早期補(bǔ)充維生素D對早產(chǎn)兒免疫球蛋白和IL-2的影響

尹成敏，時慶康

（中國人民解放軍第一零五醫(yī)院兒科，安徽合肥230031）

早期補(bǔ)充維生素D對早產(chǎn)兒免疫球蛋白和IL-2的影響

尹成敏，時慶康

（中國人民解放軍第一零五醫(yī)院兒科，安徽合肥230031）

目的探討早期補(bǔ)充維生素D對早產(chǎn)兒免疫球蛋白和IL-2的影響。方法隨機(jī)選取92例本院新生兒科自2012年1月～2014年6月收治的早產(chǎn)兒為研究對象，根據(jù)早產(chǎn)兒的胎齡分為小胎齡組（胎齡≤33周）和大胎齡組（胎齡33～37周），另隨機(jī)選擇40例健康新生兒為正常組（胎齡37～42周），將3組新生兒再各隨機(jī)均分為觀察組和對照組。3組對照組只采用早產(chǎn)兒配方奶粉喂養(yǎng)，觀察組在對照組基礎(chǔ)上，于出生后第3天起給予補(bǔ)充維生素D。連續(xù)喂養(yǎng)10d后對各組新生兒有關(guān)血液免疫指標(biāo)進(jìn)行檢測。結(jié)果3組新生兒出生后3d和14d均出現(xiàn)較為嚴(yán)重的維生素D缺乏表現(xiàn)，其中小胎齡組最為嚴(yán)重。經(jīng)維生素D補(bǔ)充后，各組新生兒血清25-（OH）D含量均有所升高，其中小胎齡組升高趨勢最為明顯。3組觀察組IL-2含量出現(xiàn)顯著升高，與對照組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），而IgA，IgG和IgM免疫球蛋白差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論早產(chǎn)兒出生后補(bǔ)充維生素D有益于提高新生兒免疫力，其對細(xì)胞免疫中的IL-2影響顯著，而對體液免疫中的免疫球蛋白影響仍有待深入研究。

維生素D；早產(chǎn)兒；免疫球蛋白；IL-2

維生素D（vitamin D，VD）是機(jī)體內(nèi)一種較為獨(dú)特的生物活性物質(zhì)［1］，其不但具有調(diào)節(jié)人體鈣磷代謝，維持血鈣、血磷含量平衡以及骨的礦化等作用，還與腫瘤、傳染性疾病、高血壓以及免疫系統(tǒng)疾病的發(fā)生具有密切的關(guān)系［2］。現(xiàn)代研究表明，體內(nèi)維生素D的含量對機(jī)體免疫系統(tǒng)具有重要的影響［3］。維生素D已成為全球關(guān)注的熱點(diǎn)，據(jù)有關(guān)統(tǒng)計表明，目前全球維生素D缺乏人口高達(dá)十億。近年來，我國早產(chǎn)兒的發(fā)病率逐漸升高，由于其各系統(tǒng)器官發(fā)育尚不完善，早產(chǎn)兒的生命體征以及適應(yīng)能力較差，容易導(dǎo)致并發(fā)癥的產(chǎn)生，嚴(yán)重者甚至導(dǎo)致死亡［4］。早產(chǎn)兒由于自母體內(nèi)攜帶的維生素的量有限，在后期的成長過程中常常是維生素D缺乏的高危人群。本研究通過早期對92例早產(chǎn)兒進(jìn)行早期維生素D，探討其臨床效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選取92例本院新生兒科自2012年1月～2014年6月收治的早產(chǎn)兒為研究對象，胎齡為（32.4±1.6）周；體質(zhì)量為（1798±354）g。根據(jù)早產(chǎn)兒的胎齡分為小胎齡組（胎齡≤33周）和大胎齡組（胎齡33～37周），其中小胎齡組42例，男27例，女15例，胎齡為（31.2±1.7）周；體質(zhì)量為（1598± 332）g；大胎齡組50例，男29例，女21例，胎齡為（33.2±1.5）周；體質(zhì)量為（2318±302）g。此外隨機(jī)選擇40例健康新生兒為正常組（胎齡37～42周），男25例，女15例，胎齡為（39.2± 1.3）周；體質(zhì)量為（3318±292）g。3組新生兒隨機(jī)再各組內(nèi)均分為觀察組和對照組。本研究所有列入研究的新生兒均在家屬知情并同意條件下進(jìn)行，各組新生兒均無先天性及代謝性疾病，無嚴(yán)重并發(fā)癥發(fā)生（感染、呼吸障礙、缺氧），在性別、胎齡、體質(zhì)量、分娩方式等臨床資料比較上差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2 方法 小胎齡組和大胎齡組早產(chǎn)兒給予常規(guī)早產(chǎn)兒入院護(hù)理，3組新生兒中的對照組在喂養(yǎng)方式上只采用早產(chǎn)兒配方奶粉，觀察組在對照組基礎(chǔ)上，于出生后第3天起給予補(bǔ)充維生素D（口服，400 U／d），連續(xù)喂養(yǎng)10 d后采集各組新生兒的血液進(jìn)行檢測。對各組喂養(yǎng)的新生兒出現(xiàn)能力不足者，給予全胃腸外靜脈營養(yǎng)劑。在喂養(yǎng)過程中，嚴(yán)密觀察患兒是否出現(xiàn)腹瀉、惡心、嘔吐、便秘、發(fā)熱、排尿異常以及心率不齊等不良反應(yīng)。

1.3 指標(biāo)檢測 選取各組新生兒出生后3、14 d空腹靜脈血作為檢測標(biāo)本，室溫放置2～4 h，待充分凝血析出血清后，使用離心機(jī)（3000 r／min）分離血清，將制備的血清放置于20℃的冰箱保存，作為檢測標(biāo)本。采用酶聯(lián)免疫分析法對檢測標(biāo)本中的25-（OH）D（試劑盒購自英國IDS LTD公司）和IL-2（試劑盒購自美國RD公司）進(jìn)行檢測（酶標(biāo)儀為美國BIO－TEK ELx800型），通過測定肝功能得到血清球蛋白總量，采用免疫比濁發(fā)測定血清IgA、IgG、IgM。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行分析，正態(tài)計量資料用“±s”，組間比較采用t檢驗(yàn)，計數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清25-（OH）D含量比較 3組新生兒出生后3 d和14 d血清25-（OH）D檢測結(jié)果表明，3組新生兒均出現(xiàn)較為嚴(yán)重的維生素D缺乏表現(xiàn)［將血清25-（OH）D含量低于50 mmol／L為維生素D缺乏標(biāo)準(zhǔn)］，其中小胎齡組最為嚴(yán)重，大胎齡組次之，正常新生兒組也存在較為嚴(yán)重的維生素D缺乏。經(jīng)后期維生素D干預(yù)補(bǔ)充后，各組新生兒血清25-（OH）D含量均有所升高，其中小胎齡組升高趨勢最為明顯，各組的維生素D缺乏情況均有所改善（見表1）。

表1 3組出生后第3天和14天各組間25-（OH）D血清含量比較Tab.1 Comparison of serum 25-（OH）D content in each group

2.2 免疫球蛋白以及IL-2指標(biāo) 3組新生兒中的實(shí)驗(yàn)組經(jīng)維生素D后期補(bǔ)充后（出生后14 d），IL-2含量出現(xiàn)顯著升高，與未補(bǔ)充維生素D前（出生后3 d）相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；而IgA，IgG和IgM免疫球蛋白雖然也出現(xiàn)升高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（見表2）。

表2 出生后第3天和14天各組間IL-2和免疫球蛋白指標(biāo)比較Tab.2 Comparison of IL-2 and immunoglobulin index in each group 3 days and 14 days after born

2.3 安全性評價 3組新生兒在入院階段基本情況穩(wěn)定，未發(fā)生出血、感染以及呼吸障礙等并發(fā)癥，小胎齡觀察組早產(chǎn)兒出現(xiàn)1例便秘，經(jīng)對癥治療后痊愈，未發(fā)生嘔吐、心律不齊、排尿異常等肝腎功能異常、血液系統(tǒng)病變以及藥物不良反應(yīng)。

3 討論

胎兒在發(fā)育過程中，體內(nèi)25-（OH）D均通過胎盤從母體獲得，其含量約為母體的50%～70%。這表明，若母親體內(nèi)維生素D缺乏，則胎兒體內(nèi)維生素D必定出現(xiàn)缺乏，極易導(dǎo)致新生兒發(fā)生先天性佝僂病。據(jù)統(tǒng)計研究表明，孕齡婦女普遍存在維生素D缺乏，97%亞裔孕婦、81%拉美裔、67%高加索白人孕婦均表現(xiàn)出維生素D缺乏［5］。與國外同期報道的早產(chǎn)兒維生素D缺乏情況相比，本次研究中100%的早產(chǎn)兒發(fā)生維生素D缺乏，高于國外有關(guān)文獻(xiàn)報道［6-7］，可能與本次取樣量較小有關(guān)，但也說明我國的早產(chǎn)兒中維生素D缺乏情況已較為嚴(yán)重。在本次研究中發(fā)現(xiàn)，出生后3 d、14 d的新生兒中，維生素D缺乏的嚴(yán)重程度依次為小胎齡組、大胎齡組、正常新生兒組，與國內(nèi)有關(guān)文獻(xiàn)報道相符［8-9］。上述研究結(jié)果表明，早產(chǎn)兒極易發(fā)生維生素D缺乏，且胎齡越小發(fā)生幾率越高。

國外關(guān)于早產(chǎn)兒維生素D需求建議指出，新生兒需在出生后幾天內(nèi)開始補(bǔ)充維生素D，而關(guān)于早產(chǎn)兒的維生素D需求量仍有待深入研究。日本學(xué)者發(fā)現(xiàn)90%以上的早產(chǎn)兒存在多種營養(yǎng)物質(zhì)缺乏，建議在嬰兒出生后不久進(jìn)行維生素D的補(bǔ)充，攝入量需達(dá)到400 IU／d，以保證其正常生物學(xué)效應(yīng)的發(fā)揮［10］。歐洲嬰幼兒營養(yǎng)專家研究發(fā)現(xiàn)，800～1000 IU／d的維生素D攝入量可充足保證維生素D的需求量且無任何毒性。我國《維生素D缺乏性佝僂病防治建議》指出早產(chǎn)或低于正常出生體重的新生兒，出生后需補(bǔ)充維生素D，攝入量為800～1000U／d。結(jié)合國內(nèi)外關(guān)于維生素D補(bǔ)充的劑量及時間研究結(jié)果，本研究以新生兒出生后3天開始補(bǔ)充維生素D，劑量為400 U／d，其中小胎齡組血清25-（OH）D含量從（23.556±6.532）mmol／L顯著提高至（29.326±7.212）mmol／L，大胎齡組和正常新生兒組也分別從（29.611±8.359）、（27.674±8.453）mmol／L提高至（32.231± 8.534）、（33.631±8.132）mmol／L。本次研究結(jié)果顯示，經(jīng)出生后補(bǔ)充維生素D，新生兒的維生素D缺乏情況得到改善，但其血清25-（OH）D指標(biāo)仍低于正常指標(biāo)（50 mmol／L）。這說明新生兒出生后，應(yīng)在維生素D安全劑量范圍內(nèi)加大維生素D的補(bǔ)充量，在防止維生素D過量的前提下，使血清25-（OH）D含量達(dá)到理想指標(biāo)，以改善新生兒維生素D缺乏狀況。

1，25-（OH）2D3是維生素D的體內(nèi)活性形式，其不但能夠具有調(diào)節(jié)鈣磷代謝的作用，還能夠影響體內(nèi)某些細(xì)胞的生長和分化，通過維生素受體介導(dǎo)發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。1，25-（OH）2D3能夠提高單核和巨噬細(xì)胞的免疫能力，刺激和調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞因子（IL-1、2、3、6和TNF－α、β）的產(chǎn)生和釋放。IL-2在機(jī)體內(nèi)能夠介導(dǎo)特異性免疫應(yīng)答，能夠從一定程度上反應(yīng)機(jī)體的免疫應(yīng)答能力。臨床研究證實(shí)，IL-2含量較低是導(dǎo)致新生兒疾病發(fā)生的重要因素，而早產(chǎn)兒體內(nèi)IL-2含量顯著低于正常新生兒。在免疫調(diào)節(jié)過程中，1，25-（OH）2D3可直接作用在CD4＋T細(xì)胞，對靶基因IL-2進(jìn)行調(diào)控。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在免疫性疾病中，1，25-（OH）2D3可通過免疫性應(yīng)答作用，對CD4＋、CD25＋細(xì)胞中的IL-2啟動基因進(jìn)行調(diào)控，對免疫性疾病產(chǎn)生調(diào)控［11］。在本次研究結(jié)果表明，新生兒出生后給予維生素D補(bǔ)充，血清25-（OH）D含量顯著升高，血清IL-2含量也得到了顯著提高。這表明維生素D能夠調(diào)節(jié)體內(nèi)IL-2水平，有利于提高新生兒的機(jī)體免疫能力。

目前，國內(nèi)外關(guān)于維生素D對新生兒體內(nèi)免疫球蛋白的影響的報道相對較少。在反復(fù)呼吸道感染患兒中，補(bǔ)充維生素D后，患兒的血清25-（OH）D含量以及T細(xì)胞亞群均出現(xiàn)顯著升高，而免疫球蛋白IgG、IgA、IgM水平未出現(xiàn)顯著變化［12］。在多發(fā)性硬化患者中，血清25-（OH）D含量與IgG含量不具有相關(guān)性，IgG合成不受維生素D的影響［13］。本次研究結(jié)果顯示，新生兒給予補(bǔ)充維生素D后，免疫球蛋白IgG、IgA、IgM水平得到一定程度的改善，但并不具有統(tǒng)計學(xué)意義。筆者認(rèn)為，維生素D主要對細(xì)胞免疫產(chǎn)生影響，而對體液免疫影響較小，B淋巴細(xì)胞內(nèi)不具有VDR，故1，25-（OH）2D3并不能影響B(tài)淋巴細(xì)胞的正常功能。此外，早產(chǎn)兒自身免疫功能發(fā)育尚未成熟，而影響免疫球蛋白水平的因素較多，在較短的時間內(nèi)，維生素D對體液免疫的影響有限，其對免疫功能的影響有待深入研究。

［1］ 陳兆聰.維生素D再認(rèn)識［J］.醫(yī)藥導(dǎo)報，2011，30（5）：555-560.

［2］Holick MF，Chen TC.Vitamin D deficiency：A word side problem with health consequences［J］.Am JClin NUTR，2008，87（4）：1080-1086.

［3］ 董時軍，周英紅，李曉松，等.維生素D抗呼吸道感染免疫研究近況［J］.預(yù)防醫(yī)學(xué)情報雜志，2010，26（8）：634-635.

［4］Garbarski D，Witt WP.Child health，maternal marital and socioeconomic factors，and maternal health［J］.JFan Issues，2013，34（4）：484-509.

［5］Bikle D.Nonclassic actions of vitamin D［J］.J Clin Endocri-nol Metab，2009，94（1）：26-34.

［6］Agarwal R，Virmani D，Jaipal ML，et al.Vitamin d status of low birth weight infants in Delhi：a comparative study［J］.Am J Perinatol，2012，29（8）：573-578.

［7］Dawodu A，Nath R.High prevalence of moderately severe vitamin D deficiency in preterm infants［J］.Pediatr Int，2011，53（2）：207-210.

［8］ 張麗萍，任建立，張秀芬，等.早期補(bǔ)充維生素D對158例早產(chǎn)兒IL-2和免疫球蛋白的影響［J］.中國兒童保健雜志，2014，22（5）：473-475.

［9］ 李軍軍，丁曉春.新生兒血清25羥維生素D3水平的動態(tài)變化及意義［J］.中國兒童保健雜志，2012，20（2）：130-131.

［10］Dall'Agnola A，Beghini L.Post-discharge supplementation of vitamins and minerals for preterm neonates［J］.Early Hum Dev，2009，85（10）：S27-S29.

［11］Gorman S，Judge MA，Hart PH.Gene regulation by 1，25-dihydroxyvitamin D3 in CD4＋CD25＋cells is enabled by IL-2［J］.J Invest Dermatol，2010，130（10）：2368-2376.

［12］楊月亮，李振玲.維生素D與免疫功能關(guān)系分析［J］.濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2003，26（2）：93-94.

［13］Holmy T，Lossius A，Gundersen TE，et al.Intrathecal levels of vitamin D and Ig G in multiple sclerosis［J］.Acta Neurol Scand，2012，125（6）：28-31.

（編校：吳茜）

Effect of early vitam in D supp lementation on premature infants w ith immunoglobulin and IL-2

YIN Cheng-min，SHIQing-kang

（Department of Pediatrics，Chinese People's Liberation Army 105 Hospital，Hefei，230031 China）

ObjectiveTo explore the effect of early vitamin D supplementation on premature infants with immunoglobulin and IL-2.MethodsAccording to the gestationalage，92 patientswith premature infants diagnosed between January 2012 and June2014 were randomly selected as the small for gestational age group（gestational age≤33 weeks）and the large for gestational age group（gestational age 33～37 weeks），and 40 healthy newborn were selected as the normal group（gestational age 37～42 weeks）.The three groups were divided into research group and control group，the control group was given formula feeding，while on the basis of the control group，the research group was given the supplementation of vitamin D from 3rd day after birth，and the relevant serum immunity level was measured after continuous feeding 10 d.ResultsThe vitamin D deficiency was high prevalence among the three groups，and the small for gestational age group was themost severe.After the supplementation of vitamin D，the serum 25-（OH）D level of each group increased，in which the small for gestational age group was themost.The IL-2 level of the research group was significantly higher than that of the control group（P＜0.05）；while the immunoglobulin level（such as IgA，IgG，IgM）showed no significant change.ConclusionEarly vitamin D supplementation can improve premature infants'immunity and shows significant effect on IL-2 in cell immunity，while the effect on immunoglobulin in humoral-mediated immunity required the further research.

vitamin D；newborn；immunoglobulin；IL-2

R153.2

A

1005－1678（2014）09－0157－03

尹成敏，男，本科，主治醫(yī)生，研究方向：兒科呼吸系統(tǒng)疾病，E-mail：110901051＠qq.com。