小金縣疾控中心結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)方法探討

毛太蘭

【摘要】有效控制結(jié)核病的障礙在于對(duì)機(jī)體缺乏早期、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法，結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)作為結(jié)核病早期診斷的方法可能具有很高的診斷價(jià)值。我們通過(guò)了解疾控中心此方面的具體工作，簡(jiǎn)要綜述了結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)方法，并針對(duì)這些方法做出相關(guān)研究進(jìn)展的探索，旨在與同仁間互相學(xué)習(xí)，更好的服務(wù)于群眾。

【關(guān)鍵詞】縣疾控中心；結(jié)核病診斷；結(jié)核分枝桿菌；檢測(cè)方法

【中圖分類(lèi)號(hào)】 R378.91+1【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

隨著環(huán)境污染和艾滋病的傳播，結(jié)核病發(fā)病率越發(fā)強(qiáng)烈，結(jié)核病是由結(jié)核桿菌感染引起的慢性傳染病，也是一個(gè)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。

1結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)的意義

20世紀(jì)80年代后，由于艾滋病和結(jié)核分枝桿菌耐藥菌株的出現(xiàn)、免疫抑制劑的應(yīng)用、吸毒、貧困及人口流動(dòng)等因素，結(jié)核病的疫情驟然惡化。中國(guó)有5.5億人感染過(guò)結(jié)核菌，約占全國(guó)人口的45%，高于全球平均水平。全國(guó)約有80%的結(jié)核病人集中在農(nóng)村及經(jīng)濟(jì)不發(fā)達(dá)的中西部地區(qū)，全國(guó)結(jié)核病耐藥率高達(dá)28%[1-4]。隨著抗結(jié)核藥物的不斷發(fā)展和衛(wèi)生生活狀況的改善，結(jié)核的發(fā)病率和死亡率也一度大幅下降，而肺結(jié)核的及時(shí)診斷對(duì)治療結(jié)核病有著重要的意義，以下我們通過(guò)探討結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)方法，來(lái)對(duì)肺結(jié)核的診斷做出說(shuō)明及認(rèn)識(shí)。

2結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)方法的比較分析

（1）病原學(xué)檢測(cè)方法

病原學(xué)檢測(cè)方法主要包括萋尼染色、熒光染色；羅氏培養(yǎng)、分枝桿菌快速培養(yǎng)。

涂片鏡檢的抗酸染色方法是目前為止最快的檢出方法，可用來(lái)檢測(cè)病情進(jìn)展，為感染控制提供參考依據(jù)，可確證培養(yǎng)物為陽(yáng)性。熒光染色法是涂片法中陽(yáng)性率較高，較快速的方法，但是由于假陽(yáng)性率較高，保存時(shí)間短，熒光顯微鏡成本高等缺點(diǎn)，熒光染色法一直沒(méi)有得到廣泛的應(yīng)用。

結(jié)核菌培養(yǎng)仍是目前診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，是鑒定是否為活菌的可靠方法。羅氏培養(yǎng)法準(zhǔn)確度、靈敏度略高于涂片法，可以鑒定死菌與活菌，可進(jìn)一步進(jìn)行菌種鑒定和藥敏試驗(yàn)。但是診斷周期長(zhǎng)，有一定的污染率。分枝桿菌快速培養(yǎng)技術(shù)是一個(gè)鑒定及藥敏系統(tǒng)，操作簡(jiǎn)便，陽(yáng)性標(biāo)本檢出率比傳統(tǒng)固體培養(yǎng)提高10%左右。

（2）免疫學(xué)檢測(cè)方法

免疫學(xué)檢測(cè)方法包括抗原抗體檢測(cè)及細(xì)胞因子檢測(cè)。

結(jié)核菌素試驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)是對(duì)活動(dòng)性結(jié)核的診斷靈敏度高達(dá)77%。缺點(diǎn)是假陰性產(chǎn)生于小兒結(jié)核、老年人結(jié)核、免疫缺陷或免疫功能低下患者；假陽(yáng)性產(chǎn)生于接種過(guò)卡介苗的人，其也會(huì)產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)[5]。

γ干擾素釋放試驗(yàn)被認(rèn)為是近十年來(lái)結(jié)核診斷史上取得的最重要成就，該檢測(cè)方法目前市售兩種：QFT-G和T-SPOT.TB，比較兩種方法，T-SPOT.TB更靈敏但QFT-G更特異，但均優(yōu)于結(jié)核菌素試驗(yàn)，同時(shí)也被推薦用于潛伏結(jié)核診斷。

（3）分子生物學(xué)檢測(cè)方法

分子生物學(xué)檢測(cè)方法包括熒光定量PCR、芯片雜交。

近年來(lái)核酸擴(kuò)增技術(shù)和雜交分析技術(shù)的發(fā)展，為分枝桿菌的檢測(cè)、鑒定和藥敏實(shí)驗(yàn)提供了極大的方便，可將診斷時(shí)間從幾周降低到幾天。研究、應(yīng)用報(bào)道較多的結(jié)核病基因診斷技術(shù)主要包括PCR、核酸探針雜交、DNA序列測(cè)定等。

3小金縣疾控中心結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)方法的現(xiàn)狀及發(fā)展

小金縣位于四川省阿壩藏族羌族自治州南部，全縣人口近9萬(wàn)人，主要由漢族、藏族、回族等民族分布，農(nóng)村生活習(xí)慣非常不好，有時(shí)甚至?xí)霈F(xiàn)幾十個(gè)人供用一個(gè)酒杯的情況，這使得結(jié)核病的蔓延變得容易，因此衛(wèi)生宣傳工作一直是衛(wèi)生系統(tǒng)部門(mén)的重點(diǎn)工作[6-7]。另一方面，改革開(kāi)放以來(lái)，小金縣衛(wèi)生設(shè)施逐漸完善，疾控中心利用國(guó)債和災(zāi)后重建資金建成，并按照要求配備了縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，并建成了潔凈實(shí)驗(yàn)室及P2實(shí)驗(yàn)室，大大地提高了實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力。

對(duì)于結(jié)核病的診斷，目前疾控中心近年均150多個(gè)病人，有10多個(gè)呈現(xiàn)陽(yáng)性，而檢測(cè)方法則以抗酸染色法為主，痰涂片抗酸染色試劑由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供?？顾崛旧ㄓ闷胀ǜ弑讹@微鏡，顯示菌色為紅色。此檢測(cè)方法操作方便，易于掌握；片中結(jié)核菌分布均勻，染色效果清晰；消化，制片，烤片，染色均在超凈工作室中完成，更好的提高了操作的安全性。但是抗酸染色對(duì)分枝桿菌非特異，其他如奴卡、紅球菌屬、軍團(tuán)菌、隱孢子蟲(chóng)等孢球蟲(chóng)等有抗酸菌特點(diǎn)，所有分枝桿菌均可著色，不能區(qū)分結(jié)核和非結(jié)核分枝桿菌；無(wú)法區(qū)別死菌與活菌，結(jié)果均為陽(yáng)性；且敏感性低，一般1mL痰中有5000-10000條菌時(shí)可檢出，而培養(yǎng)可檢出>10-100條菌。我們一般要求新病人早晚各一口痰進(jìn)行檢測(cè)，而通過(guò)多年的檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)得出，我們發(fā)現(xiàn)病人早上第一口痰檢測(cè)率相對(duì)較高，這樣我們可以此方法的缺陷中盡量提高我們的診斷能力。雖然目前抗酸染色法、胸部影像、癥狀診斷法已經(jīng)能滿(mǎn)足縣內(nèi)需求，而小金縣亦作為一個(gè)旅游縣級(jí)市，為了更好的服務(wù)廣大群眾，對(duì)于醫(yī)護(hù)人員來(lái)說(shuō)，而提高我們自身的技術(shù)水平的同時(shí)，也要積極學(xué)習(xí)其他檢測(cè)方法，在有條件的情況下發(fā)揮作用[8]。

4結(jié)束語(yǔ)

結(jié)核病臨床表現(xiàn)癥狀為咳嗽、咳痰大于2周，或咯血為肺結(jié)核可疑癥狀。早期肺部體征不明顯，當(dāng)病變?yōu)榇笕~性干酪性肺炎時(shí)，局部叩診呈濁音，聽(tīng)診可聞及管狀呼吸音，有空洞合并感染或合并支氣管擴(kuò)張時(shí)，可聞及干或濕性啰音。胸部影像學(xué)檢查不同類(lèi)型肺結(jié)核的典型胸部影像學(xué)也有不同表現(xiàn)，而對(duì)于小金縣疾控中心來(lái)說(shuō)主要通過(guò)以上檢測(cè)方法來(lái)進(jìn)行診斷，在結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)中我們還有很多工作要完善，我們也要利用現(xiàn)有設(shè)備及科研成果，為廣大群眾提供更專(zhuān)業(yè)的服務(wù)。

參考文獻(xiàn)

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