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    HPLC法測定注射用頭孢唑林鈉中頭孢唑林的含量

    2014-10-16 10:39:38鄭風敏
    中國民族民間醫(yī)藥 2014年17期
    關鍵詞:磷酸氫二鈉枸櫞酸注射用

    鄭風敏

    河南省鶴壁市食品藥品檢驗所,河南 鶴壁 458030

    頭孢唑林為第一代頭孢菌素,抗菌譜廣,適用于治療敏感細菌所致的呼吸道感染,尿路感染,皮膚軟組織感染,骨和關節(jié)感染,敗血癥、感染性心內(nèi)膜炎等疾病[1]。本文采用HPLC法測定頭孢唑林的含量,準確可靠,簡便;同時,通過HPLC色譜圖可以直觀地判斷注射用頭孢唑林鈉的質(zhì)量控制水平,為臨床用藥提供依據(jù)。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器 Waters高效液相色譜儀 (Waters 2695 HPLC PumP;Waters 2998二級管陣列檢測器;Epower化學工作站);賽多利斯CPA225D電子分析天平。

    1.2 試藥 頭孢唑啉對照品 (批號:0421-9603,中國食品藥品檢定研究院)。注射用頭孢唑林鈉 (批號:1211A001,中諾藥業(yè) (石家莊)有限公司;批號:02530303,悅康藥業(yè)集團有限公司)。水為純化水,乙腈為色譜純,其他試劑均為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 色譜條件[2]色譜柱:Waters Sunfire C18柱 (4.6 ×150mm,5μm);流動相為乙腈-磷酸氫二鈉、枸櫞酸溶液(取無水磷酸氫二鈉1.33g與枸櫞酸1.12g,加水溶解并稀釋制成1000ml)(13:87);流速為1.0 ml/min;檢測波長254nm;柱溫25℃;進樣量10μl。

    2.2 溶液的制備[2]

    2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取頭孢唑啉對照品適量,加磷酸鹽緩沖液 (pH 7.0)5ml,再用流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.1mg的對照品溶液。

    2.2.2 供試品溶液的制備 精密稱取供試品適量,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.1mg的供試品溶液。

    2.3 線性關系考察 精密稱取對照品21mg,置50ml容量瓶中,加磷酸鹽緩沖液 (pH 7.0)10ml,再用流動相定量稀釋至刻度,搖勻。分別精密吸取 1.0、2.0、5.0、3.0、5.0ml,分別置10、10、20、10、10ml量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻。在上述色譜條件下準確進樣10μl測定,以各溶液的濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標進行回歸,其回歸方程為 Y=14902X+5104.1(r=0.9999),頭孢唑啉在40~200μg/ml濃度范圍有良好的線性關系。

    2.4 精密度試驗 取“2.2.1”項下的對照品溶液,準確進樣10μl,連續(xù)進樣5次,記錄色譜圖,計算頭孢唑啉峰面積的RSD為0.2%。結(jié)果表明:本實驗進樣精密度良好。

    2.5 重復性試驗 取“2.2.2”項下供試品溶液,照含量測定方法測定,依法平行測定6次,以峰面積計算,RSD為0.5%。表明該方法重現(xiàn)性好。

    2.6 穩(wěn)定性試驗 精密量取同一供試品溶液,于0、1、3、5、7、9h分別準確進樣10μl,在上述色譜條件下,記錄色譜圖,計算頭孢唑林峰面積的RSD為0.7%。結(jié)果表明,注射用頭孢唑林鈉在9h內(nèi)比較穩(wěn)定。

    2.7 回收率試驗 精密稱取供試品15mg,置200ml量瓶中,分別精密加入對照品溶液,用流動相稀釋至刻度,搖勻,配成低、中、高三種不同濃度的溶液,按色譜條件測定,記錄峰面積,測得供試品在三個不同濃度的回收率平均值分別為103.5%、99.7%、102.1%。

    2.8 供試品的測定 分別取“2.2.1”項下的對照品溶液和“2.2.2”項下的供試品溶液,各準確進樣10μl,在上述色譜條件下進行測定,按外標法以峰面積計算。結(jié)果見表1。

    表1 供試品測定結(jié)果

    3 討論

    磷酸氫二鈉作為流動相有很好的緩沖能力,并且頭孢唑林鈉在磷酸氫二鈉溶液中溶解性能很好,但是頭孢唑林鈉的酸度值為5.5左右,磷酸氫二鈉作為主要的緩沖液其溶液顯堿性,所以要加入一定量的枸櫞酸來調(diào)節(jié)其pH值,這樣使其緩沖能力更強,在測定過程中頭孢唑林鈉可以達到更好的分離純化效果,使得測定結(jié)果更準確,故選擇磷酸氫二鈉、枸櫞酸溶液同時作為頭孢唑林鈉的流動相。

    本實驗建立的HPLC法測定頭孢唑林的含量,方法準確,快速,重現(xiàn)性良好。從供試品的含量測定結(jié)果可以看出,此方法可以準確的測定注射用頭孢唑林鈉中頭孢唑林的含量,從而為實際工作中對藥品質(zhì)量的控制提供科學的依據(jù)。

    [1]劉俊田.藥理學[M].鄭州:鄭州大學出版社,2004:382-383.

    [2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典 (二部) [M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:206-207.

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