IL—6、IL—12、 IL—33在丙型肝炎患者中的表達(dá)及其臨床意義

何敬遠(yuǎn)

[摘要] 目的 探討丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33含量的變化及其臨床意義。 方法 ELISA法檢測(cè)30例丙型肝炎患者、30例丙型肝炎病毒攜帶者及30例健康對(duì)照者血清中IL-6、IL-12及IL-33的表達(dá)水平。 結(jié)果 相比丙型肝炎病毒攜帶者及健康對(duì)照者，丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的表達(dá)水平顯著升高（P<0.01），且丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量顯著高于丙型肝炎病毒攜帶者（P<0.01）；經(jīng)治療后丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量顯著降低（P<0.01）。 結(jié)論 IL-6、IL-12及IL-33介導(dǎo)的免疫應(yīng)答參與了丙型肝炎的發(fā)病，在丙型肝炎病毒感染的致病機(jī)制中有一定的臨床價(jià)值。

[關(guān)鍵詞] 白細(xì)胞介素-6；白細(xì)胞介素-12；白細(xì)胞介素-33；丙型肝炎

[中圖分類號(hào)] R512.63 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2014）12-123-03

丙型病毒性肝炎是一種由丙型肝炎病毒（HCV）感染引起的病毒性肝炎，其傳播途徑和特征與乙型肝炎病毒相似[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，全球HCV的感染率約為3%，每年新發(fā)丙型肝炎病例約3.5萬例[2]。細(xì)胞因子在病毒性肝炎的免疫病理過程中的作用，已受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注[3]。然而，關(guān)于IL-6、IL-12及IL-33這三種細(xì)胞因子在丙型肝炎發(fā)病中的作用研究還很少，據(jù)此，我們對(duì)30例慢性丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量進(jìn)行了檢測(cè)，期望從細(xì)胞因子角度探討HCV導(dǎo)致丙型肝炎發(fā)生及肝臟損害的機(jī)制，結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2013年2～12月深圳市南山醫(yī)院門診及住院的30例慢性丙型肝炎患者，年齡26～45歲，平均（35.5±7.8）歲，30例丙型肝炎病毒攜帶者，年齡25～47歲，平均（36.7±8.1歲），同時(shí)收集體檢中心檢驗(yàn)合格的30例健康人，年齡25～45歲，平均（35.4±7.5歲）作為對(duì)照。

1.2 標(biāo)本收集

清晨抽取各組研究人員的空腹靜脈血2mL，3000rpm離心15min，留取外周血上清。

1.3 方法

1.3.1 血清樣本采集 所有對(duì)象均在治療前及治療6個(gè)月后采用肝素抗凝管空腹采血5mL，靜止30min后，3000rpm離心10min，取上層血清凍存于-80℃冰箱中備用。

1.3.2 ELISA法測(cè)定IL-6、IL-12及IL-33含量 試劑盒購自R&D;公司，嚴(yán)格按照說明書要求操作如下：將血清樣品和標(biāo)準(zhǔn)品100μL加入孔中，另留出空白對(duì)照孔，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃孵育90min；每孔加入250μL洗滌液，震蕩1min/次洗板，共4次；加入配制好的生物素化抗體工作液100μL孔，37℃孵育60min；洗板4次；加入酶結(jié)合物工作液100μL孔，37℃孵育30min；洗板4次；加入顯色劑100μL/well，避光，37℃孵育10～20min；加入終止液100μL/well，短暫震蕩混勻后立即測(cè)量OD450值。

1.3.3 治療方法 常規(guī)肝治療基礎(chǔ)上加用重組干擾素治療。具體治療方法為300萬U重組干擾素肌肉注射，1次/d，治療2周后改為隔日1次，療程為6個(gè)月。治療過程中密切監(jiān)視患者肝功能和血、尿常規(guī)等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS16.0 軟件，以方差分析和t檢驗(yàn)的方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清IL-6、IL-12及IL-33含量比較

與丙型肝炎病毒攜帶者及健康對(duì)照者相比，丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的表達(dá)水平顯著升高（P<0.01），且丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量顯著高于丙型肝炎病毒攜帶者（P<0.01）。2.2 治療前后丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12及IL-33含量比較

經(jīng)治療后丙型肝炎患者血清中IL-6、IL-12及IL-33的含量顯著降低（P<0.01）。見表2。

3 討論

丙型肝炎呈全球性流行，丙型肝炎病毒（HCV）侵入機(jī)體后可造成干細(xì)胞變形壞死[4-6]，導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝細(xì)胞癌（HCC）[7]。HCV是如何導(dǎo)致丙型肝

炎發(fā)生及其是通過何種方式導(dǎo)致肝臟損害的目前尚不完全清楚[8]。IL-6、IL-12及IL-33均為體內(nèi)細(xì)胞免疫的重要參與分子[9-11]。IL-6是一種Th2型的細(xì)胞因子，可抑制Th1細(xì)胞分泌IL-2和IFN-γ等參與細(xì)胞免疫的重要細(xì)胞因子，從而降低機(jī)體清除病毒的能力[12]。IL-12作用與IL-6相反，IL-12可促進(jìn)Th1型細(xì)胞免疫應(yīng)答，增強(qiáng)機(jī)體抗感染免疫的能力。我們的研究發(fā)現(xiàn)，丙型肝炎患者血清中IL-6和IL-12的含量顯著高于丙型肝炎病毒攜帶者及健康對(duì)照者（P<0.01）；據(jù)此我們猜測(cè)雖然升高的IL-12水平可增強(qiáng)機(jī)體抗感染免疫的能力，但由于同時(shí)受到升高的IL-6的抑制作用，因此最終導(dǎo)致了丙肝的發(fā)生。同時(shí)我們還發(fā)現(xiàn)，治療后，IL-12含量下降水平顯著低于IL-2含量的下降水平，提示IL-12在此時(shí)可發(fā)揮機(jī)體保護(hù)作用，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)HCV的清除能力。IL-33作為白介素家族中的一員，在免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)中具有重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)，肝細(xì)胞損傷后可分泌大量的IL-33。本文通過研究發(fā)現(xiàn)丙型肝炎患者血清中IL-33的含量顯著高于丙型肝炎病毒攜帶者及健康對(duì)照者（P<0.01）。同時(shí)，經(jīng)治療后丙型肝炎患者血清中上述3種細(xì)胞因子的含量顯著降低（P<0.01）。據(jù)此，我們的結(jié)果提示 IL-6、IL-12及IL-33介導(dǎo)的免疫應(yīng)答參與了丙型肝炎的發(fā)病，在丙型肝炎病毒感染的致病機(jī)制中有一定的臨床價(jià)值。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 鄭潔，李紅，王玉平，等.丙型肝炎患者血清TNF，IL-6，IL-10及其臨床意義[J].放射免疫學(xué)雜志，2004，17（6）：440-441.

[2] 宋鑒清，尚紅，王亞男，等.丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12與血清HCV病毒載量及ALT的相關(guān)性研究[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2006，16（24）：3819-3821.

[3] 龔嬋聰，曹文貴.丙型肝炎患者血清IL-1α、IL-6、TNF-α的檢測(cè)意義[J].蘇州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2000，20（7）：661-662.

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[4] 陳壽權(quán)，王萬鐵，王明山，等.醒腦靜對(duì)家兔腦缺血再灌流時(shí)TNF、IL-1β、IL-6水平及腦超微結(jié)構(gòu)影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)急救醫(yī)學(xué)，2000，20（11）：637-639.

[5] 林海，劉煜，李柱一，等.局灶性腦缺血再灌注后白細(xì)胞介素-6、腫瘤壞死因子-α的表達(dá)及川芎嗪對(duì)其表達(dá)的影響[J].中國(guó)臨床康復(fù)，2002，6（7）：968-969.

[6] 馬丙祥，陳嬌陽，雷爽，等.丹參酮ⅡA對(duì)腦室周圍白質(zhì)軟化新生大鼠白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-6表達(dá)的影響[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志，2013，28（24）：1868-1870.

[7] 王玲，李杰，張璟，等.塞來昔布對(duì)人三陰性乳腺癌裸鼠體內(nèi)白細(xì)胞介素6和白細(xì)胞介素8水平的影響[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，41（9）：801-804.

[8] Rosen HR， Miner C. Frequencies of HCV-specific effector CD4+T cells by flow cytometry： correlation with clinical disease stages[J].Hepatology，2002，35（1）：190-198.

[9] 陳忠.丙型肝炎患者血清IL-6和IL-12水平變化及臨床意義[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2006，6（7）：1132-1137.

[10] Gate MK.Interleukin-12：potential applications in the treatment of chroniec viral hepatitis[J]. J Viral Hepatitis，1997，4（supple 1）：33-39.

[11] Verri WA Jr，Guerrero AT，F(xiàn)ukada SY，et al.IL-33 mediates antigen-induced cutaneous and articular hypernociception in mice[J].PNAS，2008，105（7）：2723-2728.

[12] 張金野，李書紅，王俊，等.白細(xì)胞介素-17和白細(xì)胞介素-6在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌的表達(dá)及其臨床意義[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2012，29（2）：243-246.

（收稿日期：2014-04-16）