針刺對(duì)心肺復(fù)蘇家兔腦組織Na+-K+-ATP酶的影響

路 晟，劉學(xué)政，劉新橋，李桂偉

(天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，天津 300193)

心肺復(fù)蘇成功后患者早期死亡的主要原因之一是腦組織再灌注損傷所致[1]。腦缺血及再灌注損傷是一個(gè)復(fù)雜的病理生理過(guò)程，缺血后再灌注損害是心跳驟停后腦損害的發(fā)病機(jī)制。因此，心肺復(fù)蘇期間，如何保護(hù)腦組織、改善腦組織代謝，對(duì)于提高復(fù)蘇后自主循環(huán)的存活率具有非常重要的意義。

在中樞神經(jīng)系統(tǒng),Na+-K+-ATPase對(duì)神經(jīng)元興奮性和傳導(dǎo)性的產(chǎn)生、維持及神經(jīng)遞質(zhì)的釋放、調(diào)節(jié)等諸多方面發(fā)揮著極其重要的作用。采取適當(dāng)?shù)拇胧┍Ｗo(hù)再灌注期間Na+-K+-ATPase活性對(duì)阻抑腦再灌注損傷的發(fā)生和發(fā)展有著重要的意義[2]。

針刺通過(guò)神經(jīng)體液因素參與調(diào)節(jié)腦血流，從而減輕因缺血而導(dǎo)致的神經(jīng)功能損害和使其功能恢復(fù)[3]。水溝穴、內(nèi)關(guān)穴是常用的急救要穴，在歷代文獻(xiàn)中有頗多用于急救復(fù)蘇的驗(yàn)例記載。早在唐代孫思邈《千金翼方》記載：水溝“治卒死無(wú)脈”。中醫(yī)理論認(rèn)為，水溝穴為督脈腧穴，系督脈與手陽(yáng)明大腸經(jīng)、足陽(yáng)明胃經(jīng)交會(huì)處，水溝穴有開(kāi)竅醒神的作用。內(nèi)關(guān)穴為手厥陰心包經(jīng)絡(luò)穴，又為八脈交會(huì)穴，通于陰維。內(nèi)關(guān)穴對(duì)于腦梗死具有特異性治療作用, 且針刺頻率對(duì)于其特異性治療作用有影響[4]。

1 材料與方法

健康成年普通級(jí)家兔30只，體質(zhì)量1.8～2.2 kg，雌雄各半。將30只動(dòng)物隨機(jī)分為3組：針刺復(fù)蘇組、常規(guī)復(fù)蘇組、假手術(shù)組，每組10只動(dòng)物。

參考陳蒙華等[5]的窒息型心臟驟停(cardiac arrest，CA)-心肺復(fù)蘇(cardiopulmonary resuscitation，CPR)模型。

針刺復(fù)蘇組：在心臟驟停后即刻給予針刺人中穴、內(nèi)關(guān)穴，取穴定位按華興邦的動(dòng)物穴位圖譜進(jìn)行。先針刺人中穴，施雀啄手法刺激10次左右；繼刺雙側(cè)內(nèi)關(guān)穴，采用捻轉(zhuǎn)提插瀉法持續(xù)手法操作1 min，2穴均留針10～15 min；其他處理同常規(guī)復(fù)蘇。常規(guī)復(fù)蘇組：于心臟驟停后即刻給予常規(guī)復(fù)蘇，不予針刺。假手術(shù)對(duì)照組：僅進(jìn)行氣管插管、動(dòng)靜脈置管等手術(shù)操作，不給予CA-CPR等處理。

1.1 觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法 于自主循環(huán)恢復(fù)120 min后快速開(kāi)顱、取左側(cè)腦組織分離出上一步實(shí)驗(yàn)需要部分后，將剩余左側(cè)顳葉皮質(zhì)部分0.3～0.5 g放入冰鹽水中洗凈血液，濾紙吸干稱重后剪碎，用超聲細(xì)胞粉碎機(jī)粉碎后置于含預(yù)冷勻漿介質(zhì)(PH7.5、0.25 mmol/L蔗糖，0.025 mmol/L Tris-HCl，0.1 μmol/L EDTA.Na2溶液)的容器中勻漿，勻漿后以3 000～4 000 r/min低溫離心15 min。取上清液，-30 ℃冷存?zhèn)錂z。

ATP酶活性的檢測(cè)采用定磷法。

2 結(jié)果

針刺水溝穴、內(nèi)關(guān)穴對(duì)窒息型心肺復(fù)蘇家兔腦組織Na+-K+-ATPase的影響見(jiàn)表1。剔除由于操作技術(shù)、延遲或不能復(fù)蘇的家兔4只，剩余26只，其中針刺復(fù)蘇組和常規(guī)復(fù)蘇組各8只，假手術(shù)對(duì)照組10只。

組 別nNa+?K+?ATPase值針刺復(fù)蘇組 81．68±0．50#△常規(guī)復(fù)蘇組 81．44±0．32 假手術(shù)對(duì)照組101．99±0．39

注：與常規(guī)復(fù)蘇組比較,#P<0.05；與假手術(shù)復(fù)蘇組比較,△P<0.05。

3 討論

當(dāng)腦缺血再灌注損傷后，由于能量代謝障礙，ATP耗竭，不能將Na+、Ca2+排出，將K+、Mg2+攝入，同時(shí)自由基大量產(chǎn)生，破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，細(xì)胞膜通透性增加，Ca2+、Na+大量流入細(xì)胞內(nèi)，Mg2+、K+大量溢出。Na+-K+-ATPase活性改變可導(dǎo)致腦細(xì)胞內(nèi)Na+增多, 滲透壓升高，造成神經(jīng)元的急性腫脹、變性和壞死，是再灌注早期腦水腫形成的原因之一[5];亦可致使Ca2+含量增高，可引起血管痙攣、血流量減少，腦細(xì)胞壞死[6]。

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)觀察，證明針刺可以提高腦組織的Na+-K+-ATPase活性,從而抑制了缺血再灌注區(qū)能量衰竭，維持細(xì)胞內(nèi)外離子穩(wěn)態(tài)及膜內(nèi)外的滲透壓平衡，對(duì)缺血再灌注區(qū)腦組織起到保護(hù)作用。

[1]樊尋梅.心肺復(fù)蘇的最新進(jìn)展—第六屆WOLFCREEK會(huì)議紀(jì)要[J].中華急診醫(yī)學(xué)雜志,2001(10):404-405.

[2]徐運(yùn),張博生.缺血-再灌注鼠腦Ca2+ATP酶活性和腦含水量的變化及中藥的影響[J].臨床神經(jīng)病學(xué)雜志,1997,10 (4):198.

[3]孫會(huì)芳.針刺對(duì)缺血性腦血管病腦血流量的影響[J].吉林中醫(yī)藥,2013,33(3):506-507.

[4]張超,樊小農(nóng),孟智宏,等.同時(shí)間不同頻率針刺內(nèi)關(guān)穴對(duì)MCAO大鼠腦血流量及神經(jīng)行為學(xué)的影響[J].吉林中醫(yī)藥,2012,32(5):487-489.

[5]陳蒙華.小動(dòng)物心臟驟停模型研制及影響復(fù)蘇療效相關(guān)因素的研究[D].廣西:廣西醫(yī)科大學(xué),2006.

[6]Schwartz JP,Mrsulja BB,Mrsulja BJ,et al.Alteration of cyclic neucleatide related enzymes and ATPase during uni-lateral ischemia and recirculation in gerbil cerebral cortex[J].J Nerrochem,1976(27):101-106.