新輔助化療PF方案對(duì)口腔鱗癌Survivin、EGFR和MVD表達(dá)的影響及意義

王 芳

(濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院口腔頜面外科，山東 濱州 256600)

口腔鱗癌是常見(jiàn)的口腔惡性腫瘤，臨床主要是手術(shù)治療并常規(guī)使用術(shù)前化療聯(lián)合術(shù)后放化療以提高口腔鱗癌患者的遠(yuǎn)期療效。術(shù)前化療又稱(chēng)誘導(dǎo)緩解治療或新輔助化療，是指在放射性治療或手術(shù)治療前進(jìn)行緩解治療，有利于減少患者機(jī)體的腫瘤負(fù)荷。研究〔1〕認(rèn)為：化療對(duì)頜面部鱗癌沒(méi)有確切的根治作用，臨床上不適宜將化療作為口腔鱗癌的根治性治療措施。也有報(bào)道〔2〕指出：新輔助化療有利于提高患者的療效，但臨床上缺乏客觀(guān)評(píng)價(jià)其化療療效的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。本研究分析PF方案新輔助化療對(duì)組織凋亡抑制劑因子(Survivin)、表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、微血管密度(MVD)的表達(dá)影響，探討其療效與作用途徑。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取2009年12月至2013年12月我院口腔科112例未經(jīng)任何輔助治療的口腔鱗癌患者，全部患者符合口腔鱗癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)〔3〕，排除具有化療禁忌證的患者。根據(jù)患者術(shù)前是否行PF方案新輔助化療將患者分為觀(guān)察組與對(duì)照組。觀(guān)察組56例，男29例，女27例，年齡56～74〔平均(63.62±4.23)〕歲，腫瘤部位：頰部12例，口底10例，舌緣9例，舌腹8例，舌根5例，唇部3例，牙齦6例，咽旁3例；依照世界抗癌聯(lián)盟(UICC)對(duì)腫瘤的TNM臨床分期標(biāo)準(zhǔn)〔4〕，Ⅱ期6例，Ⅲ期26例，Ⅳ期24例；組織分級(jí)：Ⅰ級(jí)12例，Ⅱ級(jí)38例，Ⅲ級(jí)6例。對(duì)照組56例，男28例，女28例，年齡57～75〔平均(64.68±4.55)〕歲，腫瘤部位：頰部11例，口底11例，舌緣10例，舌腹7例，舌根5例，唇部4例，牙齦5例，咽旁3例； Ⅱ期5例，Ⅲ期26例，Ⅳ期25例；組織分級(jí)：Ⅰ級(jí)11例，Ⅱ級(jí)37例，Ⅲ級(jí)8例；兩組性別、年齡、發(fā)病部位、腫瘤臨床分期與組織分級(jí)等比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，具有可比性。

1.2化療方案 全部患者均行手術(shù)切除術(shù)，觀(guān)察組患者術(shù)前行PF方案〔順鉑(CDDP)+5-氟尿嘧啶(5-Fu)〕新輔助化療，完成術(shù)前2個(gè)療程的化療后7 d內(nèi)行手術(shù)治療。新輔助化療方法：①d1：快速靜滴250 ml 20%甘露醇(廠(chǎng)商：北京雙鶴藥業(yè)公司，批號(hào)：H20060353)，避光環(huán)境下靜滴500 ml 2.5%氯化鈉溶液(天津藥業(yè)公司，批號(hào)：H20013006)聯(lián)合CDDP(云南生物谷燈盞花藥業(yè)公司，批號(hào)：H20043889)100 mg/m2，靜注20 mg呋塞米(金陵藥業(yè)公司，批號(hào)：H20054671)。②d1～d5：緩慢靜滴250 ml 5%葡萄糖液(中國(guó)大冢制藥公司，批號(hào)：H12020021)聯(lián)合5-Fu(商品名：扶時(shí)可，海南普利制藥公司，批號(hào)：H20041742)375 mg/m2。治療過(guò)程中需依據(jù)患者的年齡、病情、耐受等情況調(diào)整藥物劑量，并及時(shí)補(bǔ)充水電解質(zhì)，避免酸堿失調(diào)及對(duì)癥支持治療。對(duì)照組患者術(shù)前未行化療，兩組患者術(shù)中獲取病理組織，術(shù)后采用免疫組化方法檢測(cè)Survivin、EGFR、MVD的表達(dá)。

1.3檢測(cè)方法 4%甲醛固定，石蠟包埋，厚度約4 μm。染色一抗Survivin、EGFR、MVD鼠抗人單克隆抗體，由北京生物公司提供。檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋公司。

1.4觀(guān)察指標(biāo)

1.4.1免疫組化結(jié)果評(píng)定 隨機(jī)選取鏡下5個(gè)不重疊的高倍視野(×400)，記錄細(xì)胞總數(shù)與陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性細(xì)胞率。Survivin的陽(yáng)性細(xì)胞為細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色的顆粒狀物質(zhì)，EGFR陽(yáng)性細(xì)胞為細(xì)胞膜呈現(xiàn)淺褐色或棕褐色，MVD陽(yáng)性表達(dá)是指單個(gè)或多個(gè)血管內(nèi)皮細(xì)胞呈現(xiàn)棕黃色。

1.4.2化療療效評(píng)估 依照UICC療效評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)〔4〕，完全緩解(CR)是指肉眼觀(guān)察腫瘤完全消失，無(wú)新病灶的出現(xiàn)；部分緩解(PR)是指腫瘤體積減小≥50%，無(wú)出現(xiàn)新病灶；穩(wěn)定(SD)是指腫瘤體積減小<50%，無(wú)新病灶；進(jìn)展(PD)是指腫瘤體積無(wú)變化，伴有新病灶的出現(xiàn)，完全緩解與部分緩解提示臨床治療有效，而穩(wěn)定與進(jìn)展提示臨床治療無(wú)效。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件行χ2、t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1兩組口腔鱗癌組織Survivin、EGFR、MVD表達(dá)情況 觀(guān)察組Survivin、EGFR、MVD陽(yáng)性表達(dá)率分別為44.64%(25/56)、16.07%(9/56)、25.00%(14/56)，均顯著低于對(duì)照組的57.14%(32/56)、46.43%(26/56)、42.86%(24/56)(均P<0.05)，口腔鱗癌組織Survivin、EGFR表達(dá)情況見(jiàn)圖1。

圖1 口腔鱗癌Survivin、EGFR陽(yáng)性表達(dá)(×400)

2.2Survivin、EGFR、MVD表達(dá)與化療療效的關(guān)系 56例觀(guān)察組患者經(jīng)化療后，CR 6例(10.71%)，PR 40例(71.43%)，SD 9例(16.07%)，PD 1例(1.79%)，臨床治療有效率〔29例(63.64%)、42例(91.30%)、40例(86.96%)〕高達(dá)82.14%， 未經(jīng)術(shù)前化療的對(duì)照組臨床治療有效率僅達(dá)51.79%(29/56)，兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義χ2=5.03，P<0.05)，Survivin、EGFR、MVD陰性表達(dá)組化療有效率顯著高于Survivin、EGFR、MVD陽(yáng)性表達(dá)組〔18例(39.13%)、4例(8.9%)、6例(13.04%)〕(均P<0.05)。

3 討 論

鱗狀細(xì)胞癌是口腔常見(jiàn)的惡性腫瘤，隨著對(duì)鱗癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制的研究的不斷深入，研究發(fā)現(xiàn)鱗癌的發(fā)病與細(xì)胞遷移、細(xì)胞周期調(diào)控緊密相關(guān)〔5〕。Survivin是一類(lèi)具有參與細(xì)胞周期調(diào)控與抑制細(xì)胞凋亡的作用的重要蛋白，大量研究〔6〕證實(shí)了Survivin可在多數(shù)腫瘤組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，其表達(dá)情況與癌癥患者的病情發(fā)展與惡性腫瘤的組織學(xué)分級(jí)等呈正相關(guān)。此外，陳中等〔7〕采用免疫組化方法檢測(cè)正常口腔組織與口腔鱗癌組織中發(fā)現(xiàn)口腔鱗癌組織Survivin陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于口腔黏膜下纖維化病變組織，同時(shí)，Western Blot方法驗(yàn)證了Survivin在口腔黏膜下纖維化病變表達(dá)增加，從而推測(cè)Survivin在癌變發(fā)展過(guò)程中的促進(jìn)作用，而正?？谇火つそM織無(wú)Survivin的表達(dá)，鱗癌組織的陽(yáng)性表達(dá)率高達(dá)55%，并隨著臨床分期、組織分級(jí)的增加，其Survivin陽(yáng)性表達(dá)率明顯增加。劉換新等〔7，8〕提示Survivin通過(guò)抑制正常細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)癌癥細(xì)胞的生存能力，因而，Survivin表達(dá)越高，惡性腫瘤細(xì)胞的惡性程度越強(qiáng)，越容易發(fā)生癌癥細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與侵襲。EGFR是具有酪氨酸激酶活性的重要受體，具有指導(dǎo)細(xì)胞增殖，且與腫瘤的形成發(fā)展密切相關(guān)，研究〔9〕指出：經(jīng)術(shù)前放療聯(lián)合化療后，惡性腫瘤的EGFR陽(yáng)性表達(dá)臨床顯著降低。國(guó)內(nèi)研究〔10〕也顯示：EGFR在正?？谇火つそM織與口腔鱗癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)具有明顯差異，且其表達(dá)在口腔鱗癌的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)中起著重要的作用。MVD是惡性腫瘤在血管形成期的腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要預(yù)測(cè)指標(biāo)，同時(shí)它也是常見(jiàn)的提示癌癥患者預(yù)后的指標(biāo)，MVD表達(dá)水平越高，患者的預(yù)后越差。因?yàn)楫?dāng)腫瘤生長(zhǎng)直徑達(dá)1～2 mm時(shí)，惡性腫瘤若要繼續(xù)生長(zhǎng)時(shí)，必須要求機(jī)體提供足量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，這促進(jìn)了新生血管的形成〔11〕。目前，口腔鱗癌PF新輔助化療對(duì)Survivin、EGFR、MVD表達(dá)的影響及Survivin、EGFR、MVD在化療過(guò)程中的作用途的研究少，因此，本研究旨在探討PF方案新輔助化療對(duì)Survivin、EGFR、MVD表達(dá)的影響。

本研究結(jié)果提示PF方案新輔助化療可降低鱗癌組織Survivin、EGFR、MVD陽(yáng)性表達(dá)，提高患者的治療有效率。經(jīng)進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，新輔助化療可通過(guò)增加Survivin、EGFR、MVD陰性表達(dá)以提高患者的化療療效。分析Survivin、EGFR、MVD陰性表達(dá)率越高、患者化療療效越佳的原因可能是Survivin、EGFR、MVD通過(guò)不同途徑干擾了細(xì)胞正常凋亡與增殖的平衡，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的生存能力，促進(jìn)了口腔鱗癌細(xì)胞的發(fā)生與發(fā)展〔12〕；同時(shí)，PF方案新輔助化療可能通過(guò)抑制Survivin、EGFR、MVD的表達(dá)，降低了腫瘤細(xì)胞的增殖活性與生長(zhǎng)能力。因此，推測(cè)Survivin、EGFR、MVD在PF方案新輔助化療的作用機(jī)制中發(fā)揮重要的作用。

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