周氏嚙小蜂規(guī)模繁放及HcNPV與Bt混劑對美國白蛾的防治效果研究

徐 明，王光標，王 麗，張利華，徐福元

(1.江蘇省林業(yè)科學研究院，江蘇 南京 211153;2.新沂市森林病蟲害檢疫防治站，江蘇 新沂 221400;3.贛榆縣林業(yè)中心，江蘇 贛榆 222100;4.連云區(qū)森林病蟲害檢疫防治站，江蘇 連云港 222000)

2010年起，美國白蛾(Hyphantria cuneadrury)在江蘇省連云港、徐州、鹽城和宿遷市的部分縣區(qū)爆發(fā)后，危害十分嚴重。目前，該蟲向周邊地區(qū)擴散蔓延的勢頭仍在加劇，嚴重威脅了當?shù)氐某鞘芯G化、林果業(yè)和養(yǎng)蠶業(yè)等。美國白蛾食性極雜，主要危害楊樹、柳樹、懸鈴木、刺槐、泡桐、桑樹、蘋果、梨、桃、李等林果及高粱、玉米、大豆、花生、辣椒、馬鈴薯、番茄等300種以上農(nóng)作物。該害蟲最喜食桑樹、楊樹、白臘等樹種，由于多種藥劑會致家蠶死亡或不作繭，一旦美國白蛾危害桑園，又不宜藥物防治，防治難度相當大。由于美國白蛾有食性雜、繁殖量大、適應性強、傳播途徑廣、嚴重擾民等5大危害特性，特別是該危險性害蟲傳入江蘇不久，伴隨諸多新的問題亟待解決，如生活史、危害特點等生物學習性差異，其繁殖危害，氣候及環(huán)境等影響因子。因此，探究其生物防控方法、技術手段和防治適期，為控制其在江蘇的蔓延和危害提供技術支撐［1］，實現(xiàn)在江蘇的可持續(xù)治理，意義非常重大。

1 材料和方法

1.1 防治適期觀察

采用室內(nèi)6cm×10cm×4cm養(yǎng)蟲盒、室外2.0m×1.5m×1.5m養(yǎng)蟲籠和野外人工飼養(yǎng)相結合的方法進行觀察。預先在養(yǎng)蟲籠內(nèi)種植懸鈴木(Platanus orientalis)、日本晚櫻(Prunus lannesiana)、杏樹(Prunus armeniaca)、泡桐 (Paulownia fortunei)、臭椿(Ailanthus altissima)、楊樹(Populus sp)等樹種，放入美國白蛾成蟲6對，重復3次，觀察記錄成蟲產(chǎn)卵情況;在養(yǎng)蟲盒內(nèi)預先放入上述樹種的樹葉，每養(yǎng)蟲盒內(nèi)放入等量4齡幼蟲30條，重復3次，并觀察記錄幼蟲生長發(fā)育情況。最后綜合觀察結果，確定最佳防治期。

1.2 HcNPV、Bt及其混劑野外防效評價

美國白蛾核型多角體病毒液(HcNPV)2.0×107PIBs/mL由中國林業(yè)科學研究院提供，Bt(蘇云金桿菌)懸浮劑(毒力效價8 000 IU/μL，揚州綠源生物化工有限公司生產(chǎn))。

(1)單劑:將供試 Bt，HcNPV分別配成8 IU/μL，1.6×106PIBs/mL藥液。

(2)混劑:4 IU/μL Bt+0.8 ×106PIBs/mL Hc-NPV和2 IU/μL Bt+0.4×106PIBs/mL HcNPV。

(3)噴霧和供試對象:處理在復葉槭(Acer negundo L.)苗床噴霧，每個處理設5株標準株，每標準株接3～4齡幼蟲50～100頭，以無菌水為對照，設重復3次，噴藥后每日調(diào)查記錄標準株的幼蟲死亡數(shù)。

(4)野外防治效果評價:在不同制劑的室內(nèi)生測試驗中，按時間-劑量-死亡率模型進行分析，并計算出相應的半致死時間(LT50)［2］。根據(jù)田間調(diào)查所得蟲口變化情況，計算出蟲口減退率。蟲口減退率D=(dTo-dTi)/dTo×100%，式中，dTo和dTi分別表示小區(qū)在處理前和處理后第i的蟲口密度［3］。

1.3 周氏嚙小蜂(Chouioia cunea)規(guī)模繁育

柞蠶(Antheraea pernyi G.)繭購自吉林省柞蠶科學研究院，周氏嚙小蜂種蜂引自山東省濱州市林業(yè)技術指導站。2013年4～5月，將接蜂箱(35cm×40cm×5cm)消毒后，裝入柞蠶繭(每箱80～90個)。接蜂試驗按種蜂繭與柞蠶蛹為 1∶40，1∶50，1∶60和1∶70等4個處理，每個處理重復接蜂20箱。接蜂后用紗布將接蜂箱密封，放入暗室使種蜂充分寄生柞蠶蛹。48 h后，拆開接蜂箱，轉入(26±2)℃和濕度為70%左右的培養(yǎng)室。培養(yǎng)7d后，觀察統(tǒng)計其寄生率，并挑選被寄生的蛹根據(jù)林間防治時間繼續(xù)培養(yǎng)至羽化期或冷藏在8℃冷庫。

1.4 周氏嚙小蜂規(guī)模釋放

在美國白蛾老熟幼蟲期或化蛹初期釋放效果最佳(應提前做好林間調(diào)查掌握害蟲發(fā)育程度)。寄生蛹在準確識別后及時按防治需要分不同條件保存，在釋放10d前置于25℃條件下暖蜂備用。把即將出蜂的柞蠶蛹直接懸掛或用大頭針固定在樹干上，小蜂即可自行羽化而出尋找寄主。放蜂量依據(jù)林地害蟲蟲口高低每667m2掛放3～5個蜂蛹(15 000～25 000頭嚙小蜂)，嚙小蜂釋放效果受天氣的影響較大，放蜂時宜選擇晴朗、無風、空氣濕度較為適宜的傍晚，能夠達到較高的寄生率。放蜂7d后在放蜂區(qū)采集白蛾蛹至室內(nèi)觀察調(diào)查其寄生率。

1.5 統(tǒng)計分析

各項試驗所得結果均采用SPSS統(tǒng)計軟件進行分析。

2 結果和討論

2.1 防治適期

2.1.1 生物制劑防治適期 根據(jù)越冬代成蟲的發(fā)育期推算，卵產(chǎn)出后5～7d第1代幼蟲可形成較明顯的網(wǎng)幕，并發(fā)育至2齡幼蟲，20d左右發(fā)育至3～4齡幼蟲，25d左右幼蟲開始破網(wǎng)分散。2011年5月13日對17個卵塊調(diào)查發(fā)現(xiàn)，已經(jīng)有15個卵塊孵化，其中有5個形成網(wǎng)幕。5月17日起進入剪除幼蟲網(wǎng)幕適期，至6月7日開始進入藥物防治適期，分散幼蟲比較容易受藥并可以取得較為穩(wěn)定的防治效果。6月中旬至7月上旬為第1代幼蟲危害盛期，6月底7月初幼蟲開始化蛹，7月上旬第1代成蟲開始出現(xiàn);7月中旬第2代幼蟲開始孵化，多7齡，8月第2代幼蟲危害盛期，8月中旬開始化蛹，第2代蛹大部分進入越冬期，少數(shù)于8月下旬至9月上旬羽化;9月上旬第3代幼蟲開始孵化，危害期9月上旬至11月初，常因氣溫驟降而死亡，只有少數(shù)10月中旬開始陸續(xù)化蛹越冬。各蟲態(tài)始見期因年氣候條件不同(主要是氣溫)略有差異，局部地區(qū)世代重疊現(xiàn)象嚴重。因此，6月7日左右的上中旬、8月上中旬和9月中下旬是1，2，3代4齡幼蟲的破網(wǎng)幕率分別達95%，85%和75%，分別為1，2，3代分散美國白蛾幼蟲的生物制劑防治適期(見圖1)。

圖1 美國白蛾不同代破網(wǎng)幕4齡幼蟲防治適期

2.1.2 周氏嚙小蜂規(guī)模釋放適期 觀察發(fā)現(xiàn)，生物制劑防治適期后的10d左右，6月中下旬為第1代老熟幼蟲下樹化蛹高峰期;8月中下旬為第2代化蛹高峰期;10月上中旬第3代化蛹越冬，分別為規(guī)模釋放周氏嚙小蜂對美國白蛾1，2，3代進行生物防治的適期。

2.2 HcNPV、Bt及其混劑對美國白蛾第2代3～4齡幼蟲的野外毒殺效果

野外防治試驗發(fā)現(xiàn)，在96 h時，Bt、HcNPV單劑對美國白蛾幼蟲的蟲口減退率分別為67.50%，15.07%;高濃度HcNPV與Bt混劑和低濃度HcNPV與Bt混劑對美國白蛾幼蟲的蟲口減退率則分別達到了41.07%，27.23%，說明使用混劑對美國白蛾幼蟲的毒殺效果明顯低于Bt單劑，但又明顯高于HcNPV單劑;而當168 h時，高濃度HcNPV與Bt混劑、HcNPV、低濃度HcNPV與Bt混劑和Bt 4種藥劑對美國白蛾幼蟲的蟲口減退率分別為66.67%，49.67%，52.26%和94.60%;Bt單劑半致死速度最快，HcNPV單劑最慢，高濃度和低濃度HcNPV與Bt混劑居中;至192 h(8d)后，Bt單劑對美國白蛾第2代3～4齡幼蟲的野外蟲口減退率達100%，HcNPV單劑和2種混劑的蟲口減退率均在50%以上。野外致死速度測定結果:高濃度HcNPV與Bt混劑、HcNPV、低濃度HcNPV與Bt混劑和Bt 4種藥劑對美國白蛾幼蟲的LT50分別為126.09，146.01，141.27和81.56 h;測定說明混劑對美國白蛾幼蟲的毒殺速度明顯慢于Bt單劑，但又明顯快于HcNPV單劑。因此，使用混劑和單劑均有較好的防治效果，但混劑的致死速度要快于HcNPV單劑，并可以適當減少劑量，提高對美國白蛾幼蟲的防治效果，說明HcNPV與Bt混劑很有應用前景(見表1)。通過野外防治試驗發(fā)現(xiàn)，HcNPV與Bt混劑對美國白蛾3～4齡幼蟲有一定的毒殺增效作用。為此，用濃度為0.8×106PIBs/mL+4 IU/μL的HcNPV與Bt混劑在連云港贛榆縣青楊鎮(zhèn)實施的美國白蛾防治試驗，其防治效果均在70%以上，進一步驗證了毒力試驗的結果。

表1 HcNPV、Bt及其混劑對美國白蛾4～5齡幼蟲毒殺效果

2.3 周氏嚙小蜂規(guī)模繁育效果

由周氏嚙小蜂人工規(guī)模繁育試驗發(fā)現(xiàn)，蜂蛹比(種蜂蛹∶柞蠶蛹)為125∶1(1∶40)的繁蜂效果最好，繁蜂成功寄生率達 (94.80±3.81)%;蜂蛹比(種蜂蛹∶柞蠶蛹)為100∶1(1∶50)的繁蜂效果其次，寄生率達(90.40±2.02)%，蜂蛹比(種蜂蛹∶柞蠶蛹)為83.3∶1(1∶60)和71.4∶1(1∶70)的繁蜂效果相對低一些，寄生率分別為(85.10±5.16)%和(78.90±8.40)%(見表2)。因此，本試驗于2013年4～5月選用蜂蛹比(種蜂蛹∶柞蠶蛹)為125∶1(1∶40)和 100∶1(1∶50)對從吉林省柞蠶科學研究院購進的800kg柞蠶蛹開展了規(guī)模繁蜂，繁蜂率85%以上，繁育周氏嚙小蜂3.5億頭。

表2 周氏嚙小蜂人工規(guī)模繁育試驗效果*

2.4 周氏嚙小蜂規(guī)模釋放對美國白蛾的控制效果

根據(jù)調(diào)查所獲得的林間美國白蛾幼蟲的蟲口密度，確定釋放周氏嚙小蜂的數(shù)量，選擇美國白蛾老熟幼蟲期和化蛹初期分別進行放蜂試驗，其試驗結果如下:放蜂37.5萬頭/hm2的寄生效果最高，2011年8月13日放蜂防治第2代和2013年9月29日放蜂防治第3代美國白蛾幼蟲的寄生效果分別達41.25%和52.89%;放蜂30萬頭/hm2的寄生效果其次，2012年9月30日放蜂防治第3代和2013年8月14日放蜂防治第2代美國白蛾幼蟲的寄生效果分別達38.33%和39.67%;放蜂22.5萬頭/hm2的寄生效果再次，2012年8月16日放蜂防治第2代美國白蛾幼蟲的寄生效果達32.87%，試驗說明放蜂密度與寄生效果密切相關(見表3)。

于2012和2013年利用蜂蛹比(種蜂蛹∶柞蠶蛹)為125∶1(1∶40)繁蜂法規(guī)模繁育天敵周氏嚙小蜂累計7億頭多，分別在連云港連云區(qū)、東海縣和徐州新沂等全省多家林業(yè)部門在美國白蛾的生物防治中廣泛應用，相關的配套技術也得到了很好的推廣，累計防治面積1 333.33hm2以上，均取得了很好防治效果。

表3 周氏嚙小蜂規(guī)模釋放對美國白蛾的控制效果

3 結論與討論

(1)研究發(fā)現(xiàn)，6月7日左右、8月上中旬和9月中下旬，1，2，3代美國白蛾4齡幼蟲的破網(wǎng)幕率分別達95%，85%和75%，分別為1，2，3代分散幼蟲的生物制劑的防治適期;6月中下旬為第1代老熟幼蟲化蛹高峰期;8月中下旬為第2代化蛹高峰期;l0月上中旬第3代老熟幼蟲化蛹越冬，分別為周氏嚙小蜂規(guī)模釋放防治1，2，3代美國白蛾的適期。

(2)野外和飛機防治試驗效果說明，Bt與HcNPV混劑對美國白蛾幼蟲的毒殺效果高和致死速度快［2-6］。HcNPV、Bt及其混劑對美國白蛾第2代3～4齡幼蟲的野外毒殺效果試驗發(fā)現(xiàn)，至168 h時，高濃度HcNPV與Bt混劑、HcNPV單劑、低濃度HcNPV與Bt混劑和Bt單劑等4種藥劑對美國白蛾幼蟲的蟲口減退率分別為66.67%，49.67%，52.26%和94.60%，Bt單劑致死速度最快，HcNPV單劑最慢;因此，用0.8×106PIBs/mL HcNPV+4IU/μL Bt混劑在連云港贛榆縣青楊鎮(zhèn)實施的大面積試驗，其防治效果均在70%以上。HcNPV與Bt混劑是治理美國白蛾的一種理想藥劑，可以大面積推廣應用。

(3)選用蜂蛹比(種蜂蛹∶柞蠶蛹)為125∶1(1∶40)和100∶1(1∶50)對柞蠶蛹開展規(guī)模繁蜂，繁蜂成功率逾85%。據(jù)調(diào)查林間美國白蛾幼蟲的蟲口密度確定適宜釋放周氏嚙小蜂的數(shù)量，在美國白蛾老熟幼蟲期和化蛹初期開展放蜂可取得較好的防治效果。放蜂37.5萬頭/hm2的寄生效果最高，8月中旬放蜂防治第2代和9月下旬放蜂防治第3代美國白蛾幼蟲的寄生效果分別為41.25%和52.89%;放蜂30萬頭/hm2的寄生效果其次，9月下旬放蜂防治第3代和8月中旬放蜂防治第2代美國白蛾幼蟲的寄生效果分別為38.33%和39.67%;放蜂22.5萬頭/hm2的寄生效果再次之，8月中旬放蜂防治第2代美國白蛾幼蟲的寄生效果分別達32.87%，說明放蜂密度與寄生效果密切相關。

于2012和2013年規(guī)模繁育天敵周氏嚙小蜂累計7億頭多，分別在連云港連云區(qū)、東?？h、鹽城市、宿遷市和徐州新沂等林業(yè)部門在美國白蛾的生物防治中廣泛應用，相關的配套技術也得到了很好推廣，累計防治面積1 333.33hm2以上，均取得了40.0%和50.0%防治效果。由于農(nóng)藥對周氏嚙小蜂有一定影響，會影響天敵對害蟲的防治效果，可以選擇殺鈴脲 、滅幼脲Ⅲ號、Bt和HcNPV等生物或無公害殺蟲制劑配合白蛾周氏嚙小蜂來控制美國白蛾［7-12］。這樣會更有效、持續(xù)地控制其發(fā)生和蔓延。

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