我國部分省市實(shí)驗(yàn)大、小鼠腸道寄生蟲檢測(cè)結(jié)果與防控

陳 寧，程 田，王 平，李俊鵬，張延忠，朱興全

(1. 深圳市藥品檢驗(yàn)所，深圳 518057；2. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，廣州 510642；3. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，蘭州 7300004；4. 深圳市瑞鵬寵物醫(yī)院，深圳 518000)

隨著近年來國家對(duì)生命科學(xué)研究及醫(yī)藥生物產(chǎn)業(yè)的重視，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)環(huán)境條件得到不斷提升。但是，寄生蟲仍然是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)存在的重要病原體之一，它對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)體和實(shí)驗(yàn)研究均有一定的危害和影響。它不僅會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物機(jī)體的生理、生化以及免疫學(xué)指標(biāo)發(fā)生改變,還會(huì)嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至還可能引起人獸共患性疾病，威脅人類的健康。筆者對(duì)我國部分省市近二十幾年來對(duì)實(shí)驗(yàn)鼠的腸道寄生蟲感染情況報(bào)道進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，希望能給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)、管理和研究人員提供有用的信息。

1 幾種常見的鼠腸道寄生蟲

1.1 蟯蟲

蟯蟲是嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)最常見的寄生蟲之一，一般分為3種，包括隱藏管狀線蟲(Syphaciaobvelata)、四翼無刺線蟲(Aspicularistetraptera)和鼠管狀線蟲(Syphaciamuris)。它們的生活史為直接型，成蟲定居于結(jié)腸和盲腸。小鼠感染后出現(xiàn)如直腸脫垂、腸套迭、糞便堵塞、體重增加緩慢以及被毛粗亂等體征，而大量的寄生蟲蟲荷可導(dǎo)致卡他性腸炎、肝臟肉芽腫、肛周刺激體征。

和其它許多蠕蟲病一樣，機(jī)體對(duì)蟯蟲的免疫主要為體液免疫。在感染蟯蟲的鼠體內(nèi)可檢測(cè)到管狀線蟲的特異性抗體。自然感染鼠隱藏管狀線蟲(S.obvelata)后導(dǎo)致小鼠的骨髓細(xì)胞在細(xì)胞和分子水平上出現(xiàn)顯著改變，同時(shí)，使一氧化氮合成酶(iNOS)的mRNA表達(dá)水平增強(qiáng)，另外鼠隱藏管狀線蟲的感染干擾了骨髓細(xì)胞IL-17對(duì)p38MAPK和iNOS在的調(diào)節(jié)作用[1]。

1.2 微小膜殼絳蟲

微小膜殼絳蟲(Hymenolepisnana),又稱短膜殼絳蟲，屬于膜殼科膜殼屬，為小型絳蟲。是一種較常見的人獸共患寄生蟲, 在溫帶和熱帶地區(qū)較多見。微小膜殼絳蟲廣泛寄生于鼠類小腸中, 鼠類是其感染常見的終宿主。成蟲亦可寄生于人體小腸，引起微小膜殼絳蟲病。由于膜殼絳蟲為人獸共患寄生蟲，因此，對(duì)不注意個(gè)人衛(wèi)生的實(shí)驗(yàn)人員的健康造成較大威脅，同時(shí)可能會(huì)造成實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確，影響研究的科學(xué)性。

1.3 賈第鞭毛蟲

鼠賈第鞭毛蟲(Giardiamuris) 生活史簡(jiǎn)單，該蟲只有滋養(yǎng)體期，滋養(yǎng)體隨鼠糞排出，鼠主要是食入混在飲用水和飼料中的滋養(yǎng)體而被感染。宿主的保護(hù)性免疫包括細(xì)胞免疫和體液免疫，其中γ干擾素對(duì)滋養(yǎng)體的清除起一定的作用。研究表明，鼠賈第鞭毛蟲感染可引起宿主多種生理功能的改變。實(shí)驗(yàn)小鼠和大鼠自然感染鼠賈第鞭毛蟲可干擾有關(guān)胃腸道系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)研究[2]。

2 我國各地大小鼠腸道寄生蟲感染情況統(tǒng)計(jì)、分析

鼠蟯蟲在部分省市的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物單位感染率普遍較高，甚至可達(dá)100%，蟲種以鼠隱藏管狀線蟲為主。福建省2007-2008年清潔級(jí)昆明(KM)鼠的蟯蟲陽性檢出率達(dá)100%，清潔級(jí)ICR小鼠蟯蟲陽性檢出率為33.3%[3](表1)。天津市2005年清潔小鼠寄生蟲陽性檢出率為54.55%，其中津白II號(hào)蟯蟲陽性檢出率100%，KM鼠陽性檢出率為47.97%，BALB/c小鼠陽性檢出率為42.86%，津白I號(hào)33.33%[4]。貴州醫(yī)學(xué)院小鼠體內(nèi)四翼無刺線蟲陽性檢出率達(dá)62.0%，鼠管狀線蟲陽性檢出率達(dá)57.0%[5](表1)。

鞭毛蟲的陽性檢出率僅次于鼠蟯蟲。任鵬宇等[6]報(bào)道陜西的普通級(jí)ICR小鼠寄生蟲總陽性檢出率97.45%，感染兩種或兩種以上寄生蟲的小鼠達(dá)69.1%，其中，鼠賈第鞭毛蟲的陽性檢出率最高，為85.82%，鼠隱藏管狀線蟲和四翼無刺線蟲的陽性檢出率也分別高達(dá)53.82%、51.64%。張素英等[7]報(bào)道2008-2009年山東省SPF級(jí)KM小鼠鞭毛蟲陽性檢出率為18.2%，SPF級(jí)Wistar大鼠有鞭毛蟲陽性檢出率為33.3%；SD大鼠鞭毛蟲陽性檢出率為28.6%(表2)。

王伙聰[8]報(bào)道福建普通級(jí)KM小鼠體內(nèi)絳蟲寄生尤為嚴(yán)重，6周齡小鼠體內(nèi)短膜殼絳蟲陽性檢出率達(dá)75%，長(zhǎng)膜殼絳蟲陽性檢出率達(dá)30%，有的小鼠體內(nèi)絳蟲數(shù)目達(dá)40多條，塞滿腸道。包懷恩等[5]報(bào)道的貴陽醫(yī)學(xué)院大鼠體內(nèi)膜殼絳蟲陽性檢出率達(dá)35.0%，小鼠膜殼絳蟲陽性檢出率達(dá)31.0%(表1,2)。

3 分析與討論

3.1 我國實(shí)驗(yàn)大小鼠寄生蟲質(zhì)量有待進(jìn)一步提高

近年來，我國各省市的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量檢測(cè)站、疾病預(yù)防控制中心、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)單位及科研院校都定期或不定期地對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量進(jìn)行調(diào)查和檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲陽性檢出率總體呈逐年下降趨勢(shì)，如廣東省與2007年相比較，2008年SPF級(jí)大小鼠質(zhì)量控制有所提高，大小鼠蠕蟲感染降至為0[19]。但仍有個(gè)別城市的寄生蟲陽性檢出率仍有上升的趨勢(shì)，如北京市2009-2013年的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抽檢批次合格率由89.7%下降為68.8%，病原感染是每年實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量不合格的主要原因之一。其中2013年SPF級(jí)的小鼠和大鼠同時(shí)檢出了鞭毛蟲和蠕蟲，這兩項(xiàng)檢測(cè)內(nèi)容在過去的五年間一直是處于合格水平[17]。

表1 部分省市小鼠腸道寄生蟲檢出情況

表2 部分省市大鼠腸道寄生蟲檢出情況統(tǒng)計(jì)

全國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲質(zhì)量控制仍然不容樂觀。山東省2008-2009年SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的合格率僅為78.4%，其中3個(gè)品系64只動(dòng)物有鞭毛蟲，1個(gè)品系2只動(dòng)物兼有腸道蠕蟲，可見影響山東省SPF級(jí)動(dòng)物達(dá)標(biāo)的主要是鞭毛蟲。SPF動(dòng)物被檢出腸道鞭毛蟲，反映了受檢單位在飼養(yǎng)管理上的不當(dāng)，所以在新動(dòng)物移入屏障系統(tǒng)時(shí)一定要注意[7]。另外，高校由于學(xué)生多、課題開展多，人員進(jìn)出屏障環(huán)境比較頻繁等原因，再加上一些學(xué)校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部門管理比較松散，大、小鼠的感染率顯得頗高。如王菲等[21]報(bào)道大理學(xué)院SD大鼠的陽性檢出率達(dá)25%。包懷恩等[5]報(bào)道貴陽醫(yī)學(xué)院KM鼠混合陽性檢出率達(dá)到69.0%，單一陽性檢出率達(dá)81.0%。天津醫(yī)科大學(xué)小鼠體內(nèi)的鼠蟯蟲陽性檢出率也達(dá)50.65%[4]。

3.2 監(jiān)管單位要不斷提升監(jiān)管模式及檢測(cè)水平，使監(jiān)測(cè)結(jié)果更為科學(xué)化

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)于推動(dòng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)發(fā)展具有重要的作用，如何避免實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量波動(dòng)問題的此消彼長(zhǎng)并使其得到有效的控制，需要監(jiān)管部門在抽檢及結(jié)果處理方式上做出更科學(xué)合理的安排。如北京市的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)測(cè)在每年的5月和10月，時(shí)間和方式多年約定俗成，一些生產(chǎn)企業(yè)難免會(huì)因?yàn)閼?yīng)付監(jiān)測(cè)而在抽檢之前有所準(zhǔn)備[17]。

另外，檢測(cè)單位要進(jìn)一步提升檢測(cè)技能，嚴(yán)格執(zhí)行檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，一些國家標(biāo)準(zhǔn)未強(qiáng)制要求排除的人獸共患寄生蟲結(jié)合實(shí)際情況同樣需要引起重視，如2008年廣東抽檢清潔級(jí)小鼠體內(nèi)阿米巴原蟲陽性檢出率達(dá)100%[19]，重慶大鼠體內(nèi)人五毛滴蟲陽性檢出率高達(dá)100%[10]。阿米巴原蟲病是一種高發(fā)病率、高致病性的人獸共患寄生蟲病，凡是從糞便中排除的阿米巴包囊的人和動(dòng)物，都可能成為感染源。雖然國家標(biāo)準(zhǔn)未將阿米巴原蟲列入清潔級(jí)以上小鼠必須排除的寄生蟲范圍內(nèi)，但若他們?cè)谄琳舷到y(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)的大小鼠群中出現(xiàn)，就標(biāo)志著屏障系統(tǒng)內(nèi)大、小鼠的飼養(yǎng)管理出了問題。

3.3 生產(chǎn)和使用單位要進(jìn)一步強(qiáng)化管理意識(shí)和管理水平

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量容易受到環(huán)境設(shè)施、理化因素、飼養(yǎng)方式、繁育運(yùn)輸?shù)榷喾N因素的影響。任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，都有可能造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量不合格，從而嚴(yán)重影響科學(xué)研究的進(jìn)行，并可能造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。SPF動(dòng)物的種群來源于無菌剖腹產(chǎn)動(dòng)物，在屏障系統(tǒng)中進(jìn)行保種、飼育及使用，應(yīng)按國家標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格實(shí)施微生物和寄生蟲控制。動(dòng)物的繁殖、生產(chǎn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等設(shè)施，要嚴(yán)格按規(guī)范要求建設(shè)和管理，并應(yīng)進(jìn)行經(jīng)常性的質(zhì)量監(jiān)測(cè)。從事繁殖、生產(chǎn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的人員，應(yīng)當(dāng)接受實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的專門培訓(xùn)，減少生產(chǎn)環(huán)節(jié)中的失誤，提高生產(chǎn)管理水平。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量不僅靠生產(chǎn)單位控制，使用單位在使用過程中也要加強(qiáng)管理和監(jiān)測(cè)，尤其是高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，要做好各項(xiàng)日常預(yù)防措施，堅(jiān)持嚴(yán)格隔離檢疫和衛(wèi)生消毒制度，墊料、飲水勤消毒、勤更換；不從疫區(qū)引進(jìn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；各類動(dòng)物分室飼養(yǎng)，防止交叉感染；飼料、墊料和庫房保持干燥、通風(fēng)、防蟲、防野鼠。出現(xiàn)疫情時(shí)及時(shí)發(fā)現(xiàn)，及時(shí)上報(bào)；迅速隔離患病動(dòng)物，實(shí)驗(yàn)中的動(dòng)物立即停止實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步觀察或淘汰，病死動(dòng)物實(shí)施無害化處理。

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