妊娠期糖尿病患者胎盤組織中IRS—1和GLUT4的表達(dá)

曹聰明等

[摘要] 目的 探討妊娠期糖尿病患者胎盤組織中IRS-1和GLUT4的表達(dá)。 方法 選取2012年3月～2014年3月本院產(chǎn)科門診收治的住院分娩孕婦共83例，按照檢查結(jié)果將其分為妊娠期糖尿病組（GDM組）（n=43）和正常足月妊娠組（對照組）（n=40）。檢測兩組孕婦的各臨床指標(biāo)（身高、血壓、體重以及空腹血糖、空腹胰島素、總膽固醇、三酰甘油等），同時(shí)采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）方法測定患者胎盤組織中的IRS-1和GLUT4的表達(dá)水平。 結(jié)果 GDM組的空腹血糖、空腹胰島素、總膽固醇、三酰甘油等指標(biāo)水平均高于對照組（P<0.05）。GDM組的HOMA-IR高于對照組，GDM組的HOMA-ISI、HOMA-β%低于對照組（P<0.05）。IRS-1在兩組胎盤組織中的表達(dá)水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；GLUT4在兩組胎盤組織胞質(zhì)中的表達(dá)水平的比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），在胎盤組織細(xì)胞膜中的表達(dá)水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 IRS-1、GLUT4作為胰島素信號通路中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，其在胰島素抵抗環(huán)節(jié)中發(fā)揮重要作用。

[關(guān)鍵詞] 妊娠期糖尿??；胰島素受體底物-1；葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4；胰島素

[中圖分類號] R714.256 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）08（a）-0026-03

Expression of IRS-1，GLUT4 in placenta of patients with gestational diabetes mellitus

CAO Cong-ming DING Hong-tao LI Miao-rong SUN Xiao-hai

Department of Obstetrics and Gynecology，Shiyan People′s Hospital of Shenzhen City，Shenzhen 518108，China

[Abstract] Objective To explore the Expression of IRS-1，GLUT4 in placenta of patients with gestational diabetes mellitus. Methods 83 pregnant women treated in outpatient department in ourhosptal from March 2012 to March 2014 obstetric outpatient were selected and the gestational diabetes mellitus （GDM） group （n=43）and the The normal full-term pregnancy group （the control group） （n=40） according to examination results.Different clinical indicators （height， blood pressure，weight，and fasting blood glucose， fasting insulin，total cholesterol，triglyceride，etc.）， in the two groups were detected，expression level of IRS-1 and GLUT4 of placenta in patients were determined by reverse transcription polymerase chain reaction （RT-PCR） methods in the two groups. Results The level of fasting glucose，fasting insulin，total cholesterol，and triglycerides and so on in the GDM group were higher than those in the control group （P<0.05）.HOMA-IR of the GDM group was higher than that in the control group，HOMA-ISI，HOMA-β% the GDM group was lower than that in the control group （P<0.05）.There was a statistical difference of IRS-1 expression level of placenta in the two groups （P<0.05）；there was no statistical difference of GLUT4 expression level of cytoplasm in placenta of the two groups （P>0.05），there was a statistical difference of GLUT4 expression level of Cell membrane in placenta of the two groups （P<0.05）. Conclusion As a signal transduction molecule in the insulin signaling pathway，IRS-1，GLUT4 can play an important role in insulin resistance.

[Key words] Gestational diabetes mellitus；Insulin receptor substrate-1；Glucose transporter 4；Insulin

妊娠期糖尿?。╣estational diabetes mellitus，GDM）是糖尿病中一種特殊的類型，通常是指在妊娠期間首次出現(xiàn)葡萄糖耐量異常的情況，其中大多數(shù)患者最終轉(zhuǎn)為2型糖尿病[1]。GDM嚴(yán)重威脅母嬰安全，使臨床并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)上升。國外研究發(fā)現(xiàn)，胰島素抵抗（insulin resistance，IR）在GDM發(fā)病中有重要作用，而胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的異常是發(fā)生IR的病理基礎(chǔ)。本研究選取本院產(chǎn)科門診收治的住院分娩孕婦83例，觀察探討了GDM患者胎盤組織中IRS-1和GLUT4的表達(dá)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年3月～2014年3月本院產(chǎn)科門診收治的住院分娩孕婦83例，其中GDM組43例設(shè)為觀察組，年齡22～34歲，平均（27.6±3.4）歲，孕周為36～41周，平均38.2周，初產(chǎn)婦25例，經(jīng)產(chǎn)婦18例；正常足月妊娠組40例設(shè)為對照組，年齡20～33歲，平均（26.2±2.4）歲，孕周為37～41周，平均39.4周，初產(chǎn)婦27例，經(jīng)產(chǎn)婦13例。兩組孕婦的年齡、孕周、孕次比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

參考樂杰主編的《婦產(chǎn)科學(xué)》第6版教科書中GDM的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床診斷[2]。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)

①胎兒發(fā)育正常，無畸形及生長受限、死胎的孕婦；②孕前無嚴(yán)重功能性疾病，如高血壓病、心肝腎功能障礙等；③排除孕前存在內(nèi)分泌疾病的患者；④孕前及孕期未使用皮質(zhì)激素類藥物，使用干擾糖脂代謝類藥物除外。

1.4 方法

1.4.1 血糖和胰島素的測定 在孕婦孕周為24～28周期間進(jìn)行血糖檢測，采血前要求患者禁食12 h，于早晨采集空腹肘靜脈血進(jìn)行檢測，檢測完畢后將75 g葡萄糖粉溶于250 ml水中并要求患者喝完，服完后抽取肘靜脈血測血糖。受試期間要求患者禁食、避免做劇烈運(yùn)動[3-5]。取血后及時(shí)分離血清，并進(jìn)行血糖和胰島素的測定。

1.4.2 生化指標(biāo)檢測 患者入院后對其各臨床指標(biāo)：身高、血壓、體重以及空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FINS）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）等進(jìn)行檢測。參與檢查的患者檢測前空腹12 h，然后于次日清晨采集肘靜脈血4 ml，選取2 ml進(jìn)行肝素抗凝，混勻后離心，吸取血清至試管中，置于-70℃冰箱，然后進(jìn)行血清胰島素水平的檢測[6-8]。

空腹血糖采用葡萄糖氧化酶法進(jìn)行檢測，采用直接化學(xué)發(fā)光法對空腹胰島素進(jìn)行測定并統(tǒng)計(jì)記錄FINS的濃度[9]。

1.4.3 免疫組織化學(xué)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) IRS-1蛋白在細(xì)胞質(zhì)組織中進(jìn)行表達(dá)，GLUT4蛋白在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜表達(dá)，采用定量積分方式對檢測結(jié)果進(jìn)行表示，依據(jù)染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞比例記分，染色強(qiáng)度以多數(shù)陽性細(xì)胞呈現(xiàn)的染色記分，其中未著色或與背景色相同時(shí)為0分；1分：著色淺且與陰性對照切片存在差異；2分：染色強(qiáng)度一般，介于淺著色和強(qiáng)著色之間；3分：著色強(qiáng)度和已知陽性切片相同。陽性細(xì)胞記分中，0分：<5%的細(xì)胞呈陽性或細(xì)胞顯色與背景相同；1分：5%～25%的細(xì)胞呈陽性；2分：26%～50%的細(xì)胞呈陽性；3分：>51%的細(xì)胞呈陽性[10]。

根據(jù)這兩項(xiàng)指標(biāo)的積分?jǐn)?shù)將其分為4級，其中0分為陰性，1～3分為弱陽性，4～6分為陽性，強(qiáng)陽性為7～9分[11]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組糖脂代謝參數(shù)及HOMA的比較

GDM組的FBG、FINS、TG、TC、HOMA-IR均高于對照組，GDM組的HOMA-ISI、HOMA-β%低于對照組（P<0.05）（表1）。

表1 兩組糖脂代謝參數(shù)及HOMA的比較（x±s）

2.2 IRS-1在兩組胎盤組織中表達(dá)水平的比較

GDM組中，IRS-1陽性表達(dá)共32例，其中弱陽性15例，陽性10例，強(qiáng)陽性7例，陽性表達(dá)率為74.4%，對照組的陽性表達(dá)率為95.0%。兩組的陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

2.3 GLUT4在兩組胎盤組織中表達(dá)水平的比較

對照組中，GLUT4在胞質(zhì)的陽性表達(dá)共37例（92.5%），其中弱陽性10例，陽性17例，強(qiáng)陽性10例；GDM組中GLUT4在胞質(zhì)的陽性表達(dá)共38例（88.4%），其中弱陽性17例，陽性12例，強(qiáng)陽性9例，兩組的陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表3）。

3 討論

IR是機(jī)體對正常濃度胰島素的生理效應(yīng)低于正常水平的一種病理狀態(tài)，主要表現(xiàn)為肌肉組織、脂肪等對葡糖糖的攝取減少，無法有效抑制肝糖輸出，隨著病情的發(fā)展易形成2型糖尿病，患者出現(xiàn)代謝障礙，導(dǎo)致疾病的進(jìn)一步加重。GDM患者與正常妊娠婦女對胰島素敏感性較妊娠前均顯著降低，進(jìn)入妊娠后期因?yàn)槠咸烟堑拇碳?，機(jī)體胰島素分泌顯著上升，外周組織對胰島素敏感度下降[12]。本研究結(jié)果顯示，GDM組的FBG、FINS水平較對照組明顯升高（P<0.05），說明在DDM時(shí)，機(jī)體胰島β細(xì)胞分泌更多的胰島素，進(jìn)而確保血糖維持在相對正常的范圍內(nèi)。HOMA指標(biāo)的對比觀察中，GDM組的HOMA-IR較正常妊娠組升高，HOMA-ISI和HOMA-β%則均降低。IR程度超過孕晚期生理性水平，提示GDM患者有潛在的慢性IR，同時(shí)GDM患者胰島素敏感性低于正常糖耐量孕婦[12]。

臨床研究認(rèn)為，胰島素敏感性下降與胎盤分泌的具有胰島素拮抗作用的激素有關(guān)，而當(dāng)胰島β細(xì)胞分泌胰島素功能增加不足以抵消胰島素敏感性的下降時(shí)，就會出現(xiàn)妊娠期糖耐量降低或GDM。本研究結(jié)果顯示，與正常妊娠組比較，GLUT4在GDM患者胎盤組織胞質(zhì)中的表達(dá)未見明顯異常，而在胞膜的易位有異常表現(xiàn)，說明胎盤組織中IR可能與GLUT4的易位有關(guān)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 孫偉杰，楊慧霞.妊娠期糖尿病的產(chǎn)后隨訪[J].中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，14（4）：227-231.

[2] 米陽，茍文麗，郭娜，等.妊娠期糖尿病胎盤超微結(jié)構(gòu)與胎兒生長異常的關(guān)系[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2010， 26（12）：936-939.

[3] 王娟，鄒麗.孕前肥胖因素對妊娠期糖尿病發(fā)病機(jī)制中IRS-1的表達(dá)及其酪氨酸磷酸化水平的影響[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2009，30（24）：43-45.

[4] 韓瑾，張長寧，崔艷風(fēng)，等.胰島功能及HOMA.IR在不同狀態(tài)下的變化陰[J].實(shí)用糖尿病雜志，2008，5（3）：42-43.

[5] 謝云，李寶毅，黎明，等.新HOMA穩(wěn)態(tài)模型在臨床中的應(yīng)用[J].中國糖尿病雜志，2008，16（2）：110-112.

[6] 朱劍文，何明，周燕，等.妊娠期糖尿病患者肌肉組織中PI3K介導(dǎo)GLUT4跨膜易位的研究[J].中國婦幼保健，2008，23（29）：4182-4185.

[7] 畢會民，歐陽靜萍，鄧向群，等.胰島素抵抗大鼠骨骼肌中蛋白激酶B表達(dá)及葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋84轉(zhuǎn)位的改變[J].中華糖尿病雜志，2005，13（4）：262-264.

[8] 解文卿，張?zhí)K和.妊娠期糖尿病患者網(wǎng)膜脂肪和肌肉組織GLUT4水平的研究[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2009，30（24）：51-53.

[9] 閆洪超，薛加強(qiáng).妊娠期糖尿病患者胎盤超微結(jié)構(gòu)的研究[J].徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，26（3）：248-250.

[10] 李福勤，王雪清，王治英，等.妊娠期糖尿病胎盤微絨毛體視學(xué)研究[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2004，20（4）：217-219.

[11] 楊慧霞.妊娠合并糖尿病臨床實(shí)踐指南[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：256.

[12] 牛建民，郭曉玲.不同糖耐量孕婦血清瘦素與胰島素抵抗、胰島p細(xì)胞功能的相關(guān)性陰[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2004， 20（9）：1012-1014.

（收稿日期：2014-06-04 本文編輯：許俊琴）

妊娠期糖尿?。╣estational diabetes mellitus，GDM）是糖尿病中一種特殊的類型，通常是指在妊娠期間首次出現(xiàn)葡萄糖耐量異常的情況，其中大多數(shù)患者最終轉(zhuǎn)為2型糖尿病[1]。GDM嚴(yán)重威脅母嬰安全，使臨床并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)上升。國外研究發(fā)現(xiàn)，胰島素抵抗（insulin resistance，IR）在GDM發(fā)病中有重要作用，而胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的異常是發(fā)生IR的病理基礎(chǔ)。本研究選取本院產(chǎn)科門診收治的住院分娩孕婦83例，觀察探討了GDM患者胎盤組織中IRS-1和GLUT4的表達(dá)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年3月～2014年3月本院產(chǎn)科門診收治的住院分娩孕婦83例，其中GDM組43例設(shè)為觀察組，年齡22～34歲，平均（27.6±3.4）歲，孕周為36～41周，平均38.2周，初產(chǎn)婦25例，經(jīng)產(chǎn)婦18例；正常足月妊娠組40例設(shè)為對照組，年齡20～33歲，平均（26.2±2.4）歲，孕周為37～41周，平均39.4周，初產(chǎn)婦27例，經(jīng)產(chǎn)婦13例。兩組孕婦的年齡、孕周、孕次比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

參考樂杰主編的《婦產(chǎn)科學(xué)》第6版教科書中GDM的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床診斷[2]。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)

①胎兒發(fā)育正常，無畸形及生長受限、死胎的孕婦；②孕前無嚴(yán)重功能性疾病，如高血壓病、心肝腎功能障礙等；③排除孕前存在內(nèi)分泌疾病的患者；④孕前及孕期未使用皮質(zhì)激素類藥物，使用干擾糖脂代謝類藥物除外。

1.4 方法

1.4.1 血糖和胰島素的測定 在孕婦孕周為24～28周期間進(jìn)行血糖檢測，采血前要求患者禁食12 h，于早晨采集空腹肘靜脈血進(jìn)行檢測，檢測完畢后將75 g葡萄糖粉溶于250 ml水中并要求患者喝完，服完后抽取肘靜脈血測血糖。受試期間要求患者禁食、避免做劇烈運(yùn)動[3-5]。取血后及時(shí)分離血清，并進(jìn)行血糖和胰島素的測定。

1.4.2 生化指標(biāo)檢測 患者入院后對其各臨床指標(biāo)：身高、血壓、體重以及空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FINS）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）等進(jìn)行檢測。參與檢查的患者檢測前空腹12 h，然后于次日清晨采集肘靜脈血4 ml，選取2 ml進(jìn)行肝素抗凝，混勻后離心，吸取血清至試管中，置于-70℃冰箱，然后進(jìn)行血清胰島素水平的檢測[6-8]。

空腹血糖采用葡萄糖氧化酶法進(jìn)行檢測，采用直接化學(xué)發(fā)光法對空腹胰島素進(jìn)行測定并統(tǒng)計(jì)記錄FINS的濃度[9]。

1.4.3 免疫組織化學(xué)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) IRS-1蛋白在細(xì)胞質(zhì)組織中進(jìn)行表達(dá)，GLUT4蛋白在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜表達(dá)，采用定量積分方式對檢測結(jié)果進(jìn)行表示，依據(jù)染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞比例記分，染色強(qiáng)度以多數(shù)陽性細(xì)胞呈現(xiàn)的染色記分，其中未著色或與背景色相同時(shí)為0分；1分：著色淺且與陰性對照切片存在差異；2分：染色強(qiáng)度一般，介于淺著色和強(qiáng)著色之間；3分：著色強(qiáng)度和已知陽性切片相同。陽性細(xì)胞記分中，0分：<5%的細(xì)胞呈陽性或細(xì)胞顯色與背景相同；1分：5%～25%的細(xì)胞呈陽性；2分：26%～50%的細(xì)胞呈陽性；3分：>51%的細(xì)胞呈陽性[10]。

根據(jù)這兩項(xiàng)指標(biāo)的積分?jǐn)?shù)將其分為4級，其中0分為陰性，1～3分為弱陽性，4～6分為陽性，強(qiáng)陽性為7～9分[11]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組糖脂代謝參數(shù)及HOMA的比較

GDM組的FBG、FINS、TG、TC、HOMA-IR均高于對照組，GDM組的HOMA-ISI、HOMA-β%低于對照組（P<0.05）（表1）。

表1 兩組糖脂代謝參數(shù)及HOMA的比較（x±s）

2.2 IRS-1在兩組胎盤組織中表達(dá)水平的比較

GDM組中，IRS-1陽性表達(dá)共32例，其中弱陽性15例，陽性10例，強(qiáng)陽性7例，陽性表達(dá)率為74.4%，對照組的陽性表達(dá)率為95.0%。兩組的陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

2.3 GLUT4在兩組胎盤組織中表達(dá)水平的比較

對照組中，GLUT4在胞質(zhì)的陽性表達(dá)共37例（92.5%），其中弱陽性10例，陽性17例，強(qiáng)陽性10例；GDM組中GLUT4在胞質(zhì)的陽性表達(dá)共38例（88.4%），其中弱陽性17例，陽性12例，強(qiáng)陽性9例，兩組的陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表3）。

3 討論

IR是機(jī)體對正常濃度胰島素的生理效應(yīng)低于正常水平的一種病理狀態(tài)，主要表現(xiàn)為肌肉組織、脂肪等對葡糖糖的攝取減少，無法有效抑制肝糖輸出，隨著病情的發(fā)展易形成2型糖尿病，患者出現(xiàn)代謝障礙，導(dǎo)致疾病的進(jìn)一步加重。GDM患者與正常妊娠婦女對胰島素敏感性較妊娠前均顯著降低，進(jìn)入妊娠后期因?yàn)槠咸烟堑拇碳?，機(jī)體胰島素分泌顯著上升，外周組織對胰島素敏感度下降[12]。本研究結(jié)果顯示，GDM組的FBG、FINS水平較對照組明顯升高（P<0.05），說明在DDM時(shí)，機(jī)體胰島β細(xì)胞分泌更多的胰島素，進(jìn)而確保血糖維持在相對正常的范圍內(nèi)。HOMA指標(biāo)的對比觀察中，GDM組的HOMA-IR較正常妊娠組升高，HOMA-ISI和HOMA-β%則均降低。IR程度超過孕晚期生理性水平，提示GDM患者有潛在的慢性IR，同時(shí)GDM患者胰島素敏感性低于正常糖耐量孕婦[12]。

臨床研究認(rèn)為，胰島素敏感性下降與胎盤分泌的具有胰島素拮抗作用的激素有關(guān)，而當(dāng)胰島β細(xì)胞分泌胰島素功能增加不足以抵消胰島素敏感性的下降時(shí)，就會出現(xiàn)妊娠期糖耐量降低或GDM。本研究結(jié)果顯示，與正常妊娠組比較，GLUT4在GDM患者胎盤組織胞質(zhì)中的表達(dá)未見明顯異常，而在胞膜的易位有異常表現(xiàn)，說明胎盤組織中IR可能與GLUT4的易位有關(guān)。

[參考文獻(xiàn)]

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[4] 韓瑾，張長寧，崔艷風(fēng)，等.胰島功能及HOMA.IR在不同狀態(tài)下的變化陰[J].實(shí)用糖尿病雜志，2008，5（3）：42-43.

[5] 謝云，李寶毅，黎明，等.新HOMA穩(wěn)態(tài)模型在臨床中的應(yīng)用[J].中國糖尿病雜志，2008，16（2）：110-112.

[6] 朱劍文，何明，周燕，等.妊娠期糖尿病患者肌肉組織中PI3K介導(dǎo)GLUT4跨膜易位的研究[J].中國婦幼保健，2008，23（29）：4182-4185.

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[8] 解文卿，張?zhí)K和.妊娠期糖尿病患者網(wǎng)膜脂肪和肌肉組織GLUT4水平的研究[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2009，30（24）：51-53.

[9] 閆洪超，薛加強(qiáng).妊娠期糖尿病患者胎盤超微結(jié)構(gòu)的研究[J].徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，26（3）：248-250.

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[12] 牛建民，郭曉玲.不同糖耐量孕婦血清瘦素與胰島素抵抗、胰島p細(xì)胞功能的相關(guān)性陰[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2004， 20（9）：1012-1014.

（收稿日期：2014-06-04 本文編輯：許俊琴）

妊娠期糖尿?。╣estational diabetes mellitus，GDM）是糖尿病中一種特殊的類型，通常是指在妊娠期間首次出現(xiàn)葡萄糖耐量異常的情況，其中大多數(shù)患者最終轉(zhuǎn)為2型糖尿病[1]。GDM嚴(yán)重威脅母嬰安全，使臨床并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)上升。國外研究發(fā)現(xiàn)，胰島素抵抗（insulin resistance，IR）在GDM發(fā)病中有重要作用，而胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的異常是發(fā)生IR的病理基礎(chǔ)。本研究選取本院產(chǎn)科門診收治的住院分娩孕婦83例，觀察探討了GDM患者胎盤組織中IRS-1和GLUT4的表達(dá)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年3月～2014年3月本院產(chǎn)科門診收治的住院分娩孕婦83例，其中GDM組43例設(shè)為觀察組，年齡22～34歲，平均（27.6±3.4）歲，孕周為36～41周，平均38.2周，初產(chǎn)婦25例，經(jīng)產(chǎn)婦18例；正常足月妊娠組40例設(shè)為對照組，年齡20～33歲，平均（26.2±2.4）歲，孕周為37～41周，平均39.4周，初產(chǎn)婦27例，經(jīng)產(chǎn)婦13例。兩組孕婦的年齡、孕周、孕次比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

參考樂杰主編的《婦產(chǎn)科學(xué)》第6版教科書中GDM的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床診斷[2]。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)

①胎兒發(fā)育正常，無畸形及生長受限、死胎的孕婦；②孕前無嚴(yán)重功能性疾病，如高血壓病、心肝腎功能障礙等；③排除孕前存在內(nèi)分泌疾病的患者；④孕前及孕期未使用皮質(zhì)激素類藥物，使用干擾糖脂代謝類藥物除外。

1.4 方法

1.4.1 血糖和胰島素的測定 在孕婦孕周為24～28周期間進(jìn)行血糖檢測，采血前要求患者禁食12 h，于早晨采集空腹肘靜脈血進(jìn)行檢測，檢測完畢后將75 g葡萄糖粉溶于250 ml水中并要求患者喝完，服完后抽取肘靜脈血測血糖。受試期間要求患者禁食、避免做劇烈運(yùn)動[3-5]。取血后及時(shí)分離血清，并進(jìn)行血糖和胰島素的測定。

1.4.2 生化指標(biāo)檢測 患者入院后對其各臨床指標(biāo)：身高、血壓、體重以及空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FINS）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）等進(jìn)行檢測。參與檢查的患者檢測前空腹12 h，然后于次日清晨采集肘靜脈血4 ml，選取2 ml進(jìn)行肝素抗凝，混勻后離心，吸取血清至試管中，置于-70℃冰箱，然后進(jìn)行血清胰島素水平的檢測[6-8]。

空腹血糖采用葡萄糖氧化酶法進(jìn)行檢測，采用直接化學(xué)發(fā)光法對空腹胰島素進(jìn)行測定并統(tǒng)計(jì)記錄FINS的濃度[9]。

1.4.3 免疫組織化學(xué)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) IRS-1蛋白在細(xì)胞質(zhì)組織中進(jìn)行表達(dá)，GLUT4蛋白在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜表達(dá)，采用定量積分方式對檢測結(jié)果進(jìn)行表示，依據(jù)染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞比例記分，染色強(qiáng)度以多數(shù)陽性細(xì)胞呈現(xiàn)的染色記分，其中未著色或與背景色相同時(shí)為0分；1分：著色淺且與陰性對照切片存在差異；2分：染色強(qiáng)度一般，介于淺著色和強(qiáng)著色之間；3分：著色強(qiáng)度和已知陽性切片相同。陽性細(xì)胞記分中，0分：<5%的細(xì)胞呈陽性或細(xì)胞顯色與背景相同；1分：5%～25%的細(xì)胞呈陽性；2分：26%～50%的細(xì)胞呈陽性；3分：>51%的細(xì)胞呈陽性[10]。

根據(jù)這兩項(xiàng)指標(biāo)的積分?jǐn)?shù)將其分為4級，其中0分為陰性，1～3分為弱陽性，4～6分為陽性，強(qiáng)陽性為7～9分[11]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組糖脂代謝參數(shù)及HOMA的比較

GDM組的FBG、FINS、TG、TC、HOMA-IR均高于對照組，GDM組的HOMA-ISI、HOMA-β%低于對照組（P<0.05）（表1）。

表1 兩組糖脂代謝參數(shù)及HOMA的比較（x±s）

2.2 IRS-1在兩組胎盤組織中表達(dá)水平的比較

GDM組中，IRS-1陽性表達(dá)共32例，其中弱陽性15例，陽性10例，強(qiáng)陽性7例，陽性表達(dá)率為74.4%，對照組的陽性表達(dá)率為95.0%。兩組的陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

2.3 GLUT4在兩組胎盤組織中表達(dá)水平的比較

對照組中，GLUT4在胞質(zhì)的陽性表達(dá)共37例（92.5%），其中弱陽性10例，陽性17例，強(qiáng)陽性10例；GDM組中GLUT4在胞質(zhì)的陽性表達(dá)共38例（88.4%），其中弱陽性17例，陽性12例，強(qiáng)陽性9例，兩組的陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表3）。

3 討論

IR是機(jī)體對正常濃度胰島素的生理效應(yīng)低于正常水平的一種病理狀態(tài)，主要表現(xiàn)為肌肉組織、脂肪等對葡糖糖的攝取減少，無法有效抑制肝糖輸出，隨著病情的發(fā)展易形成2型糖尿病，患者出現(xiàn)代謝障礙，導(dǎo)致疾病的進(jìn)一步加重。GDM患者與正常妊娠婦女對胰島素敏感性較妊娠前均顯著降低，進(jìn)入妊娠后期因?yàn)槠咸烟堑拇碳?，機(jī)體胰島素分泌顯著上升，外周組織對胰島素敏感度下降[12]。本研究結(jié)果顯示，GDM組的FBG、FINS水平較對照組明顯升高（P<0.05），說明在DDM時(shí)，機(jī)體胰島β細(xì)胞分泌更多的胰島素，進(jìn)而確保血糖維持在相對正常的范圍內(nèi)。HOMA指標(biāo)的對比觀察中，GDM組的HOMA-IR較正常妊娠組升高，HOMA-ISI和HOMA-β%則均降低。IR程度超過孕晚期生理性水平，提示GDM患者有潛在的慢性IR，同時(shí)GDM患者胰島素敏感性低于正常糖耐量孕婦[12]。

臨床研究認(rèn)為，胰島素敏感性下降與胎盤分泌的具有胰島素拮抗作用的激素有關(guān)，而當(dāng)胰島β細(xì)胞分泌胰島素功能增加不足以抵消胰島素敏感性的下降時(shí)，就會出現(xiàn)妊娠期糖耐量降低或GDM。本研究結(jié)果顯示，與正常妊娠組比較，GLUT4在GDM患者胎盤組織胞質(zhì)中的表達(dá)未見明顯異常，而在胞膜的易位有異常表現(xiàn)，說明胎盤組織中IR可能與GLUT4的易位有關(guān)。

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（收稿日期：2014-06-04 本文編輯：許俊琴）