磷脂酶A2在心血管疾病動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的研究進(jìn)展

楊欽欽，陳民利

(浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心/比較醫(yī)學(xué)研究中心，杭州 310053)

磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)是一種能催化膜磷脂甘油分子水解的酶，生成游離脂肪酸和溶血磷脂，如花生四烯酸(arachidonic acid, AA)和溶血磷脂[1-2]。水解物通過(guò)不同代謝途徑在體內(nèi)發(fā)揮生理作用，如膜磷脂降解、能量代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、血液凝固、質(zhì)膜重建等[3-7]，具有廣泛的生物活性。至今已發(fā)現(xiàn)磷脂酶A2超家族有27個(gè)成員，主要分為四大類：1、分泌型磷脂酶A2(secreted phospholipaseA2, sPLA2)；2、胞漿型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)；3、鈣離子非依賴型磷脂酶A2(calcium-independent phospholipaseA2,iPLA2)；4、脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)。目前研究發(fā)現(xiàn)sPLA2與炎癥、動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)、腫瘤等疾病緊密相關(guān)；cPLA2涉及炎癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病等病理過(guò)程；iPLA2在脂類代謝、腫瘤等生理病理過(guò)程中必不可少；Lp-PLA2在AS形成中發(fā)揮重要作用。對(duì)這些疾病研究中，PLA2在心血管疾病中的作用逐漸成為了研究熱點(diǎn)。

心血管疾病是全球發(fā)病率和死亡率較高的疾病之一，而動(dòng)脈粥樣硬化是其重要的病理基礎(chǔ)，動(dòng)脈炎癥在AS和惡性心血管事件中起著核心作用。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)PLA2與心血管病變(如動(dòng)脈粥樣硬化、心肌缺血等)有著密切的聯(lián)系，sPLA2涉及AS從早期病變(脂紋)到復(fù)合病變各階段的生理病理過(guò)程；cPLA2和iPLA2很可能通過(guò)形成脂質(zhì)媒介促進(jìn)AS形成；而Lp-PLA2已成為動(dòng)脈粥樣硬化的一種新型炎癥標(biāo)志物。因此，探究PLA2在AS相關(guān)炎癥性疾病中的作用至關(guān)重要，利用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究能進(jìn)一步揭示PLA2與AS的關(guān)系。

隨著生物技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用，利用各種轉(zhuǎn)基因、基因敲除小鼠或其他動(dòng)物模型為研究PLA2在AS中的作用提供了新的途徑。各PLA2基因操作小鼠展現(xiàn)的AS表型可能不單歸因于脂質(zhì)代謝信號(hào)的改變，更多的可能是類花生酸信號(hào)變化，但也可能是各種靶向細(xì)胞膜的降解。本文結(jié)合近年來(lái)國(guó)內(nèi)外對(duì)PLA2在心血管疾病中的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道逐個(gè)進(jìn)行闡述。

1 sPLA2與AS在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的研究

sPLA2是一種Ca2+依賴的分泌型胞外酶，分子量為14～18 kDa[8]。100多年前，從眼鏡蛇毒液中分離出sPLA2s的首個(gè)成員，命名為group IA(GIA)，開啟了PLA2家族的篇章。至今，在哺乳動(dòng)物中已發(fā)現(xiàn)11種sPLA2亞型，分別為GIB、IIA、IIC、IID、IIE、IIF、III、V、X、XIIA和XIIB。而人類基因組只能編碼9種蛋白，其中IIC型sPLA2是以假基因形式存在于人體內(nèi)，鼠類中含有上述的全部PLA2。sPLA2s與疾病的關(guān)系在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行了頗多研究，sPLA2亞型的分布及在小鼠中的表現(xiàn)歸納見表1。

表1 sPLA2主要分布及在KO/Tg小鼠中的表現(xiàn)

sPLA2在AS病變動(dòng)物中的實(shí)驗(yàn)研究已成為此研究領(lǐng)域的熱門話題。越來(lái)越多的研究表明sPLA2-IIA, sPLA2-III, sPLA2-V和sPLA2-X很可能在血管壁上有多種致AS特性[9]。脂蛋白顆粒(如LDL和HDL)表面覆蓋的PC是sPLA2的底物。sPLA-X, V, III, II都能水解PC，其中X型的水解能力最強(qiáng)。sPLA2水解脂蛋白表面PC生成的游離脂肪酸和LPC有轉(zhuǎn)換血管活性和促炎性作用，從而加速AS的形成。sPLA2水解LDL形成更多小致密并帶負(fù)電荷的修飾LDL。這些LDL比較容易滲進(jìn)血管壁，形成氧化性LDL(ox-LDL)，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞泡沫化，最終導(dǎo)致AS的發(fā)生[10]。同時(shí)水解HDL能降低這些抗AS顆粒促進(jìn)膽固醇從脂質(zhì)豐富的泡沫細(xì)胞中外流的能力。動(dòng)脈斑塊中修飾的LDL比循環(huán)LDL含有較少的PC和更多的LPC，這表明斑塊部位的LDL經(jīng)過(guò)了sPLA2的脂解修飾。事實(shí)上，LDL被sPLA2水解后，會(huì)導(dǎo)致磷脂降解顆粒上apoB-100的結(jié)構(gòu)改變，從而促進(jìn)了聚合作用[11-12]。

1.1 sPLA2-IIA與AS的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究

大量研究表明在AS病變的各個(gè)階段都能發(fā)現(xiàn)sPLA2-IIA，主要存在于巨噬細(xì)胞富集的區(qū)域、動(dòng)脈粥樣硬化的非細(xì)胞脂類核心及病變血管內(nèi)膜的細(xì)胞外基質(zhì)中。Li WH等[13]研究發(fā)現(xiàn)sPLA2-IIA在AS大鼠血管平滑肌細(xì)胞、心肌組織及脂肪組織中的表達(dá)均升高。Niessen等[14]認(rèn)為sPLA2-IIA是AS和心肌細(xì)胞缺血性損害的介質(zhì)，可作為心血管疾病中的一個(gè)重要炎癥因子。sPLA2-IIA能誘導(dǎo)許多脂質(zhì)介質(zhì)生成，如非酯化脂肪酸、氧化性非酯化脂肪酸、溶血磷脂等，促發(fā)下游多種炎癥信號(hào)傳導(dǎo)，從而導(dǎo)致AS斑塊形成。

許多AS動(dòng)物研究也表明sPLA2與AS斑塊形成緊密相關(guān)。PLA2G2A-Tg小鼠持續(xù)飼喂高膽固醇飲食后，血管中出現(xiàn)AS斑塊的幾率大大增加[15]。在這類小鼠的動(dòng)脈粥樣斑塊中發(fā)現(xiàn)有sPLA2-IIA，而且相比與正常組其血漿HDL降低，LDL和活性氧化磷脂含量升高。Ivandic等[16]研究揭示PLA2G2A-Tg小鼠即使在低脂飲食下也能呈現(xiàn)出AS病變，免疫組化印染顯示sPLA2出現(xiàn)在轉(zhuǎn)基因小鼠的AS病變斑塊中。轉(zhuǎn)基因小鼠巨噬細(xì)胞分泌的sPLA2-IIA能增強(qiáng)12/15-脂氧合酶(12/15-LOX)的表達(dá)，引起氧化壓力產(chǎn)生，被認(rèn)為是AS形成的一個(gè)重要因子[17]。尤其是，當(dāng)將PLA2G2A-Tg小鼠的骨髓細(xì)胞移植到到Ldlr-/-的小鼠后，盡管血清脂蛋白濃度變化不大，但是后者主動(dòng)脈弓部和竇部的AS病變程度顯著增加[18]。由此推論，sPLA2-IIA可以獨(dú)立于脂蛋白代謝而促進(jìn)AS的形成。

1.2 sPLA2-V與AS的實(shí)驗(yàn)研究

近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)sPLA2-V比sPLA2-IIA具有更強(qiáng)的水解LDL和HDL表面PC的活性，經(jīng)sPLA2-V修飾后的LDL能更有效誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化成泡沫細(xì)胞，提示sPLA2-V可能是促進(jìn)AS形成中的一個(gè)更重要的酶[19]。事實(shí)上，sPLA2-V在動(dòng)物AS斑塊中含量的確更高。含脂量高的飲食能上調(diào)大動(dòng)脈中sPLA-V的表達(dá)，而且自發(fā)性AS的apoE-/-×Ldlr-/-小鼠的動(dòng)脈斑塊中sPLA2-V也顯著表達(dá)[8]。因?yàn)閟PLA2-V通過(guò)結(jié)合蛋白聚糖后能使其對(duì)LDL的作用活性大大增強(qiáng)，所以巨噬細(xì)胞能依賴于蛋白聚糖(粘結(jié)蛋白聚糖-4)途徑而不是清道夫受體SR-A和CD36攝取由sPLA2-V修飾的LDL，sPLA2-V形成的游離脂肪酸刺激巨噬細(xì)胞通過(guò)NF-κB途徑誘發(fā)促炎因子生成，最終導(dǎo)致AS發(fā)生[20]。

更重要的是，Ldlr-/-小鼠接受逆轉(zhuǎn)錄酶病毒介導(dǎo)的pla2g5基因移植之后，其升主動(dòng)脈根部的斑塊面積明顯增加，局部區(qū)域伴隨有膠原沉積，然而移植pla2g5-/-骨髓細(xì)胞小鼠的主動(dòng)脈弓部和胸主動(dòng)脈中的斑塊顯著減少[21]。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果充分說(shuō)明了巨噬細(xì)胞相關(guān)的sPLA2-V參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展。另外，缺乏sPLA-V的ApoeE-/-小鼠斑塊中血小板膠原含量也顯著降低[22]。值得注意的是，這些骨髓移植方法只能評(píng)價(jià)巨噬細(xì)胞或其他造血細(xì)胞中sPLA2-V的作用，AS非造血細(xì)胞中sPLA2-V的作用有待進(jìn)一步探究。

1.3 sPLA2-X與AS的實(shí)驗(yàn)研究

sPLA2-X和sPLA2-V在體外均能有效水解脂蛋白上的卵磷脂，而且sPLA-X水解活性比sPLA2-V更強(qiáng)[12]。sPLA2-X作用于LDL顆粒產(chǎn)生小而致密的LDL顆粒，促進(jìn)巨噬細(xì)胞形成，以及增加內(nèi)皮細(xì)胞粘附因子的表達(dá)，最終導(dǎo)致AS形成。sPLA2-X脂解修飾之后的HDL，其促進(jìn)膽固醇從載脂巨噬細(xì)胞中外流的能力被削弱。最近，Zack M等[23]在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的研究表明缺失sPLA2-X的ApoE-/-小鼠能顯著減少血管緊張素-II(Ang-II)誘發(fā)的腹主動(dòng)脈瘤和AS的發(fā)生，同時(shí)一些脂類促炎因子的形成也降低。

當(dāng)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生在冠狀動(dòng)脈時(shí)則容易引起心肌梗塞，嚴(yán)重威脅人類的生命。在心肌缺血再灌注實(shí)驗(yàn)中，Pla2g10-/-小鼠的心肌梗死面積和嗜中性粒細(xì)胞數(shù)量顯著下降，且當(dāng)受輻照的野生型小鼠再用Pla2g10-/-骨髓細(xì)胞重造后，心肌梗死面積顯著變少，說(shuō)明sPLA2-X也是一個(gè)很強(qiáng)促AS因子[24]。Pla2g10-/-小鼠的缺血區(qū)域顯示出較低的中性粒細(xì)胞含量，分離這些Pla2g10-/-中性粒細(xì)胞能減少AA釋放以及產(chǎn)物L(fēng)TB4的分泌，也能改善呼吸道疾病。而且，另有研究發(fā)現(xiàn)sPLA2抑制劑能減少野生型小鼠的心肌缺血面積。這些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果使人們進(jìn)一步認(rèn)識(shí)了sPLA2-X在中性粒細(xì)胞介導(dǎo)心肌損傷中的作用，未來(lái)應(yīng)用合適的小鼠模型將會(huì)認(rèn)識(shí)sPLA2-X在斑塊中更多的作用。

1.4 sPLA2-III與AS的實(shí)驗(yàn)研究

sPLA2-III也能有效水解LDL和HDL中的磷脂質(zhì)。體內(nèi)研究表明sPLA2-III修飾的LDL也類似于sPLA2-V或sPLA2-X作用的LDL，能促進(jìn)巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化成泡沫細(xì)胞。ApoE-/-小鼠中能檢測(cè)到sPLA2-III在斑塊中聚集[25]。在PLA2G3-Tg小鼠研究中顯示，當(dāng)其攝食導(dǎo)致AS飲食后大動(dòng)脈中會(huì)形成比ApoE敲除小鼠更嚴(yán)重的動(dòng)脈斑塊，而且炎癥因子(如LPC和TXA2)的含量也隨著升高。由此說(shuō)明，sPLA2-III與動(dòng)脈粥樣硬化有潛在的聯(lián)系，但是進(jìn)一步的病理生理關(guān)系將有待于在pla2g3-/-小鼠中進(jìn)行更多的后續(xù)研究。

另外，在動(dòng)物AS斑塊中也能檢測(cè)出其他的sPLA2，包括sPLA2-IID, IIE和IIF。sPLA2-IIF亦能水解脂蛋白表面的PC，其功效作用值得進(jìn)一步探究。綜上所述，X, V, III和II-PLA2是血漿中主要的促動(dòng)脈粥樣硬化因子，通過(guò)水解LDL和HDL表面的PC，產(chǎn)生LPC和小而致密的LDL，促進(jìn)巨噬細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞泡沫化以及膠原的聚積，最終導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生和發(fā)展。

1.5 sPLA2與其他相關(guān)疾病的實(shí)驗(yàn)研究

sPLA2還與糖尿病、高脂血癥、肥胖等疾病相關(guān)。脂肪飼喂的Pla2g1b-/-小鼠與普通食物飼喂的Pla2g1b+/+小鼠相比，雖然前者脂肪吸收多但兩者體重相當(dāng)[26]。同時(shí)喂以低脂飲食時(shí)，Pla2g1b-/-小鼠則展示出了更佳的葡萄糖耐量和胰島素敏感度，表明PLA2G1B能調(diào)節(jié)肥胖癥、葡萄糖代謝和胰島素敏感性。在研究PLA2G2A基因自然突變的C57BL/6小鼠時(shí)發(fā)現(xiàn)炎癥也提高了脂肪組織中PLA2G2A的表達(dá)，這表明PLA2G2A不僅能促進(jìn)AS發(fā)生，而且也是其他炎癥代謝性疾病(如糖尿病)的促炎因子[27]。

2 cPLA2和iPLA2與心血管疾病在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的研究

2.1 cPLA2與心血管疾病在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的研究

在PLA2家族中列為IV型，屬于此家族中的胞外酶，在哺乳類動(dòng)物中已經(jīng)鑒別出6大種，即cPLA2α、β、γ、δ、ε、ξ(即GIVA、IVB、IVC、IVD和IVF)，而人類中僅有A-D四種亞型。GIVA cPLAα是最為廣泛研究的一個(gè)酶，在人類和鼠科動(dòng)物的大腦、肝、腎、胰等組織中普遍表達(dá)，具有PLA2和溶血磷脂酶活性，也是唯一一個(gè)對(duì)含AA的磷脂底物有特異性的酶。cPLAα受刺激時(shí)釋放類花生酸的前體物質(zhì)AA，因此在炎癥性疾病中有重要作用。近年來(lái)的研究表明，心血管疾病是一種炎癥性疾病，而cPLAα能產(chǎn)生各種脂質(zhì)介質(zhì)誘發(fā)血管炎癥和動(dòng)脈粥樣硬化，與心血管疾病的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切。

動(dòng)脈粥樣硬化病變始于內(nèi)皮損傷，還有血脂沉積和血小板粘附釋放的多種炎癥因子(如TXA2)共同作用下，可激活內(nèi)皮細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞，合成膠原等細(xì)胞外基質(zhì)，在這些復(fù)雜因子的協(xié)同作用下形成AS，而cPLA2在此過(guò)程中起到了關(guān)鍵性作用[28]。目前，cPLA2的研究主要集中在cPLA2α，在動(dòng)脈炎癥反應(yīng)中的機(jī)制研究包括：①、cPLA2α誘導(dǎo)炎癥因子及趨化因子(IL-1β, IL-6, TNF-α)生成；②、cPLA2α通過(guò)“cPLA2α-AA-NADPH氧化酶-超氧陰離子”途徑產(chǎn)生大量氧自由基；③、cPLA2α通過(guò)5-LOX促進(jìn)病理狀態(tài)下誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS)生成，造成血管損傷。因此，cPLA2α參與了廣泛的生理病理反應(yīng)。

血小板活化依賴于COX-1途徑參與促血栓因子TXA2的形成。Wong DA[29]實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)pla2g4a-/-小鼠中cPLA2α在膠原刺激血小板產(chǎn)生TXA2過(guò)程中是必不可少的，而ADP誘導(dǎo)TXA2形成不依賴cPLA2α。此外，pla2g4a-/-小鼠體外血小板聚集只有極少量地下降，這可能是由于冗余PLA2產(chǎn)生的小部分TXA2能有效保護(hù)聚集。但是，依賴于TXA2的血管收縮缺失解釋了pla2g4a-/-小鼠流血時(shí)間延長(zhǎng)以及免于血管栓塞疾病的原因。

cPLA2α也存在于各種細(xì)胞類型的脂肪液滴中。這些脂肪液滴由合成酶(神經(jīng)酰胺激酶)通過(guò)C1P途徑合成，并依賴于JNK途徑在cPLA2α的Ser505位點(diǎn)通過(guò)磷酸化作用進(jìn)行誘導(dǎo)。而且，pla2g4a-/-小鼠的體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)它們不會(huì)隨著年齡增長(zhǎng)或飲食(正?；蚋咧嬍?而在脂肪細(xì)胞或肝臟中積累脂肪液滴，脂肪形成或促炎介質(zhì)也相應(yīng)減少[30]。同理，pla2g4a-/-小鼠在高脂飲食下也能抵抗形成AS。

2.2 iPLA2與心血管疾病在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的研究

iPLA2在PLA2家族中列為VI型，亦屬胞內(nèi)酶，催化活性不依賴于Ca2+。iPLA2家族具有相同的蛋白域，這個(gè)蛋白域最初是從馬鈴薯糖蛋白(patatin)中發(fā)現(xiàn)的。因此，iPLA2也叫PNPLA2，包括GVIA(iPLA2β;PNPLA9), GVIB (iPLA2γ; PNPLA8), GVIC (iPLA2δ;PNPLA6),GVID (iPLA2ε; PNPLA3), GVIE (iPLA2ζ; PNPLA2)和GVIF (iPLA2η; PNPLA4)等6種亞型，大部分可以水解脂肪?；蜃儺愋∈竽Ｐ褪谷藗儗?duì)iPLA2家族在脂質(zhì)代謝和能量穩(wěn)態(tài)方面有了進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)，各iPLA2在動(dòng)物疾病中也發(fā)揮著不可或缺的作用。

當(dāng)前iPLA2的研究主要集中于iPLA2β。iPLA2β是一種Ca2+非依賴型酶催化劑，它一直被認(rèn)為在磷脂重建、細(xì)胞增殖、遷移等過(guò)程中起著重要作用?，F(xiàn)在越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)iPLA2β在各種心血管疾病起著重要作用，如血管重構(gòu)、高血壓、心肌缺血、冠心病等[31]。

在轉(zhuǎn)基因模型小鼠中，Shu Liu等[32]觀察到Pla2g6-/-小鼠表現(xiàn)出動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Ca2+平衡失調(diào)癥狀，血管損傷的Pla2g6-/-小鼠由于COX-2途徑依賴的PGE2生成減少，平滑肌細(xì)胞遷移和增殖也相應(yīng)降低，所以抑制iPLA2β能減輕血管壁炎癥進(jìn)而預(yù)防心血管疾病。Lindsay E等[33]進(jìn)一步在iPLA2β-Tg小鼠研究中表明iPLA2β在血管平滑肌中超表達(dá)，通過(guò)12/15-LOX和c-Jun途徑惡化Ang-II誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞肥大、血管重構(gòu)和高血壓等生理病理過(guò)程。PKC能介導(dǎo)iPLA2β上調(diào)，進(jìn)而活化RhoA/Rho-kinase/CPI-17，導(dǎo)致糖尿病動(dòng)物的血管平滑肌細(xì)胞過(guò)度收縮，所以iPLA2β是血管細(xì)胞中血管收縮和放松、Ca2+平衡以及脂質(zhì)媒介合成的重要介質(zhì)。

另有研究[34]表明iPLA2β-Tg小鼠在心臟灌注致冠狀動(dòng)脈閉塞時(shí)會(huì)引起大量脂肪酸和LPC釋放到靜脈及缺血部位，從而在短時(shí)間內(nèi)局部缺血造成惡性心律失常。但是，當(dāng)對(duì)iPLA2β-Tg小鼠用BEL進(jìn)行心肌缺血預(yù)處理后，脂肪酸和LPC的積累消失，還能保護(hù)小鼠免于遭受快速心律失常。這些結(jié)果說(shuō)明心肌iPLA2β在心臟缺血時(shí)活化，通過(guò)介導(dǎo)膜磷脂水解在急性心肌缺血期間誘導(dǎo)致命的惡性心律不齊。

3 Lp-PLA2與AS在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的研究

血小板活化因子乙酰水解酶(platelet activating factor acetylhydrolase,PAF-AH)家族已經(jīng)有四種酶被鑒別出來(lái)，最被熟知的是分泌型脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)。其余三種均為胞內(nèi)蛋白質(zhì)，分別為II型PAF-AH(GVII PLA2)和I型PAF-AH(GVIII PLA2)，I型PAF-AH包括α1和α2兩個(gè)亞種[31]。Lp-PLA2是一種與AS發(fā)生機(jī)制密切相關(guān)的酶[35]，目前已被確立為預(yù)測(cè)AS發(fā)生的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因子。

Lp-PLA2和sPLA2都能水解脂蛋白產(chǎn)生脂質(zhì)介質(zhì)和修飾脂質(zhì)顆粒而在心血管疾病中發(fā)揮獨(dú)特的作用，但是它們各自的作用和潛在機(jī)制是明顯不同的。Lp-PLA2能水解PAF和氧化磷脂sn-2位置的酰基。在人類中，這個(gè)酶的主要部分結(jié)合于血漿LDL和HDL apoB100的C端，但是小鼠由于缺乏與之結(jié)合的關(guān)鍵性殘基，所以此酶與小鼠LDL無(wú)關(guān)。最初發(fā)現(xiàn)用PAF-AH預(yù)處理的小鼠能阻斷PAF誘導(dǎo)的哮喘，也能使動(dòng)物避免患敗血癥，因此它能水解有害的PAF從而對(duì)機(jī)體有保護(hù)作用。但是越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)，Lp-PLA2更是一種促炎因子。Lp-PLA2在LDL氧化過(guò)程中由于清除氧化磷脂(oxLDL)產(chǎn)生溶血卵磷脂(LPC)和氧化游離脂肪酸(oxFFA)兩種關(guān)鍵的促炎介質(zhì)[36]，引起單核細(xì)胞聚集，內(nèi)皮功能改變，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子表達(dá)，增加血小板源性生長(zhǎng)因子和表皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)，泡沫細(xì)胞形成，從而促進(jìn)AS形成。這兩種促炎介質(zhì)，尤其是LPC作為G蛋白偶聯(lián)受體G2A的調(diào)控者，能調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞的遷移、活化嗜中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞、吞噬清除凋亡細(xì)胞等，促進(jìn)動(dòng)脈斑塊進(jìn)一步發(fā)展，最后導(dǎo)致脂質(zhì)壞死核心形成。Lp-PLA2在壞死核心快凋亡巨噬細(xì)胞和易損斑塊纖維帽中高度表達(dá)，但不包括穩(wěn)定斑塊，因此Lp-PLA2水解物對(duì)斑塊穩(wěn)定性起著關(guān)鍵性作用。

在AS動(dòng)物模型的大量研究中發(fā)現(xiàn)豬是一種脂蛋白結(jié)構(gòu)最接近于人類的理想實(shí)驗(yàn)動(dòng)物[37]。糖尿病和高膽固醇血癥(DM-HC)豬模型中發(fā)現(xiàn)血清和斑塊中Lp-PLA2活性顯著增加，斑塊形成明顯，Lp-PLA2的基因表達(dá)量也相應(yīng)升高，伴隨MCP-1、MMP-9、組織蛋白酶S等炎癥基因的高度表達(dá)[38]。劉軍妮等[39]發(fā)現(xiàn)血管有易損斑塊的兔子血清中Lp-PLA2顯著升高，表明Lp-PLA2與斑塊的不穩(wěn)定性相關(guān)性好。大鼠給予LPS刺激時(shí)，Lp-PLA2在肝臟、肺、胸腺、脾、腎、腹膜巨嗜細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞以及循環(huán)白細(xì)胞中亦顯著增加[31]。但是，因?yàn)樾∈笾蠰p-PLA2與LDL無(wú)關(guān)，所以只能應(yīng)用轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行研究。ApoE-/-小鼠經(jīng)高脂誘導(dǎo)后，Lp-PLA2血漿含量顯著升高[40]。同樣，高脂誘導(dǎo)LDLR-/-小鼠形成AS，小鼠中血清Lp-PLA2活性及IL-6、hs-CRP和PAF等炎癥因子含量顯著升高[41]。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，Darapladib是Lp-PLA2的一種選擇性有效抑制劑，已進(jìn)行到III期臨床試驗(yàn)，它能有效抑制Lp-PLA2的活性和含量，因此對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)防和治療有積極作用[42]。Hui Zhang等[40]研究發(fā)現(xiàn)慢病毒介導(dǎo)的RNAi不僅能抑制Lp-PLA2活性，還能使動(dòng)物的斑塊面積更小以及斑塊穩(wěn)定性更高，因此RNAi可能是一種更有效的Lp-PLA2抑制劑。

4 總結(jié)

對(duì)PLA2的研究已有多年歷史，但其在體內(nèi)的功能作用還不是很清楚。通過(guò)對(duì)各相應(yīng)PLA2基因敲除或轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行研究，為人們了解哺乳動(dòng)物PLA2的生理功能提供了新的視角，目前關(guān)于PLA2在心血管疾病中的研究已成為熱點(diǎn)問(wèn)題。在血循環(huán)和動(dòng)脈壁中的PLA2與AS的形成均有關(guān)，是心血管事件的危險(xiǎn)因子。sPLA2和Lp-PLA2可作為預(yù)測(cè)AS發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)因子，cPLA2和iPLA2在AS形成過(guò)程中也起著非常重要的作用，因此PLA2在研究心血管疾病中有著廣泛的應(yīng)用前景。但PLA2調(diào)節(jié)血管炎癥及斑塊發(fā)展的確切體內(nèi)機(jī)制均有待進(jìn)一步探究。未來(lái)，將會(huì)在基因敲除或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中進(jìn)行更深入的研究以明確PLA2在心血管疾病中的作用，這也有助于開發(fā)以PLA2為靶標(biāo)的藥物從而有效治療動(dòng)脈粥樣硬化疾病。

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