外周血腫瘤細胞CK20表達與結(jié)直腸癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的關(guān)系

王大巍 孫立輝 金長凱 孫 奔 樊 毅

(遼寧醫(yī)學院附屬第三醫(yī)院普外二科，遼寧 錦州 121000)

結(jié)直腸癌以高復(fù)發(fā)和高轉(zhuǎn)移為特點〔1〕，患者能否得到準確預(yù)測仍然是目前面臨的問題，對指導治療和評價疾病轉(zhuǎn)歸具有重要意義〔2，3〕。外周血循環(huán)腫瘤細胞可能是導致腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及死亡的重要原因〔4〕。本研究以CK20作為外周血循環(huán)腫瘤細胞Cellular FACTT檢測標志物，探討外周血循環(huán)腫瘤細胞與根治術(shù)后結(jié)直腸癌患者復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 資料和方法

1.1一般資料 收集2010年6月至2011年5月遼寧醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院、遼寧醫(yī)學院附屬第三醫(yī)院、錦州市中心醫(yī)院和解放軍第二零五醫(yī)院同期211例結(jié)直腸癌患者，術(shù)前有全面體格檢查、腹盆部CT、腹部超聲及腸鏡檢查等，術(shù)前抽血均獲本人或其家屬同意。入組標準：均行結(jié)直腸癌根治術(shù)，并經(jīng)術(shù)后病理明確診斷；病理證實為外科R0切除；術(shù)前未行放化療等輔助治療。排除標準：無法按AJCC標準進行pTNM分期；伴發(fā)第二種腫瘤；多原發(fā)結(jié)直腸癌；術(shù)前評估為無法根治性切除；隨訪證實為吻合口原位復(fù)發(fā)者；伴有嚴重心腦血管或肝腎疾病不能耐受輔助治療者。男115例，女96例，平均年齡(60.9±8.7)歲；直腸癌127例，結(jié)腸癌84例；大體形態(tài)：隆起型123例，潰瘍型88例；分化程度：高分化109例，中分化70例，低分化32例；有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移99例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移112例；有遠處肝轉(zhuǎn)移29例，無遠處肝轉(zhuǎn)移182例；臨床分期Ⅰ期81例，Ⅱ期67例，Ⅲ期33例，Ⅳ期30例。所有患者KPS評分均在60～80分。

1.2治療和隨訪 全組納入研究者均接受根治性手術(shù)切除惡性腫瘤。術(shù)后根據(jù)病理臨床分期，分別給予化療和未化療55例和156例，并在手術(shù)治療后每3個月復(fù)查腹部超聲和胸片，每6個月或1年復(fù)查結(jié)腸鏡和腹盆部CT，以明確有無術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。本研究生存期自確診之日計算至患者死亡或末次隨訪，并將患者出現(xiàn)的腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，以及因復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移引起的死亡作為隨訪終點事件，而患者死于其他疾病或至隨訪終止存活者定義為“截尾數(shù)據(jù)”，分析患者無瘤生存情況。

1.3外周血腫瘤細胞CK20檢測方法 術(shù)前1 d抽取患者晨起空腹肘前外周靜脈血5 ml作為檢測樣品，依照文獻〔5〕方法進行。Cellular FACTT檢測CK20循環(huán)腫瘤細胞方法：將備測樣本以1 000 r/min離心后棄上清，加入50 μl生物素化的抗體，37℃靜置約1 h后再加入50 μl的親和素工作液，22℃靜置約l h后加入50 μl生物素化的DNA，22℃靜置約1 h后再加50 μl NTP工作液，37℃靜置約3 h后上機檢測。

1.4統(tǒng)計學分析 采用SPSS11.5軟件進行t和χ2檢驗，Kaplan-Meier法計算無瘤生存率、繪制生存曲線，生存率比較采用Log-rank檢驗，采用多因素Cox風險模型進行多因素預(yù)后歸因分析。

2 結(jié) 果

2.1外周血CK20陽性檢出與臨床病理特征的關(guān)系 211例結(jié)直腸癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞CK20陽性率為59.2%(125/211)，其陽性檢出與腫瘤TNM分期及遠處肝轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.001)，見表1。

表1 外周血循環(huán)腫瘤細胞CK20陽性檢出與臨床病理特征的關(guān)系(n)

2.2外周血CK20陽性檢出與無瘤生存的關(guān)系 本研究全部211例患者均獲完整隨訪，無失訪出現(xiàn)，隨訪率100%。隨訪至1年末，分別有11例(5.2%)患者出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)或遠處轉(zhuǎn)移，無腫瘤相關(guān)死亡病例出現(xiàn)，其中遠處轉(zhuǎn)移4例(肝轉(zhuǎn)移3例，腹盆部轉(zhuǎn)移1例)，且復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移均發(fā)生在陽性檢出患者中，陽性檢出患者1年無瘤生存期短于陰性者(P>0.05)。3年術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移率為18.5%(39/211)，其中陽性檢出患者術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移率為28.8%(36/125)，明顯高于陰性檢出者的3.5%(3/86)，且陽性檢出患者3年無瘤生存期為(29.1±1.1)個月，明顯短于陰性檢出者的(35.1±0.5)個月(P<0.001)。見圖1。

圖1 外周血CK20陽性和陰性檢出患者的無瘤生存情況比較

2.3多因素Cox風險模型歸因分析無瘤生存影響因素 年齡、性別、腫瘤部位、大體形態(tài)、分化程度、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移和臨床分期均未發(fā)現(xiàn)與3年無瘤生存有顯著相關(guān)性(P>0.05)，而外周血循環(huán)腫瘤細胞CK20檢出情況與3年預(yù)后呈負相關(guān)，陽性檢出為患者3年不良預(yù)后的高危因素，見表2。

表2 多因素Cox風險模型歸因分析3年不良預(yù)后影響因素

3 討 論

結(jié)直腸癌是我國惡性腫瘤中發(fā)病率和死亡率均較高的腫瘤，常見復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移〔6〕。目前認為，存在于腫瘤患者體內(nèi)的血液、淋巴液和骨髓等體液中的循環(huán)腫瘤細胞對揭示腫瘤分期和預(yù)后等具有重要臨床價值〔7〕。FACTT作為一項新興的檢測技術(shù)，能明顯提高檢出敏感性和特異性，可用于檢測腫瘤患者體內(nèi)游離腫瘤細胞〔5〕。Tsouma等〔8〕報道CK20外周血檢出率高達78.4%，所以本研究以CK20作為循環(huán)腫瘤細胞標志物。目前也有其他研究報道了其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移和Dukes分期的相關(guān)性〔9〕，提示結(jié)直腸癌患者循環(huán)腫瘤細胞CK20陽性檢出可能影響患者術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移等預(yù)后。本文提示CK20陽性檢出可能是結(jié)直腸癌患者不良預(yù)后的重要預(yù)測因素，對預(yù)測結(jié)直腸癌患者預(yù)后具有一定的臨床意義。

4 參考文獻

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