氯霉素爐甘石洗劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

★ 聶秀霞 何婉敏 應(yīng)雪 陳煥梅 邱玉婷

(廣東省中山市第二人民醫(yī)院 中山 528447)

氯霉素爐甘石洗劑是我院研制的皮膚科用藥之一。其由氯霉素、爐甘石、氧化鋅等組成，具有抗菌、消炎、止癢、收斂等作用，在無滲出性皮炎、濕疹、痱子、普通型痤瘡中廣泛應(yīng)用。該制劑原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)參照1985版《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》，采用滴定法測定氧化鋅的含量，而對(duì)氯霉素只簡單的做了薄層鑒別。為有效控制此制劑的質(zhì)量，提高其標(biāo)準(zhǔn)，筆者參照2010版《中國藥典》[1]及楊連菊[2,3],張軍[4]等人的方法，建立了以HPLC法測定氯霉素及紫外-可見分光光度法測定氧化鋅的含量。結(jié)果表明，此方法簡便、準(zhǔn)確，可作為控制此制劑的質(zhì)量指標(biāo)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀(安捷倫1260)，紫外-可見分光光度計(jì)(日本島津UV-1800)，十萬分之一分析天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)等；

1.2 試藥

氧化鋅對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)：111619-200301)；鋅試劑(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；氯霉素對(duì)照品(批號(hào)：130555-200602，中國藥品生物制品檢定所)；氯霉素二醇物對(duì)照品(批號(hào)：130436-200704，中國藥品生物制品檢定所)；對(duì)硝基苯甲醛對(duì)照品(批號(hào)：80562-200902，中國藥品生物制品檢定所)；甲醇為色譜純，其它試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 氧化鋅

2.1.1 溶液的配置 對(duì)照品溶液的配制精密稱取

氧化鋅對(duì)照品0.05g，置100mL量瓶中，加入10mL稀鹽酸使溶解，加水定容至100mL，精密量取10mL，加水稀釋至100mL，為對(duì)照品貯備液。

鋅試劑溶液：取鋅試劑0.13g，加氫氧化鈉試液2mL使溶解，再加蒸餾水至100mL即得。

2.1.2 顯色 精密吸取對(duì)照品貯備液適量，置50mL量瓶中，加入硼酸-氯化鉀緩沖液(pH=9.0)10mL與鋅試劑溶液3mL，用水稀釋至刻度，搖勻，在暗處放置1h，測定吸光度。

2.1.3 檢測波長的選擇 取顯色好的對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照液，搖勻，分別在400-800nm掃描其吸收光譜，對(duì)照品及供試品溶液均在620±1nm處有最大吸收，陰性對(duì)照液在此處無吸收。因此選擇620nm為檢測波長，(見圖1)。

圖1 氧化鋅色譜掃描圖

2.1.4 線性 精密量取氧化鋅對(duì)照品貯備液0.5,1.0,2.0,3.0,4.0mL及陰性對(duì)照溶液分別置50mL量瓶中，照2.1.2項(xiàng)下從加入硼酸-氯化鉀操作，在620nm處測定吸光度，以濃度(C)為橫坐標(biāo)，吸光度(A)為縱坐標(biāo)，進(jìn)行回歸，得回歸方程Y=0.2838X+0.0231(r=1),說明線性關(guān)系良好。

2.1.5 準(zhǔn)確度 取已知含量的制劑(批號(hào)20130917)，精密量取5mL，置100mL量瓶中(9份)，用濾紙擦去外壁的附著物，用量取好的稀鹽酸(20mL)洗凈移液管內(nèi)壁的附著物，然后加入剩余量的稀鹽酸，充分振搖，使沉淀物不再繼續(xù)溶解，加水至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液1mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1mL，置50mL量瓶中，分別精密加入對(duì)照品貯備液1，1.5，2mL，各3份，照2項(xiàng)下方法顯色，測定吸光度，含量平均回收率的RSD%為3.0。

2.1.6 精密度 精密量取樣品溶液(批號(hào)20130917)5mL，照(2.1.8)項(xiàng)下方法測定，平行操作5次，測定吸光度，RSD%為0.28，表明儀器精密度良好。

2.1.7 專屬性 取顯色好的對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照液，搖勻，分別在400-800nm掃描其吸收光譜，對(duì)照品溶液及供試品溶液均在620±1nm處有最大吸收，陰性對(duì)照液在此處幾乎無吸收。因此選擇620nm為檢測波長.

2.1.8 測定法 將樣品溶液搖勻，精密量取5mL，置100mL量瓶中，用濾紙擦去外壁的附著物，用量取好的稀鹽酸(20mL)洗凈移液管內(nèi)壁的附著物，然后加入剩余量的稀鹽酸，充分振搖，使沉淀物不再繼續(xù)溶解，加水至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液1mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，既得。精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照溶液各1mL，分別置50mL量瓶中，加入硼酸-氯化鉀緩沖液(pH=9.0)10mL與鋅試劑溶液3mL，用水稀釋至刻度，搖勻，在暗處放置1h，測定其吸光度。將氯霉素爐甘石陰性洗劑搖勻，照2.1.2項(xiàng)下從精密量取1mL開始，平行操作。三批樣品含量均合格，具體結(jié)果見下表1。

表1 三批氯霉素爐甘石中氧化鋅含量結(jié)果表

2.2 氯霉素

2.2.1 色譜條件 高效液相色譜儀(安捷倫1260)，紫外檢測器，Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×150mm，5μm)，以0.01mol/L庚烷磺酸鈉緩沖溶液(取磷酸二氫鉀6.8g，用0.01mol/L庚烷磺酸鈉溶液溶解并稀釋至1 000mL，再加三乙胺5mL，混勻，用磷酸調(diào)節(jié)PH至2.5)-甲醇(68∶32)為流動(dòng)相，檢測波長為277nm，進(jìn)樣量10μL，流速1.0mL/min，柱溫：30℃。

2.2.2 系統(tǒng)適用性 取氯霉素對(duì)照品，氯霉素二醇物對(duì)照品，對(duì)硝基苯甲醛對(duì)照品各適量，加甲醇適量(每10mg氯霉素加甲醇1mL)使溶解，用流動(dòng)相稀釋制成每1mL中各含50μg的溶液，取10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。各相鄰峰的分離度均應(yīng)符合要求(見圖2-4)。

圖2 氯霉素陰性對(duì)照色譜圖

圖3 氯霉素對(duì)照品色譜圖

圖4 氯霉素爐甘石洗劑樣品色譜圖

2.2.3 準(zhǔn)確度 精密量取同一批號(hào)(20130917)已知濃度的供試品溶液10mL，置于50mL容量瓶中，共9份，照(8)項(xiàng)下方法稀釋，再分別加入已知濃度的對(duì)照品溶液5，10，15mL，每個(gè)濃度平行操作3次，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，按標(biāo)準(zhǔn)方法測定，計(jì)算回收率，平均回收率為101.39%，RSD為3.01%。

2.2.4 精密度 精密量取同一批號(hào)(20130917)已知濃度的供試品溶液10mL，置于50mL容量瓶中，按(2.2.7)項(xiàng)下操作，重復(fù)5次，測得氯霉素峰面積的RSD為0.016%(n=5)，表明儀器精密度良好。

2.2.5 線性 精密稱取對(duì)照品0.02g，置100mL容量瓶中，用甲醇溶解并用70甲醇稀釋至刻度，精密吸取對(duì)照品溶液1、2、4、6mL及對(duì)照貯備液10mL于10mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，照標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)樣，以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)(X)，峰面積為縱坐標(biāo)(Y)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為Y=17556X+41.658，r=0.9997，表明氯霉素濃度在47.46-284.76mg/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.2.6 定量限與檢測限 將對(duì)照品溶液稀釋至色譜峰信噪比為10時(shí)，氯霉素的檢出濃度分別為0.169μg/mL，對(duì)照品溶液稀釋至色譜峰信噪比為3時(shí)，氯霉素的檢出濃度為0.059μg/mL。

2.2.7 測定法 精密量取本品混懸液10mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，過濾，取續(xù)濾液5mL，置100mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；根據(jù)所做標(biāo)準(zhǔn)曲線，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算氯霉素含量。具體結(jié)果見下表2。

表2 3批氯霉素爐甘石洗劑中氯霉素含量結(jié)果表

3 討論

由于氯霉素爐甘石洗劑為混懸劑，爐甘石及氧化鋅易沉淀，取樣前應(yīng)搖勻。爐甘石及氧化鋅為細(xì)粉，取樣時(shí)易黏附在吸管內(nèi)壁及外壁，為減少誤差，增加準(zhǔn)確度，取樣時(shí)應(yīng)用濾紙擦去外壁吸附的粉末，并用稀鹽酸洗滌內(nèi)壁，計(jì)入含量。

氯霉素爐甘石洗劑濾液中氯霉素含量比混懸液中偏低，且混懸液采用甲醇溶解后，流動(dòng)相稀釋所測的含量比用流動(dòng)相直接稀釋所測的含量高，因此初步預(yù)測氯霉素可能被吸附在爐甘石粉末上，取樣前搖勻的程度及取樣量的多少均對(duì)其有一定的影響。

[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(二部)[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010:1 029-1 032.

[2]楊連菊，馮學(xué)峰，徐子芳,等.爐甘石藥材及飲片中氧化鋅紫外-可見測定方法研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011,17(22)：89-91.

[3]楊連菊，馮學(xué)峰，徐子芳,等.紫外-可見分光光度法測定馬應(yīng)龍痔瘡膏中氧化鋅的含量[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011,17(21)：60-62.

[4]張軍，梁愛君，陳新善,等.分光光度法測定復(fù)方氧化鋅洗劑中氧化鋅的含量[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2002,18(4)：248-250.