頸淋巴清掃術(shù)治療老年舌癌患者的療效及對(duì)CD44V6和MMP-9表達(dá)的影響

孫志廣

(吉林省人民醫(yī)院口腔科，吉林 長(zhǎng)春 130021)

舌癌是多呈浸潤(rùn)生長(zhǎng)且易早期發(fā)生頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的口腔癌，CD44V6和MMP-9在舌癌中是否呈高表達(dá)，目前相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道較少〔1〕。舌癌的治療多以手術(shù)為主，一般行原發(fā)灶切除及頸部淋巴結(jié)清掃術(shù)。最新研究顯示，CD44V6和MMP-9在乳腺、肺、肝、前列腺、結(jié)腸等全身多種惡性腫瘤中均有表達(dá)并與腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)〔2〕。本文擬分析淋巴清掃術(shù)治療舌癌的療效，以及CD44V6和MMP-9的表達(dá)。

1 資料與方法

1.1臨床資料 收集2007年12月至2013年12月我院口腔科手術(shù)切除且資料相對(duì)完整的舌癌組織(TSCC)石蠟包埋組織120例及30例癌旁正常組織，全部病例均經(jīng)病理確診為舌鱗狀細(xì)胞癌，所有病例采取手術(shù)治療，術(shù)前均未做過(guò)放療或化療。120例舌癌患者，同時(shí)伴有頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例，無(wú)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移78例。男64例，女56例；平均(53.3±9.98)歲。組織學(xué)分級(jí)：高分化70例，中分化34例，低分化16例。

1.2手術(shù)方法 采用骨上頸淋巴清掃術(shù)，取患者頜下弧形切口，距下頜骨下緣 1.5～2 cm，自頦部正中下方起，止于下頜角下、胸鎖乳突肌前緣，約6～7 cm。 逐步將皮膚、皮下組織及頸闊肌切開(kāi)，然后由頸深筋膜淺層的淺面鈍性向上分離，至下頜骨下緣。在嚼肌附麗前緣、下頜骨下緣處覓出并游離頜外動(dòng)脈和面前靜脈、牢靠結(jié)扎、剪斷〔3〕。注意淺面有面神經(jīng)下頜緣支橫過(guò)，因此應(yīng)松解后向上推移，對(duì)其進(jìn)行保護(hù)。再沿下頜骨下緣下2 cm處平面切開(kāi)頸深筋膜淺層，解剖頜下區(qū)和頦下區(qū)的周?chē)M織，顯露術(shù)側(cè)二腹肌后腹、健側(cè)二腹肌前腹、舌骨體部及術(shù)野底部的下頜舌骨肌和舌骨舌肌，此時(shí)，整個(gè)舌骨上區(qū)邊界已完全處于游離狀態(tài)。然后，通過(guò)自上而下、由后到前的方式，在下頜骨內(nèi)側(cè)將頜下腺及頜下淋巴結(jié)組織解剖出來(lái)，同時(shí)向前翻轉(zhuǎn)牽拉，將頜外動(dòng)脈近心端顯露出來(lái)，然后進(jìn)行雙重結(jié)扎后予以切斷。將莖突下頜的韌帶切斷，在頜下腺后端將腮腺尾葉進(jìn)行分離，應(yīng)注意當(dāng)平下頜角高度橫行切斷后應(yīng)將其縫扎在二腹肌后腹上，若此時(shí)遇到頸外靜脈，則應(yīng)結(jié)扎切斷，即可見(jiàn)到舌骨舌肌表面的舌下神經(jīng)，當(dāng)然，值得注意的是其上方的由后上向前下橫行的舌神經(jīng)與頜下腺導(dǎo)管相互勾繞，所以都必須給予穩(wěn)妥的保護(hù)措施。將舌神經(jīng)到頜下腺間的分泌支予以結(jié)扎切斷，應(yīng)盡可能地靠近導(dǎo)管口端。然后繼續(xù)向前到健側(cè)二腹肌前腹處，將舌骨上區(qū)的頜下腺、脂肪、淋巴結(jié)組織及蜂窩組織整塊切除。最后對(duì)傷口進(jìn)行沖洗，然后止血，并分層對(duì)頸闊肌、皮下組織及皮膚進(jìn)行縫合，置半管引流，傷口需在敷料覆蓋后再加壓包扎。

1.3試劑及染色方法 由北京中杉生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的CD44V6和MMP-9單克隆抗體，PV9000兩步法免疫組織化學(xué)試劑盒，DAB顯色試劑盒，根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色。以PBS代替一抗作陰性對(duì)照，用已知食管癌組織陽(yáng)性切片作陽(yáng)性對(duì)照。

1.4判斷標(biāo)準(zhǔn) CD44V6陽(yáng)性染色主要在細(xì)胞膜、部分有棕黃色或棕褐色細(xì)胞質(zhì)顆粒沉著，MMP-9陽(yáng)性染色主要在細(xì)胞質(zhì)、部分有棕黃色或棕褐色細(xì)胞質(zhì)顆粒沉著〔6〕。隨機(jī)選擇5個(gè)高倍視野，計(jì)數(shù)1 000個(gè)腫瘤細(xì)胞中的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，計(jì)算相應(yīng)的占腫瘤細(xì)胞的百分比。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<10%為陰性(-)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)10%～25%為弱陽(yáng)性(+)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)26%～50%為陽(yáng)性()，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>51%為強(qiáng)陽(yáng)性()。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.5軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Kappa一致性相關(guān)檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1TSCC和癌旁組織中CD44V6和MMP-9的臨床表達(dá) CD44V6在癌旁組織中陽(yáng)性表達(dá)28例(93%)，在TSCC中陽(yáng)性表達(dá)104例(87%)；MMP-9在癌旁組織中陽(yáng)性表達(dá)6例(20%)，在TSCC中陽(yáng)性表達(dá)94例(78%)。見(jiàn)圖1。

圖1 CD44V6、MMP-9在TSCC中陽(yáng)性表達(dá)(DAB，×100)

2.2TSCC原發(fā)灶與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中CD44V6和MMP-9的表達(dá) TSCC原發(fā)灶中CD44V6陽(yáng)性104例(87%)、MMP-9陽(yáng)性94例(78%),淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中CD44V6陽(yáng)性34例(81%)、MMP-9陽(yáng)性32例(76%)。

2.3TSCC中CD44V6和MMP-9表達(dá)的相關(guān)性 TSCC中CD44V6、MMP-9雙陽(yáng)性92例，雙陰性14例，僅CD44V6陽(yáng)性12例，僅MMP-9陽(yáng)性2例，相關(guān)分析顯示Kappa=0.605 7，P<0.01。

3 討 論

就舌癌而言，傳統(tǒng)的舌骨上頸淋巴清掃術(shù)手術(shù)切除范圍有一定局限性，無(wú)法徹底切除頸部轉(zhuǎn)移病變，尤其一些微小轉(zhuǎn)移，隱匿性轉(zhuǎn)移組織無(wú)法得到有效清除，易導(dǎo)致復(fù)發(fā)。而肩胛舌骨上頸淋巴清掃術(shù)清除范圍廣泛，幾乎包括舌癌頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移涉及的全部路徑〔4〕。目前，CD44V6與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、分化等生物學(xué)行為的關(guān)系仍意見(jiàn)不一，甚至對(duì)同種腫瘤的研究亦有不同結(jié)論〔5〕。這可能是由于各研究者采用的免疫組化技術(shù)和第一抗體不同，并與評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)及方法不一致導(dǎo)致的〔6〕。本研究結(jié)果顯示CD44V6與組織學(xué)分級(jí)無(wú)明顯相關(guān)，但CD44V6和舌癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有密切相關(guān)，因此，舌癌中CD44V6的表達(dá)水平可作為評(píng)價(jià)舌癌轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)。MMP-9不但能作為口腔鱗癌的腫瘤標(biāo)志物，亦可作為口腔鱗癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的重要評(píng)價(jià)指標(biāo)〔7〕。本研究表明MMP-9的陽(yáng)性表達(dá)與舌癌的惡性程度及轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，腫瘤細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞的間質(zhì)組織都可以表達(dá)MMP-9，而且腫瘤細(xì)胞呈高表達(dá)；另外，呈陽(yáng)性表達(dá)的腫瘤細(xì)胞大多呈片狀、灶狀或彌散狀分布，并且大多位于癌巢邊緣，這種現(xiàn)象說(shuō)明具有轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤細(xì)胞大多分布在腫瘤的病灶周邊，促使腫瘤細(xì)胞向周?chē)?rùn)或轉(zhuǎn)移更加容易〔8〕。

4 參考文獻(xiàn)

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