HIF－1α、VEGF、MMP－9、Ki－67在原、復(fù)發(fā)腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及意義

腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤簡(jiǎn)稱(chēng)為膠質(zhì)瘤 (Gliomas)，是顱內(nèi)最常見(jiàn)的惡性腫瘤，總體發(fā)病率高，約為12/10萬(wàn)，居顱內(nèi)腫瘤第一位，約占成人原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤的60%［1］，國(guó)內(nèi)報(bào)道總的發(fā)病率約占顱內(nèi)腫瘤的35.26%～60.96%，平均為44.69%［2］腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤可發(fā)生于任何年齡段，其生長(zhǎng)速度快，侵襲性和轉(zhuǎn)移性強(qiáng)，預(yù)后差，其治療原則是手術(shù)切除，后雖輔以放、化療，但復(fù)發(fā)率仍高，常常在短期內(nèi)復(fù)發(fā)，是神經(jīng)外科研究領(lǐng)域難點(diǎn)和醫(yī)學(xué)研究的重要課題之一。本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)正常腦組織和原發(fā)、復(fù)發(fā)膠質(zhì)瘤中HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67四種因子的表達(dá)情況，并探討其與膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本組資料對(duì)照組為正常腦組織10例，取自顱腦外傷患者內(nèi)減壓或腦出血減壓術(shù)的非腫瘤患者，并將他們制備成蠟塊。實(shí)驗(yàn)組為2007年2月至2011年11月濰坊市人民醫(yī)院神經(jīng)外科收集的同一患者經(jīng)手術(shù)切除并經(jīng)病理科證實(shí)的原發(fā)、復(fù)發(fā)腦膠質(zhì)瘤30例，其中男19例，女11例，平均年齡47.9歲。取每一位患者2次術(shù)后石蠟病理蠟塊共計(jì)60塊。并按照2000年WHO制定神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)確定60塊病理蠟塊的分類(lèi)和分級(jí):I級(jí)5塊，Ⅱ級(jí)19塊，Ⅲ級(jí)21例，Ⅳ級(jí)15例。為方便統(tǒng)計(jì)，將I級(jí)和Ⅱ級(jí)歸為低度惡性組，將Ⅲ級(jí)和Ⅳ級(jí)歸為高度惡性組。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料 鼠抗人 HIF－1α單克隆抗體，兔抗人VEGF多克隆抗體，兔抗人MMP－9多克隆抗體，兔抗人Ki－67單克隆抗體，通用型PV－6000二步法免疫組化試劑盒，S－P法免疫組織化學(xué)染色試劑盒和DAB顯色試劑盒，除HIF－1α購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)有限公司，其余試劑購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3 免疫組織化學(xué)染色 全部10例對(duì)照組標(biāo)本和全部60塊標(biāo)本經(jīng)甲醛固定和石蠟包埋后，進(jìn)行HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67因子的表達(dá)檢測(cè)，所有蠟塊行連續(xù)切片6張，層厚4μm，其中1張行蘇木精－伊紅 (HE)染色確定病理診斷，1張備用，其余4張采用S－P免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67的表達(dá)情況，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)規(guī)范操作。

1.4 結(jié)果判定

1.4.1 定性判定方法 陰性對(duì)照:用PBS代替一抗作陰性對(duì)照，結(jié)果為陰性;陽(yáng)性對(duì)照:用北京博奧森生物技術(shù)有限公司和北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司提供的陽(yáng)性標(biāo)本作為陽(yáng)性對(duì)照。陽(yáng)性結(jié)果:陽(yáng)性結(jié)果鏡下為棕褐色或棕黃色，HIF－1α為細(xì)胞核和 (或)細(xì)胞漿著色，VEGF，MMP－9，Ki－67為細(xì)胞漿著色。

1.4.2 定量判定方法 染色結(jié)果判定:采取半定量計(jì)數(shù)法進(jìn)行評(píng)判，根據(jù)染色強(qiáng)度分為四個(gè)等級(jí):陰性為0分;弱陽(yáng)性 (淡黃色)為1分;陽(yáng)性 (黃色)為2分;強(qiáng)陽(yáng)性(棕黃色)為3分;根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占總視野細(xì)胞數(shù)的百分比進(jìn)行分級(jí):＜5%認(rèn)為0分，5% ～25%為1分，26% ～50%為2分，50%以上為3分。2個(gè)分值相加0分為 (－)，1～2分者為弱陽(yáng)性 (+)，3～4分者為陽(yáng)性 (++)，5～6分者為強(qiáng)陽(yáng)性 (+++)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)由SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，根據(jù)實(shí)驗(yàn)資料，應(yīng)用配對(duì)資料的符號(hào)秩和檢驗(yàn)對(duì)膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)前后的病理級(jí)別進(jìn)行比較;應(yīng)用配對(duì)t檢驗(yàn)，對(duì)原發(fā)和復(fù)發(fā)膠質(zhì)瘤中 HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67的表達(dá)情況分別進(jìn)行比較;應(yīng)用Fisher's確切概率法對(duì)正常腦組織和膠質(zhì)瘤之間的HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67的表達(dá)進(jìn)行比較;應(yīng)用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)對(duì)所有膠質(zhì)瘤各個(gè)級(jí)別膠質(zhì)瘤之間HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67的表達(dá)進(jìn)行比較;應(yīng)用spearman等級(jí)相關(guān)分析驗(yàn)證HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67之間的相關(guān)性;應(yīng)用spearman等級(jí)相關(guān)分析驗(yàn)證膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)時(shí)間和原發(fā)膠質(zhì)瘤病理級(jí)別、HIF－1α表達(dá)強(qiáng)度、VEGF表達(dá)強(qiáng)度，MMP－9表達(dá)強(qiáng)度，Ki－67表達(dá)強(qiáng)度之間的相關(guān)性;以P＜0.05認(rèn)為結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

在10例正常腦組織中均未見(jiàn) HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67的表達(dá)，60例膠質(zhì)瘤中HIF－1α表達(dá)41例，表達(dá)率68.33%;VEGF表達(dá)39例，表達(dá)率65.00%;MMP－9表達(dá)47例，表達(dá)率78.33%;Ki－67表達(dá)45例，表達(dá)率75.00%，HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)強(qiáng)度與正常腦組織之間以及低度惡性組和高度惡性組之間均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＜0.05。膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)后有21例病人病理級(jí)別增強(qiáng)，6例不變，3例下降，經(jīng)配對(duì)資料的符號(hào)秩和檢驗(yàn)P＜0.05，認(rèn)為膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)后病理級(jí)別增加。經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)說(shuō)明HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67在膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)組中的表達(dá)高于原發(fā)組，且兩組之間有差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)，說(shuō)明復(fù)發(fā)后侵襲性得到增強(qiáng)。經(jīng)spearman等級(jí)相關(guān)分析HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67四者之間兩兩相關(guān) (P＜0.05)，但膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)時(shí)間跟原發(fā)膠質(zhì)瘤病理級(jí)別、HIF－1α表達(dá)強(qiáng)度、VEGF表達(dá)強(qiáng)度，MMP－9表達(dá)強(qiáng)度，Ki－67表達(dá)強(qiáng)度之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討 論

膠質(zhì)瘤作為一種惡性腫瘤，它有三種主要的生理特性過(guò)程;增生/增殖、血管新生、侵襲［3］。膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)的定義為原發(fā)性膠質(zhì)瘤術(shù)后以及其它治療后腫瘤再次生長(zhǎng)，且復(fù)發(fā)膠質(zhì)瘤的部位比較局限，國(guó)外學(xué)者認(rèn)為80%以上的復(fù)發(fā)性膠質(zhì)瘤出現(xiàn)在原發(fā)灶周?chē)? cm范圍，這可能與膠質(zhì)瘤的生物學(xué)特征有關(guān)［4］。盡管絕大多數(shù)膠質(zhì)瘤都可以選擇手術(shù)治療，盡量完全切除瘤體，但腫瘤呈侵潤(rùn)性生長(zhǎng)，可侵入到正常腦組織，無(wú)論在肉眼和顯微鏡下腫瘤都難以徹底切除，說(shuō)明手術(shù)完全切除是不可能的，術(shù)后雖結(jié)合放化療，雖然很少轉(zhuǎn)移至其他器官，但多數(shù)患者仍復(fù)發(fā)或進(jìn)展，侵潤(rùn)到周邊鄰近組織的殘留腫瘤細(xì)胞成為復(fù)發(fā)根源，腫瘤復(fù)發(fā)成為一種常見(jiàn)。由于膠質(zhì)瘤這種特性，臨床上治療這類(lèi)疾病目前還無(wú)法根治，目前仍主要依賴(lài)手術(shù)聯(lián)合放、化療，采取綜合治療，但預(yù)后不佳，易復(fù)發(fā)，但膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)時(shí)間的長(zhǎng)短不一，主要認(rèn)為膠質(zhì)瘤細(xì)胞自身的生物學(xué)特性是腫瘤復(fù)發(fā)的關(guān)鍵，而腫瘤患者的年齡、性別、精神情緒、營(yíng)養(yǎng)狀況及膠質(zhì)瘤的部位和大小跟膠質(zhì)瘤的復(fù)發(fā)尚無(wú)明確定論。這一切生物學(xué)特性導(dǎo)致其成為神經(jīng)外科研究領(lǐng)域難點(diǎn)和醫(yī)學(xué)研究的重要課題之一。

近10余年來(lái)隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展特別是腫瘤分子生物學(xué)平的快速提高，越來(lái)越多的國(guó)內(nèi)外學(xué)者再次開(kāi)始仔細(xì)研究膠質(zhì)瘤細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展以及復(fù)發(fā)的分子生物學(xué)特性和機(jī)制，特別是膠質(zhì)瘤細(xì)胞的缺氧環(huán)境適應(yīng)、缺氧狀態(tài)應(yīng)激和調(diào)節(jié)，細(xì)胞凋亡 (apoptosis)、增殖失控、原癌基因和抑癌基因的激活與失活以及細(xì)胞外基質(zhì) (Extracellular matrix)的降解都參與了膠質(zhì)瘤的發(fā)生和發(fā)展和復(fù)發(fā)，也逐漸認(rèn)識(shí)到膠質(zhì)瘤的發(fā)生和復(fù)發(fā)在分子和基因水平的研究是一個(gè)多因素、多基因參與的多步驟的復(fù)雜過(guò)程，并重新成為膠質(zhì)瘤研究重點(diǎn)，并有望成為膠質(zhì)瘤治療和預(yù)防或延緩膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)的新靶點(diǎn)。目前認(rèn)為膠質(zhì)瘤的侵襲和復(fù)發(fā)受多種基因、蛋白以及細(xì)胞因子的調(diào)控，其中以缺氧壞死因子(HIF－1α)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP－9)、核增殖抗原表達(dá)基因 (Ki－67)為典型。

缺氧誘導(dǎo)因子 (Hypoxia inducible factor－1 HIF－1α)是 Semenza GL，Agani F，Booth G［5］等學(xué)者在 1992 年首次在缺氧誘導(dǎo)細(xì)胞的提取物中發(fā)現(xiàn)的一種在缺氧條件下與促紅細(xì)胞生成素 (erythropoietin，EPO)基因3'增強(qiáng)子特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)。HIF－1由HIF－1α和HIF－1β2個(gè)亞基組成，2種亞基具有缺氧誘導(dǎo)因子的許多共同特征，但HIF－1α比HIF－1β更起關(guān)鍵作用，是主要的調(diào)節(jié)亞基和功能亞基單位，它決定著HIF－1的活性。在人類(lèi)多種惡性腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，對(duì)腫瘤的增殖、血管的生成、能量代謝、紅細(xì)胞生成、細(xì)胞凋亡和預(yù)后皆有重要作用。惡性腫瘤細(xì)胞的快速生長(zhǎng)，使其處于缺氧和營(yíng)養(yǎng)缺乏環(huán)境中，而腫瘤長(zhǎng)期處于缺氧狀態(tài)，可誘導(dǎo)HIF－1α因子的釋放，從而在腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)。HIF－1在原發(fā)性膠質(zhì)瘤中的表達(dá)隨病理級(jí)別的增高而增高［6］，但對(duì)于復(fù)發(fā)膠質(zhì)瘤還沒(méi)有深入研究，僅有學(xué)者有提出HIF－1有激發(fā)膠質(zhì)瘤發(fā)展及復(fù)發(fā)的作用。本研究結(jié)果表明在10例正常腦組織中HIF－1α因子中無(wú)陽(yáng)性表達(dá)，HIF－1α因子在腦膠質(zhì)瘤中呈陽(yáng)性表達(dá)，并且隨著腫瘤惡性程度的增加，陽(yáng)性表達(dá)率升高，在高度惡性組與低度惡性組中表達(dá)有顯著差異，同時(shí)本研究說(shuō)明HIF－1α因子在復(fù)發(fā)膠質(zhì)瘤組中的陽(yáng)性表達(dá)高于原發(fā)組。這提示在高度惡性的腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞相比低度惡性的缺氧更加明顯，復(fù)發(fā)后膠質(zhì)瘤細(xì)胞缺氧比原發(fā)組更加顯著。這都充分說(shuō)明缺氧是引起HIF－1α表達(dá)增強(qiáng)的重要機(jī)制［7］，膠質(zhì)瘤的快速?gòu)?fù)發(fā)同樣說(shuō)明復(fù)發(fā)時(shí)腫瘤細(xì)胞快速增值，缺氧更加明顯。同時(shí)說(shuō)明抑制HIF－1α的表達(dá)，可以抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲和延緩復(fù)發(fā)能力，目前HIF－1α在腫瘤中的高表達(dá)已使其成為抗腫瘤藥物研究中新的研究靶點(diǎn)，這種與膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)的生物學(xué)特征可作為膠質(zhì)瘤基因治療的新途徑，可以通過(guò)抑制HIF－1作為治療膠質(zhì)瘤和阻止復(fù)發(fā)的靶點(diǎn)，并可作為膠質(zhì)瘤放療的敏感指標(biāo)［8］。

另外膠質(zhì)瘤的血管形成在腫瘤的生長(zhǎng)和浸潤(rùn)中也起著重要作用，膠質(zhì)瘤的侵襲性生長(zhǎng)是一個(gè)多因素、多步驟的復(fù)雜過(guò)程，這其中包括被大家熟知的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (Vascular endothelial growth factor，VEGF)家族，VEGF是由Ferrara等學(xué)者在1989年首先純化分離出來(lái)的一種肝素結(jié)合因子。VEGF是一種二聚體糖蛋白，分子量為45 KD，基因位于6p21.3上，基因組長(zhǎng)14 kb，其中包含8個(gè)外顯子和7個(gè)內(nèi)含子。VEGF是新生血管形成的中心調(diào)控因子，其主要功能包括 (1)由于腫瘤細(xì)胞在快速生長(zhǎng)過(guò)程中對(duì)氧和營(yíng)養(yǎng)的需求量過(guò)大，而缺氧恰為VEGF最強(qiáng)烈的誘導(dǎo)劑，因而導(dǎo)致VEGF大量分泌，加速血管內(nèi)皮細(xì)胞的增生和分化，促使新生血管生成;(2)VEGF可激活血管內(nèi)皮細(xì)胞基因，增強(qiáng)尿激酶型纖溶酶原激活物 (uPA)和組織型纖溶酶原激活物 (tP－A)，并減弱纖溶酶原激活劑抑制物(PAI－1)的表達(dá)，進(jìn)而誘導(dǎo)蛋白水解酶、間質(zhì)膠原酶和組織因子的產(chǎn)生來(lái)促進(jìn)血管的形成［9］;(3)VEGF促使血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生MMP－9，使凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，激活明膠酶原A降解原來(lái)的基膜，促使血管形成［10］;(4)VEGF可通過(guò)細(xì)胞內(nèi)鈣調(diào)節(jié)蛋白及磷酸肌醉途徑增強(qiáng)NO合酶(NOS)表達(dá)，導(dǎo)致NO生成增多，進(jìn)而促進(jìn)新生血管網(wǎng)建立和管腔的形成。所有這些都提示VEGF與膠質(zhì)瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移、診斷、復(fù)發(fā)及預(yù)后有的密切的關(guān)系。

基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP－9)是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中較為重要的一種，而一種130千道爾頓的MMP－9被認(rèn)為是可以合成其它形式的蛋白酶，MMP－9不僅在膠質(zhì)瘤的侵襲性中有重要貢獻(xiàn)，在血管生成中也參與其中，同時(shí)也參與退化血腦屏障和神經(jīng)細(xì)胞［11］。MMP－9在膠質(zhì)瘤的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用，且隨著膠質(zhì)瘤惡性程度的增加，其病理級(jí)別也隨之增加，在MMP－9的表達(dá)中，MMP－9的表達(dá)強(qiáng)度與膠質(zhì)瘤惡性程度正相關(guān)，即膠質(zhì)瘤的惡性程度越高其MMP－9的表達(dá)強(qiáng)度越強(qiáng)［12］。而在膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)中，MMP－9同樣起著重要作用，在膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)后MMP－9表達(dá)得到進(jìn)一步增強(qiáng)［13］在體外試驗(yàn)研究中，也表明在惡性神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤復(fù)發(fā)過(guò)程中，MMP－9起著非常重要的作用，MMP－9在復(fù)發(fā)膠質(zhì)瘤患者的腦脊液檢測(cè)中，其水平可明顯升高，且用強(qiáng)力霉素這種特異性的MMPs抑制劑可阻斷MMMPs中MMP－2和 MMP－9的活性［14］，此外這預(yù)示MMP－9可以預(yù)示膠質(zhì)瘤的早期進(jìn)展，它可以作為膠質(zhì)瘤進(jìn)展的一個(gè)標(biāo)記。Ki－67是一種存在于增殖細(xì)胞核的非組蛋白性核蛋白，由345kd和395kd兩條多肽鏈組成，其半衰期短，Ki－67表達(dá)同細(xì)胞周期密切相關(guān)，更能反映腫瘤的增殖活性，在正常腦組織中幾乎不表達(dá)，而在膠質(zhì)瘤中表達(dá)，且是目前增殖活動(dòng)研究中非?？煽康卦鲋硺?biāo)志，也是目前應(yīng)用最廣泛的增殖細(xì)胞標(biāo)志之一［15］。其中MMP－9和Ki－67在腫瘤細(xì)胞的增殖和分化中起著重要作用，是表達(dá)腫瘤侵襲性和侵潤(rùn)性的良好指標(biāo)，其表達(dá)也一起與腫瘤的復(fù)發(fā)有關(guān)。

本課題研究的30例患者平均復(fù)發(fā)時(shí)間為17.7個(gè)月，最短復(fù)發(fā)時(shí)間為2.0個(gè)月，最長(zhǎng)復(fù)發(fā)時(shí)間為39.7個(gè)月，將復(fù)發(fā)時(shí)間數(shù)據(jù)跟原發(fā)膠質(zhì)瘤病理級(jí)別、HIF－1α表達(dá)強(qiáng)度、VEGF表達(dá)強(qiáng)度，MMP－9表達(dá)強(qiáng)度，Ki－67表達(dá)強(qiáng)度之間經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，得出復(fù)發(fā)時(shí)間跟五者之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但本實(shí)驗(yàn)HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－6四種細(xì)胞因子經(jīng)spearman等級(jí)相關(guān)分析，表明兩兩之間存在相關(guān)性，四種因子在復(fù)發(fā)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)明顯比原發(fā)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)強(qiáng)度增加，且統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義;說(shuō)明四者在膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展、增值和復(fù)發(fā)過(guò)程中起著重要作用，其中MMP－9啟動(dòng)子的活性是由HIF－1α調(diào)控［16］，HIF－1α是在缺氧條件下穩(wěn)定和刺激MMP－9的表達(dá)，更能誘導(dǎo)MMP－9基因在腫瘤中侵襲，從而影響腫瘤的侵潤(rùn)，進(jìn)來(lái)研究中HIF－1α作用機(jī)制中已明確其能增加MMPs如MMP－2和MMP－9的表達(dá)［17］，酶譜分析表明，MMP－9在有氧條件下比缺氧條件下更能刺激明膠酶的活性，并得出HIF－1α通過(guò)MMP－9的依賴(lài)機(jī)制能促進(jìn)細(xì)胞的侵襲，未來(lái)的抗腫瘤細(xì)胞藥物可直接作用于目標(biāo)HIF－1α和MMP－9。另外，VEGF促使血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生MMP－9，使凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，激活明膠酶原A降解原來(lái)的基膜，促使血管形成［10］780－786。因此HIF－1α因子在膠質(zhì)瘤的增值、侵潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)中都有極其重要的作用，是腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移、侵潤(rùn)的啟動(dòng)子，如果能有效的阻滯HIF－1α因子的啟動(dòng)，將更加有效的控制腫瘤的侵潤(rùn)乃至控制復(fù)發(fā)。

綜上所述，HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67四種因子之間相互影響、相互調(diào)控，為以后的靶向治療和臨床預(yù)后評(píng)價(jià)提供新的思路和見(jiàn)解，HIF－1α，VEGF，MMP－9，Ki－67四者聯(lián)合檢測(cè)可以評(píng)定腦膠質(zhì)瘤的生物學(xué)行為，也可以作為評(píng)價(jià)膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)的生物學(xué)指標(biāo)。

(此文圖1－4見(jiàn)附頁(yè)4)

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