越桔原花青素對(duì)SHG-44腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用

鐘 越 齊 玲 楊寧江 任 曠 楊淑艷 趙東海 劉曉陽(yáng)

(吉林醫(yī)藥學(xué)院科研學(xué)術(shù)處，吉林 吉林 132013)

越桔又稱(chēng)藍(lán)莓，我國(guó)野生的篤斯越桔主要分布在吉林省長(zhǎng)白山地區(qū)，因其富含原花青素(PC)而受到廣泛關(guān)注。大量的研究表明，PC具有抗腫瘤、抗衰老及增強(qiáng)免疫功能等多種藥理作用〔1～3〕。但關(guān)于越桔PC抗腫瘤的研究比較少，尤其是對(duì)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的作用尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)研究越桔PC對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株SHG-44細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。

1 材料與方法

1.1細(xì)胞和主要試劑 人腦SHG-44細(xì)胞株由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院提供。越桔PC購(gòu)于南京蘇朗醫(yī)藥科技開(kāi)發(fā)有限公司；RPMI-1640培養(yǎng)液購(gòu)自Hyclone公司；0.25%胰酶和小牛血清購(gòu)自美國(guó)Gibco公司；二甲基亞楓(DMSO)和噻唑藍(lán)(MTT)均購(gòu)自美國(guó)Sigma公司。

1.2SHG-44細(xì)胞的培養(yǎng) 自液氮罐中取出凍存的人腦SHG-44細(xì)胞，將其置于37℃水浴振蕩融解，再用含10%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液混勻后置于25 cm2培養(yǎng)瓶中，在37℃、5%CO2及飽和濕度條件下進(jìn)行培養(yǎng)，隔日換液一次。

1.3MTT檢測(cè)SHG-44細(xì)胞的生長(zhǎng)情況 將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的SHG-44細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液，以8 000個(gè)/孔密度接種于96孔板中，置于37℃、5% CO2及飽和濕度條件下培養(yǎng)過(guò)夜。次日加入越桔PC(5、10、20、40 μg/L，含5%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液為基礎(chǔ)培養(yǎng)液)，每個(gè)濃度設(shè)5個(gè)復(fù)孔，分別作用24、48、72 h時(shí)，并設(shè)空白對(duì)照組。終止反應(yīng)時(shí)，各孔再加入MTT 20 μl，繼續(xù)孵育4 h，棄上清，每孔加入DMSO 150 μl，振蕩后在全自動(dòng)酶標(biāo)儀上測(cè)定各孔490 nm 區(qū)的吸光度值。

2 結(jié) 果

5、10、20、40 μg/L越桔PC作用SHG-44細(xì)胞24、48、72 h時(shí)，均可明顯抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。10、20、40 μg/L各濃度越桔PC組在作用24、48、72 h時(shí)，細(xì)胞的生長(zhǎng)均受到明顯的抑制，與空白對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)；5 μg/L濃度越桔PC組在作用72 h時(shí)，膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)亦明顯受到抑制，與空白對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 越桔原花青素對(duì)SHG-44細(xì)胞生長(zhǎng)的影響(n=5，±s)

3 討 論

神經(jīng)膠質(zhì)是腦腫瘤的最常見(jiàn)形式，以惡性居多〔4〕。一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，首先手術(shù)治療，術(shù)后可根據(jù)患者情況進(jìn)行放、化療，結(jié)合最新的替莫唑胺療法，患者生存期的延長(zhǎng)也不明顯〔5〕。中醫(yī)上對(duì)腦腫瘤的主要分型有痰濕內(nèi)阻型、氣滯血淤型、熱毒蘊(yùn)結(jié)型、肝風(fēng)內(nèi)動(dòng)型、肝腎陰虛型、脾腎陽(yáng)虛型。一般中醫(yī)治療腦腫瘤的中成藥、單方驗(yàn)方都為合劑且只是對(duì)癥治療，但對(duì)于合劑中哪一種藥物發(fā)揮主要功效、作用機(jī)制并不清楚。有研究〔6～9〕表明，PC具有抗腫瘤作用，但對(duì)于野生的篤斯越桔的抗腫瘤作用還未見(jiàn)報(bào)道。綜上，越桔PC可以抑制腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，但其抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的機(jī)制，有待進(jìn)一步探討。

4 參考文獻(xiàn)

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2范紅艷，王艷春，任 曠，等.越桔原花青素對(duì)大鼠心肌纖維化作用的影響〔J〕.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2009;25(5)：626-30.

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