942例健康體檢者循環(huán)酶法測(cè)定血清同型半胱氨酸結(jié)果分析

才淑芳，徐 彪，盧玉娟，曲淑君，笪思穎，李 茜，戎秀格

(唐山市工人醫(yī)院，河北 唐山063000)

目前血清同型半胱氨酸(HCY)的測(cè)定方法及采用的測(cè)定儀器有很多，比如：高效液相色譜法(HPLC)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、放射免疫分析方法、熒光偏振免疫分析法等，然而這些檢測(cè)方法或檢測(cè)儀器、試劑太昂貴，或操作步驟繁雜，無(wú)法在臨床廣泛推廣及應(yīng)用；而使用全自動(dòng)生化分析儀的循環(huán)酶法測(cè)定同型半胱氨酸(HCY)在臨床實(shí)驗(yàn)室擁有最多。眾所周知由于檢測(cè)方法的不同，正常參考值會(huì)存在差異。而我國(guó)不同作者或不同區(qū)域的臨床人員應(yīng)用同型半胱氨酸(HCY)正常參考值有很大區(qū)別[1，2]，對(duì)高同型半胱氨酸(HHCY)血癥的診斷存在不同標(biāo)準(zhǔn)[3，4]，可能會(huì)影響病人疾病的診斷和治療；《中國(guó)高血壓防治指南》制定的HHCY Cut Off值可作為我國(guó)醫(yī)務(wù)工作者規(guī)范開展腦卒中預(yù)防工作的參考，在臨床實(shí)踐中，提高HCY Cut Off值(如>12 μmol/L或>15 μmol/L)等將使大量潛在腦卒中高發(fā)人群得不到及時(shí)關(guān)注和干預(yù)，增加腦卒中發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。我們此研究試圖通過(guò)對(duì)唐山工人醫(yī)院942例健康人血清同型半胱氨酸(HCY)的分析，確立應(yīng)用循環(huán)酶法本地區(qū)同型半胱氨酸(HCY)的正常參考值范圍，為不同地區(qū)、不同方法、不同年齡HCY的Cut off值的制定提供可靠數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1研究對(duì)象

942例健康人來(lái)自本院及體檢中心職工體檢，排除心腦血管疾病，消化系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌及營(yíng)養(yǎng)不良疾病，無(wú)高血壓、糖尿病、腎病病史，沒(méi)有接受藥物或維生素補(bǔ)充劑，正常飲食，空腹采靜脈血分離血清待查。

1.2測(cè)定儀器及方法

采用日立7600全自動(dòng)生化分析儀，使用四川邁克的循環(huán)酶法試劑測(cè)定同型半胱氨酸(HCY)，每天做室內(nèi)質(zhì)控在控后再測(cè)定標(biāo)本，參加衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)結(jié)果合格。

1.3 另取20份標(biāo)本與雅培全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀i2000化學(xué)發(fā)光法測(cè)定的同型半胱氨酸結(jié)果進(jìn)行比對(duì)。

1.4 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行正態(tài)分布分析及組間比較；正態(tài)分布數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)，偏態(tài)分布數(shù)據(jù)進(jìn)行秩和檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 20例標(biāo)本與雅培全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀i2000化學(xué)發(fā)光法測(cè)定的同型半胱氨酸結(jié)果

日立7600循環(huán)酶法雅培i2000化學(xué)發(fā)光法HCY(μmol/L)13.2±6.5520.88±12.88*

*P<0.01

橫坐標(biāo)為日立7600全自動(dòng)生化分析儀循環(huán)酶法測(cè)定同型半胱氨酸結(jié)果，縱坐標(biāo)為雅培全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀i2000化學(xué)發(fā)光法測(cè)定的同型半胱氨酸結(jié)果；兩者呈顯著正相關(guān)。

2.2 942例健康體檢結(jié)果分布圖

2.3不同分化HCY測(cè)定結(jié)果

表1 男性與女性HCY測(cè)定結(jié)果比較

*P<0.01

表2 不同年齡組HCY測(cè)定結(jié)果比較

*P<0.01與20-40歲組比較，與40-60歲組比較

本研究取95%參考值范圍，建議唐山地區(qū)循環(huán)酶法測(cè)定HCY參考區(qū)間為男性：7.82-18.98 μmol/L，女性：6.0-17.1 μmol/L；60歲以下：6.18-18.1 μmol/L，60歲以上：7.0-19.1 μmol/L； 整體參考區(qū)間：6.25-18.4 μmol/L

3 討論

HCY應(yīng)用不同的方法，其測(cè)定結(jié)果有很大差異，本研究可以看出循環(huán)酶法測(cè)定結(jié)果顯著低于化學(xué)發(fā)光法測(cè)定結(jié)果，但與化學(xué)發(fā)光法呈顯著正相關(guān)。高效液相色譜法(HPLC)雖然靈敏度高，并可有效分離和分析血液中存在的多種含硫氨基酸，但HPLC檢測(cè)在樣本處理、層析條件等諸多方面存在差異，難以標(biāo)準(zhǔn)化[5]；ELISA法多采用手工板式測(cè)定，耗時(shí)長(zhǎng)，不同人員操作結(jié)果差別大；放射免疫法有可能存在放射污染，已很少應(yīng)用；熒光偏振免疫分析成本高，不利于基層醫(yī)院的普及應(yīng)用；而應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀循環(huán)酶法測(cè)定同型半胱氨酸，性能穩(wěn)定可靠，已經(jīng)在大多數(shù)醫(yī)院普及開展[6]。

同型半胱氨酸(HCY)不但是腦卒中發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因子，而且與高血壓有協(xié)同作用，被《中國(guó)高血壓防治指南2010版》確定為心血管八大危險(xiǎn)因素之一；高同型半胱氨酸可通過(guò)破壞血管內(nèi)皮抗凝功能，內(nèi)皮依賴的舒張功能，及促炎性作用等促使各種血管疾病的發(fā)生，因此較好的控制同型半胱氨酸(HCY)的水平是血管疾病預(yù)防的關(guān)鍵，專家指出健康人群HCY≧12 μmol/L需要治療，合并心血管疾病、糖尿病或其他危險(xiǎn)因素HCY≧10 μmol/L需要治療。但在中國(guó)的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)尚不充分，需進(jìn)一步在中國(guó)人群中進(jìn)行進(jìn)一步的流行病學(xué)研究[7]。

目前有關(guān)同型半胱氨酸(HCY)的Cut off值尚有爭(zhēng)議，不但缺乏詳盡的在各種疾病中HCY的控制指南，而且不同人群[8]、不同測(cè)定方法、不同種族、不同性別、不同年齡HCY的正常參考值也會(huì)存在差別，本研究證實(shí)了在本地區(qū)應(yīng)用循環(huán)酶法測(cè)定HCY的正常參考值范圍為6.25-18.4 μmol/L，隨著年齡的增長(zhǎng)，HCY明顯增高，Cut off值會(huì)相應(yīng)改變；不同方法測(cè)定的HCY正常參考值也不同。

本研究主要針對(duì)唐山地區(qū)單位體檢人群，一般要求45歲以上才加做同型半胱氨酸，因此本研究40-60歲組人數(shù)相對(duì)較多，沒(méi)有再細(xì)化年齡分組，還需要進(jìn)一步研究。本研究證實(shí)隨著年齡的增長(zhǎng)，HCY明顯增高，60歲以上應(yīng)另外設(shè)定參考值；男性整體HCY水平比女性高。本研究取95%置信區(qū)間，唐山地區(qū)循環(huán)酶法測(cè)定HCY參考區(qū)間為男性：7.82-18.98 μmol/L，女性：6.0-17.1 μmol/L；60歲以下：6.18-18.1 μmol/L，60歲以上：7.0-19.1 μmol/L； 整體參考區(qū)間：6.25-18.4 μmol/L。

參考文獻(xiàn)：

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[4]趙 峰．高血壓人群基線同型半胱氨酸水平對(duì)依那普利葉酸片降壓及降同型半胱氨酸療效的分析[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2008，88(42)2957．

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[8]Sacco RL,Anand K,Lee HS,et al homocysteine and the risk of ischemic stroke in a triethnic corhot:the Northern M Anhattan Study [J]．Stroke，2004，35(1):2263．