叉配血比傳統(tǒng)的抗球蛋白法更為安全［6］。經(jīng)過部分發(fā)達(dá)國家臨床多年的應(yīng)用，電子交叉配血的優(yōu)點(diǎn)得到廣泛認(rèn)同:節(jié)省人力和減少工作量，減少輸血需求，縮短配血時間及降低血清學(xué)交叉試驗(yàn)對基本耗材和試驗(yàn)設(shè)備的經(jīng)費(fèi)支出。電子交叉配血技術(shù)臨床應(yīng)用在國內(nèi)尚屬空白，更無相關(guān)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，臨床應(yīng)用的安全保障如何仍需積極探索。由于供受血者ABO/RhD血型可通過二次血型鑒定，確保其相容性，所以供受血者抗體篩查就成為電子交叉配血技術(shù)的一個關(guān)鍵要素［1］。

雖然供血者不規(guī)則抗體檢出率低于患者［7］，但仍然會對輸血安全以及輸血試驗(yàn)產(chǎn)生影響［8］，對其進(jìn)行常規(guī)檢測也是實(shí)施電子交叉配血的前提條件。本研究針對供血者不規(guī)則抗體進(jìn)行檢測，共檢出12份血樣不規(guī)則抗體陽性，分屬4個血型系統(tǒng)。其中以Rh血型系統(tǒng)最常見，占41.7%(5/12)，MNS血型系統(tǒng)占25.0%(3/12)，冷凝集素占33.3%(4/12)。不規(guī)則抗體陽性率0.08%，遠(yuǎn)低于任本春等［8］的報(bào)道，與李彤彤等［7］報(bào)道接近。在檢出的抗體中，Rh系統(tǒng)抗體多為IgG，少數(shù)屬IgM抗體，其主要會引起遲發(fā)性溶血性輸血不良反應(yīng)，抗-c僅次于抗-D。大多數(shù)的抗-M為自然發(fā)生抗體，在37℃無臨床意義［10］，但與冷凝集素一樣會干擾血型鑒定與交叉配血，也不應(yīng)該實(shí)施電子交叉配血。

目前國內(nèi)抗體篩查試劑紅細(xì)胞的設(shè)計(jì)與制作是以血清學(xué)交叉配血試驗(yàn)為前提，抗原涵蓋上存在不足。本次觀察所用試劑紅細(xì)胞為臨床常用的4個廠家產(chǎn)品，其中兩種為進(jìn)口，兩種為國產(chǎn)試劑紅細(xì)胞。一種國產(chǎn)試劑紅細(xì)胞標(biāo)明8個血型系統(tǒng)，但Mur、Dia、Dib抗原標(biāo)注為“不確定”。另一種國產(chǎn)試劑紅細(xì)胞標(biāo)明檢測有7個血型系統(tǒng)，也未標(biāo)注Mur抗原。兩種進(jìn)口紅細(xì)胞試劑雖標(biāo)注有9個血型系統(tǒng)，但卻忽略蒙古人種Diego血型系統(tǒng)與Mur抗原。因Diego血型表達(dá)幾乎限制在蒙古人種和土著美洲人群中［11］，Mur抗原在白種人和非洲人中很少見，但中國人7%、泰國人10%為陽性［10］。這些血型系統(tǒng)抗原對應(yīng)的抗體均會引起溶血性輸血不良反應(yīng)或紅細(xì)胞輸注無效。另外一些抗體如抗-K可引起重度溶血性輸血反應(yīng)及新生兒溶血病，抗-Lub可引起輸入的Lu(b+)紅細(xì)胞破壞，引起溶血性輸血反應(yīng)［12］。如供血者存在上述抗體，現(xiàn)行試劑紅細(xì)胞會造成漏檢，實(shí)施電子交叉配血將會給受血者帶來輸血安全隱患。由于電子交叉配血和傳統(tǒng)血清學(xué)交叉配血相同，均不能檢測受檢者血漿中的低頻率抗體［13］，抗體漏檢不可避免，其漏檢情況除受抗體性質(zhì)、效價(jià)以及檢測方法等因素影響外，還與抗體篩查試劑紅細(xì)胞抗原譜涵蓋范圍密切相關(guān)。若要開展真正意義上的電子交叉配血技術(shù)，在國內(nèi)現(xiàn)有抗體篩查試劑紅細(xì)胞抗原譜基礎(chǔ)上，還應(yīng)針對性的增加蒙古人種表達(dá)率相對較高的抗原，如 Mur、Dia、Dib、Lub、K 抗原等，才能最大限度降低其供受血者不規(guī)則抗體的漏檢率，確保電子交叉配血技術(shù)在臨床的安全應(yīng)用。

［1］郭永建，池泉.電子交叉配血與電子發(fā)血［J］.中國輸血雜志，2007，20(6):523-526.

［2］Chapman JF，Milkins C，Voak D.The computer cross match:a safe alternative to the serological cross match［J］.Transfus Med，2000，10(4):25l-256.

［3］黃杰輝，劉赴平.電子交叉配血的應(yīng)用基礎(chǔ)和未來發(fā)展［J］.中國輸血雜志，2012，25(7):622-623.

［4］Judd WJ.Requirements for the electronic cross match［J］.Vox Sang，1998，74(Suppl 2):409-417.

［5］葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.第3版.南京:東南大學(xué)出版社，2006:246-266.

［6］Kulkarni N，Ali M，Haray PN，et al.Electronic Cross Matching System.Is Routine Pre-Operative Cross Matching of Blood for Colorectal Resections Required Anymore［J］.Endoscopy，2006，38(10):937-956.

［7］李彤彤，曹盟，王維，等.天津地區(qū)不規(guī)則抗體發(fā)生率［J］.中國輸血雜志，2007，20(5):405.

［8］鄔文婧，練正秋，許基平.微柱凝膠法交叉合血次側(cè)不合原因分析及臨床輸血策略［J］.實(shí)用醫(yī)院臨床雜志，2013，10(1):143-144.

［9］任本春，池泉.獻(xiàn)血者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩查的必要性探討［J］.中國輸血雜志，2010，23(1):126-127.

［10］胡麗華.主編.臨床輸血檢驗(yàn)［M］.第2版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:36.

［11］李勇，楊貴貞.人類紅細(xì)胞血型學(xué)實(shí)用理論與實(shí)驗(yàn)技術(shù)［M］.北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社，1999:109.

［12］楊天楹，楊成民，田兆嵩.臨床輸血學(xué)［M］.北京醫(yī)科大學(xué)、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1993:74-76.

［13］Butch SH，Judd WJ，Steiner EA，et al.Electronic verification of donor-recipient compatibility:the computer crossmatch［J］.Transfusion，1994，34(2):105-109.