呼吸及消化系統(tǒng)疾病黃膩苔微生態(tài)學與舌苔脫落細胞凋亡指數(shù)的比較

吳 凡，董昌武，周雪梅

（安徽中醫(yī)藥大學中醫(yī)臨床學院，合肥 230038）

呼吸及消化系統(tǒng)疾病黃膩苔微生態(tài)學與舌苔脫落細胞凋亡指數(shù)的比較

吳 凡，董昌武*，周雪梅

（安徽中醫(yī)藥大學中醫(yī)臨床學院，合肥 230038）

目的 觀察呼吸系統(tǒng)和消化系統(tǒng)疾病患者的黃膩苔，并比較這兩種系統(tǒng)疾病的黃膩苔在微生態(tài)學和細胞凋亡指數(shù)上的異同。方法 根據(jù)中醫(yī)舌診診斷標準選擇呼吸系統(tǒng)和消化系統(tǒng)疾病具有黃膩苔舌象的患者各20例為實驗組，15例健康者正常舌象為對照組，均刮取舌苔，觀察舌苔的微生態(tài)指標及舌上皮細胞凋亡指數(shù)。結果 實驗組細菌總數(shù)高于對照組，細胞凋亡指數(shù)低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論黃膩苔是濕熱證疾病在舌面上病位病機直觀的病理反應，其與疾病的種類無必然性聯(lián)系，黃膩苔的形成可能與舌的微生態(tài)和舌苔脫落細胞凋亡有關。

呼吸系統(tǒng);消化系統(tǒng);黃膩苔;微生態(tài)學;細胞凋亡

舌象的觀察是中醫(yī)診斷疾病的重要手段，其中黃膩苔是濕熱證的主要表現(xiàn)，也是中醫(yī)臨床辨證的重要依據(jù)之一。有文獻報道［1-2］濕熱證患者存在舌上皮細胞凋亡和舌苔微生態(tài)的改變。筆者以呼吸系統(tǒng)與消化系統(tǒng)疾病患者所致的黃膩苔為研究對象，檢測分析黃膩苔的微生態(tài)學和舌苔脫落細胞凋亡指數(shù)，并與正常人舌苔進行比較，分析其相關性和可能的機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇40例來自安徽中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院消化內科和呼吸內科舌苔為黃膩苔的患者，消化內科男8例，女12例，呼吸內科男11例，女9例，年齡25～62歲;15例正常健康人的舌苔為對照組，男8例，女7例，年齡20～55歲，3組在年齡、性別等方面比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。所有研究對象近期均無口腔疾患和吸煙史。

1.2 觀察舌象 由3位有經驗的老中醫(yī)根據(jù)中醫(yī)舌診診斷標準觀察舌象，黃膩苔為實驗組，消化系統(tǒng)組和呼吸系統(tǒng)組各20例，淡紅舌，薄白苔為正常組，共15例。

1.3 標本采集 標本采集在上午9:00—11:00時進行，讓受檢者使用涼開水漱口1～2次，后用生理鹽水漱口2次，用消毒紗布固定好受檢者舌尖，以中等力度用塑料小勺刮取舌中部舌苔2～3次，刮取物用消毒棉簽蘸取部分，涂抹于玻片上行微生態(tài)檢測，剩余部分用生理鹽水沖洗收集成約30 mL的懸液進行細胞凋亡指數(shù)檢測。

1.4 檢測方法

1.4.1 舌苔微生態(tài)檢測 玻片經革蘭氏染色后，光學顯微鏡下觀察，查找大于50個油鏡視野，細菌總數(shù)按每視野 10，102，103，104，105，106記錄，取平均值。

1.4.2 舌苔上皮細胞凋亡指數(shù)檢測 舌苔懸液低溫離心（4℃，3 000 r/min），取沉淀做細胞涂片，晾干后4%多聚甲醛固定1 h，1%曲拉通破膜（4℃，10 min）;加入TUNEL液（37℃，1 h），以上各步驟間均用PBS沖洗3次，然后POD 37℃作用30 min，顯色（DAB），蘇木精輕度復染，封片，鏡檢。光鏡下（×200）觀察正常及凋亡陽性細胞，4個視野下觀察500個細胞，計算每100個細胞中的陽性細胞數(shù)，即為凋亡指數(shù)。

1.5 統(tǒng)計學方法 統(tǒng)計學分析應用SPSS 11.0軟件，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，經方差齊性檢驗和正態(tài)性檢驗，組間比較用方差分析和t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各組舌上皮細胞凋亡指數(shù)的變化比較 消化組、呼吸組與正常組比較，舌苔脫落細胞凋亡指數(shù)有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 各組舌上皮細胞凋亡指數(shù)的變化比較（±s）

表1 各組舌上皮細胞凋亡指數(shù)的變化比較（±s）

注:與正常組比較，#P＜0.05

組 別 例數(shù) 細胞凋亡指數(shù)消化組 20 6.936 5±5.339 7#呼吸組 20 6.038 2±5.276 6#正常組 15 12.668 9±11.334 3

2.2 各組舌苔細菌總數(shù)的變化比較 消化組、呼吸組與正常組比較，舌苔細菌總數(shù)有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。3 討論

表2 各組舌苔細菌總數(shù)的變化比較（±s）

表2 各組舌苔細菌總數(shù)的變化比較（±s）

注:與正常組比較，#P＜0.05

組 別 例數(shù) 細菌總數(shù)lg（10n±s）消化組 20 4.84±1.06#呼吸組 20 4.62±1.04#正常組 15 3.87±1.23

舌背黏膜表面上絲狀乳頭的角化樹、外形、排列、增生或萎縮等決定了舌苔類型和變化［3］。實驗研究表明，黃膩苔形成主要是由于發(fā)熱、感染等原因致機體脫水，絲狀乳頭延長，舌自潔作用減弱，局部的炎癥滲出等作用所導致。舌苔厚度與舌苔脫落細胞的增殖、分化及凋亡之間的平衡密切相關［4］。舌苔脫落細胞的理化指標也與舌苔的形成有一定聯(lián)系，陳宇等［5］通過研究表明，舌苔脫落細胞中的乳酸脫氫酶（LDH）、酸性磷酸酶（ACP）、琥珀酸脫氫酶（SDH）的活性與不同舌象的形成存在一定的聯(lián)系。舌表面菌群失調也是影響舌苔變化的重要因素，口腔內溫暖潮濕而營養(yǎng)豐富的環(huán)境有利于微生物的定植和生長，微生物群的競爭和拮抗也影響舌苔的變化。梁文娜等［6］研究表明，舌表面微生態(tài)熵變是調控舌象變化的關鍵因素。朱蓮娜等［7］通過微生態(tài)學涂片檢查方法發(fā)現(xiàn)濕熱證黃膩苔細菌總數(shù)及種類明顯多于薄白苔正常組。舌苔脫落細胞與微生態(tài)在證候形成過程中也存在聯(lián)系，李燦東等［8］通過研究表明，慢性胃炎脾胃虛實證候舌苔脫落細胞與胃幽門螺旋桿菌感染具有相關性。

中醫(yī)學認為，舌苔為脾胃蒸騰水谷之氣聚于舌面之上而形成。脾胃功能強健，水谷代謝正常，氣血調和，病邪難以滋生，則口腔內的微生態(tài)環(huán)境穩(wěn)定;脾胃功能正常，舌上皮不斷更新代謝，絲狀乳頭角化層更新及時，即可形成薄白苔; 濕熱之邪侵襲脾胃，脾胃功能降低，水谷不能運化，氣血不能上榮于舌，舌上皮細胞營養(yǎng)汲取障礙，細胞異常凋亡，絲狀乳頭不能正常角化脫屑，附著于舌面形成黃膩苔。本研究發(fā)現(xiàn):黃膩苔與薄白苔比較，凋亡程度明顯降低，細菌數(shù)目明顯增多，不同病種之間黃膩苔的細菌總數(shù)及凋亡指數(shù)比較無統(tǒng)計學意義。可以認為，黃膩苔是濕熱證病理變化的重要體現(xiàn)，與舌上皮細胞的凋亡及細菌的滋生關系密切，與疾病的種類并無確切關系。而舌苔上皮細胞凋亡減少和舌苔上細菌增生可能是黃膩苔舌象形成的重要基礎。

:

［1］呂軍影，黃李平，闕鐵生，等.濕熱證患者舌苔微生態(tài)的研究［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2008，35（4）:487-488.

［2］呂軍影，黃李平，闕鐵生，等.濕熱證患者舌苔舌上皮細胞凋亡的研究［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2007，34（12）:1677-1678.

［3］陳群，徐志偉，武哲麗，等.舌苔脫落細胞學在中醫(yī)辨證分型中的應用規(guī)律探討［J］.中醫(yī)雜志，2005，46（5）:377-379.

［4］吳正治，李明，張詠梅，等.常見舌苔舌上皮細胞凋亡及其相關基因表達研究［J］.中國醫(yī)藥學報，2004，19（2）:98-100.

［5］陳宇，任健，劉家義.120例慢性胃炎患者舌苔脫落細胞理化指標與中醫(yī)辨證相關性研究［J］.長春中醫(yī)藥大學學報，2008，24（3）:273-274.

［6］梁文娜，李燦東，甘慧娟，等.舌表面微生態(tài)熵變影響舌苔變化的機制探討［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2013，28（2）:477-479.

［7］朱蓮娜，黃李平，呂軍影，等.微生態(tài)學方法在濕熱證舌苔微生物群研究中的應用［J］.廣西醫(yī)學，2009，31（4）:480-482.

［8］李燦東，蘭啟防，趙永洲，等.慢性胃炎舌印片與證候及幽門螺桿菌的相關性研究［J］.福建中醫(yī)學院學報，2002，12（4）:8-10.

Comparative study on micro-ecology and tongue epithelial cell apoptosis index of yellow greasy tongue fur induced by respiratory and digestive system diseases

WU Fan，DONG Changwu*，ZHOU Xuemei
（Clinical College，Anhui University of Chinese Medicine，Hefei 200038，China）

ObjectiveTo observe the yellow greasy tongue fur of patients with respiratory disease and digestive disease，and compare the micro-ecology and epithelial cell apoptosis index of yellow greasy tongue fur between patients with respiratory disease and those with digestive disease.MethodsAccording to the diagnostic criteria of TCM tongue inspection，40 patients with yellow greasy tongue fur induced by respiratory disease and digestive disease were divided equally into two experimental groups，with 15 healthy volunteers in the control group.Tongue furs of patients in these three groups were scraped and micro-ecology and tongue epithelial cell apoptosis index of tongue fur were observed and studied.ResultsThe total bacterial count of tongue fur in the experimental groups was higher than that in the control group，The tongue epithelial cellapoptosis index in the experimental groups was lower than that in the control group，with significant differences between the experimental groups and the control group（P ＜0.05）.Conclusions Yellow greasy tongue fur is an intuitive pathological reaction of the damp-heat syndrome on the surface of the tongue，but there is no necessary connection between yellow greasy tongue fur and the category of diseases.The formation of yellow greasy tongue fur may be related to micro-ecology of the tongue and apoptosis of tongue epithelial cell.

respiratory system;digestive system;yellow greasy tongue fur;micro-ecology;apoptosis

R241.25

A

2095－6258（2014）05－0874－02

10.13463/j.cnki.cczyy.2014.05.043

安徽中醫(yī)藥大學青年基金（2013qn001）。

吳 凡（1987－），碩士，實驗員。研究方向:中醫(yī)診法研究。

董昌武，碩士研究生導師，電話:0551-65119271。

2014－04－09）