馬黛茶對高脂血癥大鼠血液流變學(xué)及心肌ATP酶活性的影響

高紅莉 劉昭純 陳 強 曲曉蘭

(泰山醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，山東 泰安 271016)

研究發(fā)現(xiàn)，馬黛茶主要含有多酚類、生物堿、黃酮、皂苷等成分〔1～3〕，具有抗氧化〔4〕、抗炎〔5〕、減肥〔6〕等作用。高脂血癥是動脈粥樣硬化及心血管疾病的主要危險因素〔7〕。血清總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的升高是導(dǎo)致高脂血癥的主要原因之一，與冠心病的發(fā)病率和死亡率呈正相關(guān)，因此控制血脂成為上述疾病防治的重要措施。近年來天然植物提取物對心血管疾病的預(yù)防和治療作用多有報道，已有研究表明馬黛茶具有一定的心血管保護功能〔8〕，但其抗心血管病變的機制尚不完全清楚。本實驗探討馬黛茶對高脂血癥心血管的作用及機制。

1 材料與方法

1.1實驗動物 SPF級雄性SD大鼠50只，體重180～220 g，山東中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供〔動物合格證號：SCXK(魯)20080015〕。飼養(yǎng)于泰山醫(yī)學(xué)院實驗動物中心SPF 級環(huán)境中，室溫(22 ± 2)℃，相對濕度(45 ± 15)％，光暗周期12 h，自由攝食和飲水，飼料飲水每日更新。按組別分盒喂養(yǎng)，每盒2只，連續(xù)喂養(yǎng) 8 w。

1.2藥物 馬黛茶為阿根廷原裝進口(商品Yerba Mate，無梗馬黛茶，阿根廷瑪利亞公司，批號L280 7A3311)，本實驗使用為同一批次馬黛茶。以綠原酸為標準品，用Folin-Ciocalteu法〔9〕測得馬黛茶干葉中馬黛茶多酚的含量為340 mg/g。分別稱取馬黛茶碎干葉10 g，20 g，40 g，加入蒸餾水(95℃)1 000 ml沖泡20 min之后濾紙過濾，放置至室溫備用，茶液濃度分別為10，20，40 g/ml(1％，2％，4％ w/v)。實驗用茶為每天新鮮配制。馬黛茶的大鼠日飲用量約為30 ml(體重按300 g計)，則馬黛茶高、中、低劑量約為1 g/kg，2 g/kg和4 g/kg。

1.3試劑 血清TC試劑盒(批號100451)、甘油三酯(TG)試劑盒(批號100671)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)試劑盒(批號100381)、LDL-C試劑盒(批號100321)均購于中生北控生物科技股份有限公司。ATP 酶測定試劑盒(Na+-K+-ATPase 及Ca2+-Mg2+-ATPase，批號20110610)和考馬斯亮藍蛋白定量試劑盒(批號20101027)由南京建成生物工程研究所提供。綠原酸標準品為中國食品藥品檢定研究院提供，其余試劑為國產(chǎn)分析純。

1.4主要儀器 利霸XL-600全自動生化分析儀(德國)，SA-6000 全自動旋轉(zhuǎn)式血流變分析儀(北京賽科希德公司)；T6新世紀紫外可見分光光度計(北京普析通用)，JA-1003A電子分析天平(上海精天電子儀器有限公司)及水浴鍋、離心機等。

1.5實驗方法 50只雄性SD大鼠，基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1 w后，根據(jù)體重隨機分為五組：正常對照組，高脂模型組，馬黛茶高、中、低劑量處理組，每組10只。正常對照組進食基礎(chǔ)飼料，其余四組進食高脂飼料(78.8％基礎(chǔ)飼料添加1％膽固醇、0.2％膽酸鈉、10％豬油、10％蛋黃粉)，連續(xù)8 w。第5周起馬黛茶高劑量處理組大鼠飲水完全以4％濃度馬黛茶水提液代替，馬黛茶中劑量組則給予2％濃度的馬黛茶液，馬黛茶低劑量組給予1％馬黛茶液，正常對照組和高脂模型組繼續(xù)給予純凈水，連續(xù)處理4 w。每日測量大鼠24 h馬黛茶/純凈水的飲用量，實驗期間自由攝食，每周測體重及攝食量2次。

1.6觀察指標 第8周末，大鼠禁食12 h后水合氯醛(350 mg/kg)麻醉，腹主動脈采血，其中5 ml全血肝素抗凝，全自動血流變檢測儀測定全血黏度及血漿黏度。另3 ml全血分離血清，全自動生化儀酶學(xué)法測定TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量。取血后，取相同部位大鼠心肌，在冰水浴中勻漿，-20 ℃保存?zhèn)溆谩０丛噭┖姓f明，分別測定勻漿中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性，用考馬斯亮藍比色法測定勻漿液中的蛋白含量。

1.7統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0軟件進行單因素方差分析及t檢驗。

2 結(jié) 果

2.1馬黛茶對高脂血癥大鼠體重的影響 實驗期間，各組大鼠生長正常，各組之間的攝食量無明顯差別，馬黛茶/水的日攝入量約為29 ml/只，各組之間無明顯差別(P>0.05)。各組初始體重組間無明顯差異(P>0.05)，而高脂模型組大鼠的終末體重明顯高于正常對照組(P<0.05)，提示長期食用高脂食物容易引起體重過度增加。馬黛茶高劑量組大鼠終末體重明顯低于高脂模型組(P<0.05)，馬黛茶中、低劑量組體重低于高脂模型組，但統(tǒng)計學(xué)比較無明顯差異(P>0.05)。見表1。

2.2馬黛茶對高脂血癥大鼠血脂水平的影響 高脂模型組大鼠血清 TC、TG、LDL-C水平顯著高于正常對照組，而HDL-C水平顯著低于正常對照組(P<0.01)，提示造模成功。馬黛茶高、中劑量處理組能明顯降低血清TC和LDL-C水平(P<0.05)，高劑量組馬黛茶能顯著降低TG水平，升高HDL-C水平(P<0.05)。見表2。

表1 馬黛茶對高脂血癥大鼠體重的影響

表2 馬黛茶對高脂血癥大鼠血脂及血液流變學(xué)水平的影響

2.3馬黛茶對高脂血癥大鼠血液流變學(xué)的影響 高脂模型組全血黏度和血漿黏度均高于正常對照組(P<0.01)。與高脂模型組比較，馬黛茶高、中、低劑量組均可降低大鼠血漿黏度(P<0.01或P<0.05)。馬黛茶高劑量組可明顯降低高脂血癥大鼠全血黏度中切和低切(P<0.05)，馬黛茶中劑量組可降低高脂血癥大鼠全血黏度低切(P<0.05)，而馬黛茶高、中、低劑量組對全血黏度高切沒有明顯作用(P>0.05)，提示馬黛茶有較好的改善高脂血癥大鼠血液黏度的特性。見表2。

2.4馬黛茶對高脂血癥大鼠心肌ATP酶影響 高脂模型組大鼠心肌Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性顯著降低(P<0.01)。與高脂模型組比較，高劑量馬黛茶處理組大鼠的心肌Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均顯著升高(P<0.05)，中劑量馬黛茶組的心肌Ca2+-Mg2+-ATP酶活性顯著升高(P<0.05)，提示馬黛茶可保護高脂血癥大鼠的心肌功能。見表3。

表3 馬黛茶對高脂血癥大鼠心肌ATP酶的影響

3 討 論

高脂血癥被認為是心血管疾病發(fā)病的一種重要危險因素〔10〕。目前，心血管疾病引發(fā)的死亡率一直居高不下，而患有心血管疾病的患者通常伴有TC和LDL-C水平的升高〔11〕，因此控制血脂成為防治心血管疾病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

血液流變學(xué)指標的異常變化是心腦血管疾病出現(xiàn)臨床癥狀之前的早期表現(xiàn)，其發(fā)生的機制與血脂水平的變化密切相關(guān)〔12〕。高脂血癥時，TC、TG增加，細胞膜膽固醇含量增加，可致膜流動性降低，通過影響紅細胞膜脂質(zhì)雙層和骨架蛋白，使紅細胞膜微黏度增高，變形能力下降，纖維蛋白溶酶活性和血小板聚集功能異常改變，致使血液流速降低，微循環(huán)減慢，導(dǎo)致組織缺血缺氧及代謝紊亂。同時血液流變學(xué)異常又可成為高脂血癥的一種中間環(huán)節(jié)或促進因子，加重和促進高脂血癥所致的病理改變和臨床癥狀。心肌Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶對維持心肌細胞正常的離子梯度、維持心肌細胞正常收縮功能具有重要的作用〔13〕。心肌功能受損時，Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性下降。

本實驗表明，高脂飲食是導(dǎo)致高脂血癥的重要因素，同時發(fā)現(xiàn)高脂血癥大鼠血液黏度增高，心肌ATP酶活性降低。而馬黛茶可降低血脂，改善血液流變性，提高心肌ATP酶活性，從而降低動脈粥樣硬化的風(fēng)險，具有保護心血管系統(tǒng)的功能，其藥理作用的詳細機制，有待深入研究。

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