3種大孔吸附樹脂對黃芩苷的靜態(tài)飽和吸附量和脫附率

雷燕妮+張小斌

摘要：以黃芩苷含量為考察指標，用高效液相色譜法測定其含量，通過黃芩上柱液的澄清處理方法，比較3種大孔吸附樹脂對黃芩苷的吸附量和脫附率。結(jié)果表明，3種樹脂對黃芩苷的吸附能力大小為AB-8樹脂>LSA-40樹脂>D101樹脂；選用50%乙醇溶液作為洗脫劑效果最好；AB-8樹脂純化黃芩苷效果最好，黃芩苷純度約90%。

關鍵詞：黃芩苷；大孔樹脂；靜態(tài)飽和吸附量；脫附率；純分化離工藝

中圖分類號：R284.2 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0279-02

黃芩別名土金茶根、山茶根，為唇形科植物黃芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根^[1-2]，其有效成分為黃芩苷、黃芩苷元、漢黃芩素、漢黃芩苷、β-谷甾醇等^[3]。黃芩苷、黃芩素產(chǎn)品不但可被應用于天然植物藥領域，還被應用于人體及動物病防治，惡性疾病防治以及化妝品等眾多領域，應用領域非常廣泛，市場前景廣闊，已成為國內(nèi)外研究熱點。但有關大孔樹脂對黃芩苷提取工藝的研究不多^[4]。大孔樹脂是一種有機高分子聚合物，不溶于酸、堿及各種有機溶劑，具有較大的孔徑與比表面積，內(nèi)部具有三維空間立體孔結(jié)構。大孔樹脂具有物理化學穩(wěn)定性高、選擇性好、比表面積大、吸附容量大、吸附速度快、解吸條件溫和、再生處理方便、易構成閉路循環(huán)、使用周期長、節(jié)省費用等諸多優(yōu)點，在天然產(chǎn)物的提取分離工作中得到廣泛應用^[5-9]。本研究篩選黃芩苷富集與純化的最佳大孔樹脂，以期為進一步研究黃芩苷的純化分離工藝提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試黃芩采自陜西省柞水縣，經(jīng)西北大學生命科學學院植物教研室鑒定；黃芩苷對照品（批號：0751-9909），由中國藥品生物制品檢定所提供；大孔樹脂AB-8、D101、LSA-40，由西安藍曉科技開發(fā)有限公司提供；鹽酸、氫氧化鈉、乙醇、硫酸鋁鉀等均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器

日本島津LC-20A型高效液相色譜系統(tǒng)，包括檢測器SPD-20A、高壓恒流泵LC-20A、工作站LC Solution；FZ102植物粉碎機，天津市泰斯特儀器有限公司；H·H·S21-6C型電熱恒溫水浴鍋，上海醫(yī)療器械五廠；ME235S-型電子分析天平，德國賽多利斯；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；SHB-C型循環(huán)水式多用真空泵，鄭州長城科工貿(mào)有限公司；101A-2型鼓風干燥箱，上海市實驗儀器總廠；DE-10型蒸餾水器，上海悅豐儀器儀表有限公司；Milli-Q型超純水制備儀，美國Bedford公司；標準藥篩 1-9號，上虞市大亨橋化驗儀器廠；THZ-C型搖床，江蘇太倉市華美生化儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 黃芩上柱液的制備

稱取20目黃芩粗粉100 g，用 15倍質(zhì)量的75%乙醇溶液于85 ℃熱回流提取2次，每次 1.5 h，用4層紗布進行粗濾，再進行細濾，濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進行濃縮至無醇味，加入蒸餾水稀釋，過濾除去不溶物得上柱清液。用該上柱清液上柱分離多次，發(fā)現(xiàn)樹脂吸附效果不佳，其主要原因是該上柱清液中仍含大量果膠類等雜質(zhì)，嚴重影響樹脂對黃芩苷的吸附能力，因此設計如下上柱清液澄清處理試驗。

分別稱取5 g黃芩粉末3份，各加入pH值11的水溶液 50 mL，于85 ℃熱回流提取2 h。對其中1份樣品加入原料質(zhì)量1%的硫酸鋁鉀攪拌均勻，保溫靜置0.5 h后過濾，濾液用水定容至100 mL（A1處理）；對另1份樣品過濾后加入濾液等量的95%乙醇溶液進行醇沉，2～3 h后過濾，濾液濃縮至無醇味后用水定容至100 mL（A2處理）；對最后1份樣品過濾后直接用水定容至100 mL（A3處理）。

分別稱取5 g黃芩粉末3份，各加入10倍質(zhì)量的75%乙醇溶液于85 ℃熱回流提取2 h。對其中1份樣品加入原料質(zhì)量1%的硫酸鋁鉀攪拌均勻，保溫靜置0.5 h后過濾，濾液用水定容至100 mL（B1處理）；對另1份樣品過濾后濃縮至無醇味，加入濾液等質(zhì)量的95%乙醇溶液進行醇沉，2～3 h后過濾，濾液濃縮至無醇味后用水定容至100 mL（B2處理）；對最后1份樣品過濾后直接用水定容至100 mL（B3處理）。

吸取5 mL提取液，用水定容至50 mL后進行黃芩苷含量測定，并進行澄清度對比分析以及樹脂分離試驗，確定最佳澄清處理方法。

1.3.2 大孔吸附樹脂的預處理

一般來說，極性小的有機化合物適于在非極性樹脂上分離，極性較大的有機化合物適于在中極性、極性的樹脂上分離。具有酚羥基和糖苷鏈的黃酮類化合物具有一定的極性、親水性和較強的氫鍵生成能力，易被弱極性和極性樹脂吸附。黃芩苷是一類有葡萄糖醛酸結(jié)構的黃酮類化合物，具有一定的親水性和親脂溶性，適于D101、AB-8、LSA-40等弱極性或中極性樹脂的吸附。表1是大孔吸附樹脂的物理性能。

的純化試驗，結(jié)果表明：AB-8樹脂吸附量大，解吸率高，最佳解吸乙醇濃度為50%，因此AB-8樹脂是一種純化黃芩苷性能良好的樹脂，且該樹脂可以再生利用，成本較低，生產(chǎn)周期較短，適宜大規(guī)模生產(chǎn)，值得推廣應用。

在純化黃芩苷的生產(chǎn)工藝中，為了充分利用大孔樹脂，除選擇性能優(yōu)良的大孔樹脂外，還要配合最佳的工藝條件，考慮原液濃度對吸附的影響、上樣量對吸附的影響、流速對吸附的影響等，這方面工作還有待進一步完善，以促進大孔樹脂在中藥制藥工業(yè)中的應用。

參考文獻：

[1]中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志：六十五卷第二分冊[M]. 北京：科學出版社，1977：136-219.

[2]中國科學院西北植物研究所.秦嶺植物志：第一卷第四冊[M]. 北京：科學出版社，1983.

[3]高學敏.中藥學[M]. 北京：中國中醫(yī)藥出版社，2002：406-407.

[4]劉瑞源，鐘 平，戴開金. 大孔吸附樹脂提取中草藥有效成分的研究進展[J]. 時珍國醫(yī)國藥，2004，15（6）：封3-封4.

[5]周德慶，曾 駱. 黃芩總黃酮的提取工藝研究[J]. 華西藥學雜志，2003，18（1）：78-79.

[6]貝偉劍，彭文烈，羅 杰. 柿葉黃酮的大孔吸附樹脂分離提純富集[J]. 中成藥，2005，27（3）：257-261.

[7]向海艷，周春山，雷啟福，等. 大孔吸附樹脂法分離純化虎杖白藜蘆醇苷的研究[J]. 中國藥學雜志，2005，40（2）：96-98.

[8]尹蓉莉，江 靖，張淑儒，等. 大孔吸附樹脂純化白芍總苷的工藝研究[J]. 時珍國醫(yī)國藥，2005，16（7）：610-612.

[9]劉友平，鄢 丹，秦春梅. 大孔吸附樹脂純化中藥有效成分的影響因素[J]. 中藥新藥與臨床藥理，2003，14（3）：212-214.endprint

摘要：以黃芩苷含量為考察指標，用高效液相色譜法測定其含量，通過黃芩上柱液的澄清處理方法，比較3種大孔吸附樹脂對黃芩苷的吸附量和脫附率。結(jié)果表明，3種樹脂對黃芩苷的吸附能力大小為AB-8樹脂>LSA-40樹脂>D101樹脂；選用50%乙醇溶液作為洗脫劑效果最好；AB-8樹脂純化黃芩苷效果最好，黃芩苷純度約90%。

關鍵詞：黃芩苷；大孔樹脂；靜態(tài)飽和吸附量；脫附率；純分化離工藝

中圖分類號：R284.2 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0279-02

黃芩別名土金茶根、山茶根，為唇形科植物黃芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根^[1-2]，其有效成分為黃芩苷、黃芩苷元、漢黃芩素、漢黃芩苷、β-谷甾醇等^[3]。黃芩苷、黃芩素產(chǎn)品不但可被應用于天然植物藥領域，還被應用于人體及動物病防治，惡性疾病防治以及化妝品等眾多領域，應用領域非常廣泛，市場前景廣闊，已成為國內(nèi)外研究熱點。但有關大孔樹脂對黃芩苷提取工藝的研究不多^[4]。大孔樹脂是一種有機高分子聚合物，不溶于酸、堿及各種有機溶劑，具有較大的孔徑與比表面積，內(nèi)部具有三維空間立體孔結(jié)構。大孔樹脂具有物理化學穩(wěn)定性高、選擇性好、比表面積大、吸附容量大、吸附速度快、解吸條件溫和、再生處理方便、易構成閉路循環(huán)、使用周期長、節(jié)省費用等諸多優(yōu)點，在天然產(chǎn)物的提取分離工作中得到廣泛應用^[5-9]。本研究篩選黃芩苷富集與純化的最佳大孔樹脂，以期為進一步研究黃芩苷的純化分離工藝提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試黃芩采自陜西省柞水縣，經(jīng)西北大學生命科學學院植物教研室鑒定；黃芩苷對照品（批號：0751-9909），由中國藥品生物制品檢定所提供；大孔樹脂AB-8、D101、LSA-40，由西安藍曉科技開發(fā)有限公司提供；鹽酸、氫氧化鈉、乙醇、硫酸鋁鉀等均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器

日本島津LC-20A型高效液相色譜系統(tǒng)，包括檢測器SPD-20A、高壓恒流泵LC-20A、工作站LC Solution；FZ102植物粉碎機，天津市泰斯特儀器有限公司；H·H·S21-6C型電熱恒溫水浴鍋，上海醫(yī)療器械五廠；ME235S-型電子分析天平，德國賽多利斯；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；SHB-C型循環(huán)水式多用真空泵，鄭州長城科工貿(mào)有限公司；101A-2型鼓風干燥箱，上海市實驗儀器總廠；DE-10型蒸餾水器，上海悅豐儀器儀表有限公司；Milli-Q型超純水制備儀，美國Bedford公司；標準藥篩 1-9號，上虞市大亨橋化驗儀器廠；THZ-C型搖床，江蘇太倉市華美生化儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 黃芩上柱液的制備

稱取20目黃芩粗粉100 g，用 15倍質(zhì)量的75%乙醇溶液于85 ℃熱回流提取2次，每次 1.5 h，用4層紗布進行粗濾，再進行細濾，濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進行濃縮至無醇味，加入蒸餾水稀釋，過濾除去不溶物得上柱清液。用該上柱清液上柱分離多次，發(fā)現(xiàn)樹脂吸附效果不佳，其主要原因是該上柱清液中仍含大量果膠類等雜質(zhì)，嚴重影響樹脂對黃芩苷的吸附能力，因此設計如下上柱清液澄清處理試驗。

分別稱取5 g黃芩粉末3份，各加入pH值11的水溶液 50 mL，于85 ℃熱回流提取2 h。對其中1份樣品加入原料質(zhì)量1%的硫酸鋁鉀攪拌均勻，保溫靜置0.5 h后過濾，濾液用水定容至100 mL（A1處理）；對另1份樣品過濾后加入濾液等量的95%乙醇溶液進行醇沉，2～3 h后過濾，濾液濃縮至無醇味后用水定容至100 mL（A2處理）；對最后1份樣品過濾后直接用水定容至100 mL（A3處理）。

分別稱取5 g黃芩粉末3份，各加入10倍質(zhì)量的75%乙醇溶液于85 ℃熱回流提取2 h。對其中1份樣品加入原料質(zhì)量1%的硫酸鋁鉀攪拌均勻，保溫靜置0.5 h后過濾，濾液用水定容至100 mL（B1處理）；對另1份樣品過濾后濃縮至無醇味，加入濾液等質(zhì)量的95%乙醇溶液進行醇沉，2～3 h后過濾，濾液濃縮至無醇味后用水定容至100 mL（B2處理）；對最后1份樣品過濾后直接用水定容至100 mL（B3處理）。

吸取5 mL提取液，用水定容至50 mL后進行黃芩苷含量測定，并進行澄清度對比分析以及樹脂分離試驗，確定最佳澄清處理方法。

1.3.2 大孔吸附樹脂的預處理

一般來說，極性小的有機化合物適于在非極性樹脂上分離，極性較大的有機化合物適于在中極性、極性的樹脂上分離。具有酚羥基和糖苷鏈的黃酮類化合物具有一定的極性、親水性和較強的氫鍵生成能力，易被弱極性和極性樹脂吸附。黃芩苷是一類有葡萄糖醛酸結(jié)構的黃酮類化合物，具有一定的親水性和親脂溶性，適于D101、AB-8、LSA-40等弱極性或中極性樹脂的吸附。表1是大孔吸附樹脂的物理性能。

的純化試驗，結(jié)果表明：AB-8樹脂吸附量大，解吸率高，最佳解吸乙醇濃度為50%，因此AB-8樹脂是一種純化黃芩苷性能良好的樹脂，且該樹脂可以再生利用，成本較低，生產(chǎn)周期較短，適宜大規(guī)模生產(chǎn)，值得推廣應用。

在純化黃芩苷的生產(chǎn)工藝中，為了充分利用大孔樹脂，除選擇性能優(yōu)良的大孔樹脂外，還要配合最佳的工藝條件，考慮原液濃度對吸附的影響、上樣量對吸附的影響、流速對吸附的影響等，這方面工作還有待進一步完善，以促進大孔樹脂在中藥制藥工業(yè)中的應用。

參考文獻：

[1]中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志：六十五卷第二分冊[M]. 北京：科學出版社，1977：136-219.

[2]中國科學院西北植物研究所.秦嶺植物志：第一卷第四冊[M]. 北京：科學出版社，1983.

[3]高學敏.中藥學[M]. 北京：中國中醫(yī)藥出版社，2002：406-407.

[4]劉瑞源，鐘 平，戴開金. 大孔吸附樹脂提取中草藥有效成分的研究進展[J]. 時珍國醫(yī)國藥，2004，15（6）：封3-封4.

[5]周德慶，曾 駱. 黃芩總黃酮的提取工藝研究[J]. 華西藥學雜志，2003，18（1）：78-79.

[6]貝偉劍，彭文烈，羅 杰. 柿葉黃酮的大孔吸附樹脂分離提純富集[J]. 中成藥，2005，27（3）：257-261.

[7]向海艷，周春山，雷啟福，等. 大孔吸附樹脂法分離純化虎杖白藜蘆醇苷的研究[J]. 中國藥學雜志，2005，40（2）：96-98.

[8]尹蓉莉，江 靖，張淑儒，等. 大孔吸附樹脂純化白芍總苷的工藝研究[J]. 時珍國醫(yī)國藥，2005，16（7）：610-612.

[9]劉友平，鄢 丹，秦春梅. 大孔吸附樹脂純化中藥有效成分的影響因素[J]. 中藥新藥與臨床藥理，2003，14（3）：212-214.endprint

摘要：以黃芩苷含量為考察指標，用高效液相色譜法測定其含量，通過黃芩上柱液的澄清處理方法，比較3種大孔吸附樹脂對黃芩苷的吸附量和脫附率。結(jié)果表明，3種樹脂對黃芩苷的吸附能力大小為AB-8樹脂>LSA-40樹脂>D101樹脂；選用50%乙醇溶液作為洗脫劑效果最好；AB-8樹脂純化黃芩苷效果最好，黃芩苷純度約90%。

關鍵詞：黃芩苷；大孔樹脂；靜態(tài)飽和吸附量；脫附率；純分化離工藝

中圖分類號：R284.2 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0279-02

黃芩別名土金茶根、山茶根，為唇形科植物黃芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根^[1-2]，其有效成分為黃芩苷、黃芩苷元、漢黃芩素、漢黃芩苷、β-谷甾醇等^[3]。黃芩苷、黃芩素產(chǎn)品不但可被應用于天然植物藥領域，還被應用于人體及動物病防治，惡性疾病防治以及化妝品等眾多領域，應用領域非常廣泛，市場前景廣闊，已成為國內(nèi)外研究熱點。但有關大孔樹脂對黃芩苷提取工藝的研究不多^[4]。大孔樹脂是一種有機高分子聚合物，不溶于酸、堿及各種有機溶劑，具有較大的孔徑與比表面積，內(nèi)部具有三維空間立體孔結(jié)構。大孔樹脂具有物理化學穩(wěn)定性高、選擇性好、比表面積大、吸附容量大、吸附速度快、解吸條件溫和、再生處理方便、易構成閉路循環(huán)、使用周期長、節(jié)省費用等諸多優(yōu)點，在天然產(chǎn)物的提取分離工作中得到廣泛應用^[5-9]。本研究篩選黃芩苷富集與純化的最佳大孔樹脂，以期為進一步研究黃芩苷的純化分離工藝提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試黃芩采自陜西省柞水縣，經(jīng)西北大學生命科學學院植物教研室鑒定；黃芩苷對照品（批號：0751-9909），由中國藥品生物制品檢定所提供；大孔樹脂AB-8、D101、LSA-40，由西安藍曉科技開發(fā)有限公司提供；鹽酸、氫氧化鈉、乙醇、硫酸鋁鉀等均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器

日本島津LC-20A型高效液相色譜系統(tǒng)，包括檢測器SPD-20A、高壓恒流泵LC-20A、工作站LC Solution；FZ102植物粉碎機，天津市泰斯特儀器有限公司；H·H·S21-6C型電熱恒溫水浴鍋，上海醫(yī)療器械五廠；ME235S-型電子分析天平，德國賽多利斯；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；SHB-C型循環(huán)水式多用真空泵，鄭州長城科工貿(mào)有限公司；101A-2型鼓風干燥箱，上海市實驗儀器總廠；DE-10型蒸餾水器，上海悅豐儀器儀表有限公司；Milli-Q型超純水制備儀，美國Bedford公司；標準藥篩 1-9號，上虞市大亨橋化驗儀器廠；THZ-C型搖床，江蘇太倉市華美生化儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 黃芩上柱液的制備

稱取20目黃芩粗粉100 g，用 15倍質(zhì)量的75%乙醇溶液于85 ℃熱回流提取2次，每次 1.5 h，用4層紗布進行粗濾，再進行細濾，濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進行濃縮至無醇味，加入蒸餾水稀釋，過濾除去不溶物得上柱清液。用該上柱清液上柱分離多次，發(fā)現(xiàn)樹脂吸附效果不佳，其主要原因是該上柱清液中仍含大量果膠類等雜質(zhì)，嚴重影響樹脂對黃芩苷的吸附能力，因此設計如下上柱清液澄清處理試驗。

分別稱取5 g黃芩粉末3份，各加入pH值11的水溶液 50 mL，于85 ℃熱回流提取2 h。對其中1份樣品加入原料質(zhì)量1%的硫酸鋁鉀攪拌均勻，保溫靜置0.5 h后過濾，濾液用水定容至100 mL（A1處理）；對另1份樣品過濾后加入濾液等量的95%乙醇溶液進行醇沉，2～3 h后過濾，濾液濃縮至無醇味后用水定容至100 mL（A2處理）；對最后1份樣品過濾后直接用水定容至100 mL（A3處理）。

分別稱取5 g黃芩粉末3份，各加入10倍質(zhì)量的75%乙醇溶液于85 ℃熱回流提取2 h。對其中1份樣品加入原料質(zhì)量1%的硫酸鋁鉀攪拌均勻，保溫靜置0.5 h后過濾，濾液用水定容至100 mL（B1處理）；對另1份樣品過濾后濃縮至無醇味，加入濾液等質(zhì)量的95%乙醇溶液進行醇沉，2～3 h后過濾，濾液濃縮至無醇味后用水定容至100 mL（B2處理）；對最后1份樣品過濾后直接用水定容至100 mL（B3處理）。

吸取5 mL提取液，用水定容至50 mL后進行黃芩苷含量測定，并進行澄清度對比分析以及樹脂分離試驗，確定最佳澄清處理方法。

1.3.2 大孔吸附樹脂的預處理

一般來說，極性小的有機化合物適于在非極性樹脂上分離，極性較大的有機化合物適于在中極性、極性的樹脂上分離。具有酚羥基和糖苷鏈的黃酮類化合物具有一定的極性、親水性和較強的氫鍵生成能力，易被弱極性和極性樹脂吸附。黃芩苷是一類有葡萄糖醛酸結(jié)構的黃酮類化合物，具有一定的親水性和親脂溶性，適于D101、AB-8、LSA-40等弱極性或中極性樹脂的吸附。表1是大孔吸附樹脂的物理性能。

的純化試驗，結(jié)果表明：AB-8樹脂吸附量大，解吸率高，最佳解吸乙醇濃度為50%，因此AB-8樹脂是一種純化黃芩苷性能良好的樹脂，且該樹脂可以再生利用，成本較低，生產(chǎn)周期較短，適宜大規(guī)模生產(chǎn)，值得推廣應用。

在純化黃芩苷的生產(chǎn)工藝中，為了充分利用大孔樹脂，除選擇性能優(yōu)良的大孔樹脂外，還要配合最佳的工藝條件，考慮原液濃度對吸附的影響、上樣量對吸附的影響、流速對吸附的影響等，這方面工作還有待進一步完善，以促進大孔樹脂在中藥制藥工業(yè)中的應用。

參考文獻：

[1]中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志：六十五卷第二分冊[M]. 北京：科學出版社，1977：136-219.

[2]中國科學院西北植物研究所.秦嶺植物志：第一卷第四冊[M]. 北京：科學出版社，1983.

[3]高學敏.中藥學[M]. 北京：中國中醫(yī)藥出版社，2002：406-407.

[4]劉瑞源，鐘 平，戴開金. 大孔吸附樹脂提取中草藥有效成分的研究進展[J]. 時珍國醫(yī)國藥，2004，15（6）：封3-封4.

[5]周德慶，曾 駱. 黃芩總黃酮的提取工藝研究[J]. 華西藥學雜志，2003，18（1）：78-79.

[6]貝偉劍，彭文烈，羅 杰. 柿葉黃酮的大孔吸附樹脂分離提純富集[J]. 中成藥，2005，27（3）：257-261.

[7]向海艷，周春山，雷啟福，等. 大孔吸附樹脂法分離純化虎杖白藜蘆醇苷的研究[J]. 中國藥學雜志，2005，40（2）：96-98.

[8]尹蓉莉，江 靖，張淑儒，等. 大孔吸附樹脂純化白芍總苷的工藝研究[J]. 時珍國醫(yī)國藥，2005，16（7）：610-612.

[9]劉友平，鄢 丹，秦春梅. 大孔吸附樹脂純化中藥有效成分的影響因素[J]. 中藥新藥與臨床藥理，2003，14（3）：212-214.endprint