玉米肽對微波輻射大鼠肝組織損傷的治療作用

羅 軍,李曉宇,王海燕,陳泊宇,胡 琦,呂士杰* (.吉林醫(yī)藥學(xué)院:生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室,.口腔影像系，吉林 吉林 303)

玉米肽(corn peptides，CPs)是玉米蛋白有限水解產(chǎn)物，玉米蛋白是玉米加工淀粉過程中的主要副產(chǎn)品之一。玉米蛋白用相應(yīng)蛋白酶水解后可生成分子量很小但活性很高的短肽分子，即玉米肽。玉米肽含有特殊氨基酸組成，如富含谷氨酸、脯氨酸、亮氨酸和丙氨酸(這4種氨基酸含量約占60%)，富含疏水性氨基酸(占所有氨基酸殘基的50%～60%)等，這些特征賦予玉米蛋白水解物多種生物學(xué)功能，如抗腫瘤、抗疲勞、抗脂質(zhì)過氧化和促進酒精代謝等[1-4]。然而玉米肽對微波輻射可能引起的肝損傷是否具有預(yù)防或保護作用報道并不多見。本研究以Wistar大鼠為實驗對象，初步觀察玉米肽對微波輻射引起動物肝損傷的保護作用，為其在微波輻射防護方面的研究提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑及材料

玉米活性肽購自廣東完美有限公司(分子量小于1 000的低聚肽含量≥15 g/100 g)，倒置顯微鏡(上海醫(yī)用分析儀器廠)，7200型分光光度計(上海優(yōu)尼科儀器有限公司)，微量乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenase，LDH)、丙二醛(malonaldehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase，ALT)測定試劑盒(南京建成生物制品有限公司)。

1.2 動物分組及模型構(gòu)建

Wistar大鼠36只，體重180～220 g，雄雌各半，由吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)部動物實驗中心提供，隨機分為正常對照組、輻射模型組和輻射給藥組。各組動物用同一種飼料平行飼養(yǎng)7 d，輻射模型組與輻射給藥組大鼠給予100 mW/cm2的微波輻照6min[5]。輻射給藥組輻射后立即給予600 mg/(kg·d)玉米肽灌胃，連續(xù)7 d，正常對照組與輻射模型組給予等量生理鹽水作對照。

1.3 血清LDH、MDA、SOD和ALT活性檢測

各組大鼠輻射7 d后，經(jīng)20%烏拉坦腹腔注射麻醉，剖腹；于腹主動脈處抽取血液置于潔凈的離心管中，離心后取上層血清2 mL，按說明書檢測各組大鼠血清LDH、SOD和ALT的活性以及MDA濃度。

1.4 各組大鼠肝形態(tài)學(xué)觀察

剖腹摘取肝臟，于肝最大葉邊緣1 cm處取小塊組織，用預(yù)冷的生理鹽水沖洗干凈，濾紙吸干水分后稱重。所有動物肝組織于10%緩沖甲醛液固定，常規(guī)脫水、透明、浸蠟和石蠟包埋，5 μm厚制片，HE染色，光學(xué)顯微鏡觀察各組動物肝組織形態(tài)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1 大鼠血清MDA濃度和SOD 、LDH 、ALT活性

與正常對照組比較，輻射模型組血清SOD活性極顯著下降(P<0.01)，LDH顯著升高(P<0.05)，MDA、ALT含量極顯著升高(P<0.01),輻射給藥組血清ALT含量顯著升高(P<0.05)。與輻射模型組比較，輻射給藥組血清ALT含量呈極顯著降低(P<0.01)，SOD活性顯著升高(P<0.05)(表1)。

2.2 玉米肽對輻射大鼠肝組織形態(tài)學(xué)影響

正常對照組大鼠肝細胞的形態(tài)規(guī)則,細胞界板清晰,排列整齊，胞漿紅染，細胞核圓形或橢圓形,居中，肝索和肝血竇清晰；輻射模型組大鼠肝細胞體積增大，細胞水腫嚴(yán)重，細胞之間界限不明顯，細胞核形態(tài)不規(guī)則，肝血竇縮小或消失；輻射給藥組大鼠肝細胞水腫明顯減輕，細胞邊界較清晰，組織結(jié)構(gòu)有明顯恢復(fù)(見圖1)。

表 1 各組大鼠血清MDA濃度和SOD、LDH、ALT活性

A.對照組 B.輻射模型 C.輻射給藥組

3 討 論

微波是指頻率在300 MHz～300 GHz的電磁輻射，是非電離輻射的一部分。微波作用于機體組織時，引起組織細胞中離子、水分子和偶極子的高頻振蕩。以往研究表明微波輻射對生物體存在熱效應(yīng)、非熱效應(yīng)。國內(nèi)外研究證明微波輻射對肝臟有明顯的損傷作用[6-9]。LDH是與氧化型輔酶Ⅰ(NADI)為氫受體,催化L-乳酸與丙酮酸之間可逆反應(yīng)的一種脫氫酶，該酶廣泛存在于各種組織中,以心肌、肝、骨骼肌、肺含量最多,當(dāng)器官或組織損傷,可釋放此酶至血液中,血清此酶含量即見增高,可作為檢測機體組織是否有損傷的重要指標(biāo)。ALT主要存在于肝細胞胞漿內(nèi)，當(dāng)有肝細胞損傷時，血清中的ALT含量就會顯著上升，是肝臟功能出現(xiàn)問題的一個重要指標(biāo)[10-12]。本實驗結(jié)果顯示，與對照組比較，100 mW/cm2的微波輻照后大鼠肝細胞體積增大，細胞核形態(tài)不規(guī)則，細胞水腫嚴(yán)重，細胞之間界限不明顯，胞質(zhì)淡染，肝血竇明顯縮小或消失。血清中LDH和ALT均有顯著性升高；輻射給藥組肝組織損傷具有明顯恢復(fù)現(xiàn)象，肝細胞水腫明顯減輕，血清中LDH也升高但無顯著性差異，ALT呈顯著性升高，表明輻射造成了大鼠肝細胞的嚴(yán)重損傷，玉米肽則對肝細胞的損傷有一定的治療效果。

MDA是膜脂過氧化的終產(chǎn)物之一，MDA含量升高提示組織蛋白結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變,可以作為考察細胞受損傷嚴(yán)重程度的指標(biāo)之一。SOD是機體內(nèi)重要的氧自由基清除劑，其在減少甚至阻止脂質(zhì)過氧化對組織造成的損傷方面,以及保護臟器不受損傷和避免功能喪失的方面具有非常重要的作用。本實驗結(jié)果表明，微波輻射后，大鼠血清中MDA含量上升極為顯著，SOD明顯下降，表明輻射導(dǎo)致大鼠肝組織膜脂過氧化嚴(yán)重，且抗氧化能力明顯下降；而輻射給藥組SOD含量顯著升高，但MDA無顯著性差異，表明玉米肽對輻射大鼠肝細胞膜脂過氧化有較好的治療作用，抗氧化能力也有顯著提升。綜上所述，玉米肽對微波輻射大鼠的肝組織損傷有一定治療作用。

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