芪藶強心膠囊對阿霉素所致心力衰竭大鼠氧化損傷的影響

錢玉紅，李爭，王敏，范志媛，張淋淋，史俊玲

芪藶強心膠囊對阿霉素所致心力衰竭大鼠氧化損傷的影響

錢玉紅，李爭，王敏，范志媛，張淋淋，史俊玲

目的觀察芪藶強心膠囊對慢性心力衰竭(CHF)模型大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的影響。方法Wistar大鼠40只，隨機抽取8只作為健康對照組，其余大鼠用多次間斷腹腔注射阿霉素(ADR)的方法來建立大鼠CHF模型。造模成功后，隨機分為模型組和芪藶強心膠囊組(0.6 g·kg-1·d-1)，每組15只，健康對照組和模型組灌胃等容積的蒸餾水。4周后，各組大鼠稱質(zhì)量，取心臟稱質(zhì)量，計算心臟指數(shù)，腹主動脈取血測MDA、SOD水平及血清腦鈉肽(BNP)水平。結(jié)果與健康對照組比較，模型組大鼠心臟指數(shù)[(3.76±0.22)g/kg vs. (2.69±0.25)g/kg]、BNP[(657±59)pg/ml vs. (203±31) pg/ml]水平均明顯升高(P<0.05)，而芪藶強心膠囊組分別為(3.18±0.15)g/kg 和(554±43)pg/ml，均明顯低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與健康對照組比較，模型組血清SOD水平明顯下降[(113.33±10.78)U/ml vs. (197.67±12.93) U/ml]，MDA水平明顯升高[(18.72±1.79 ) nmol/ml vs. (7.73±1.53) nmol/ml],差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而芪藶強心膠囊組SOD水平(151.17±12.19)U/ml明顯高于模型組，MDA水平(14.61±1.27)nmol/ml明顯低于模型組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論芪藶強心膠囊對慢性心力衰竭大鼠氧化損傷有治療作用，其作用機制可能與清除氧自由基，抗脂質(zhì)過氧化有關(guān)。

芪藶強心膠囊；心力衰竭，慢性；阿霉素；大鼠

慢性心力衰竭(chronic heart failure, CHF)是各種心臟疾病導(dǎo)致心功能不全的一種綜合征，是臨床上心血管系統(tǒng)的常見病，是許多心臟疾病患者最終歸宿，患者的預(yù)后一般比較差[1]。近年來，CHF的發(fā)病率在顯著持續(xù)增加，嚴(yán)重威脅著人類的健康。芪藶強心膠囊是臨床上常用的治療CHF的中成藥，臨床療效顯著[2，3]。其可有效改善冠心病舒張性心力衰竭患者的臨床癥狀，提高患者生活質(zhì)量，還可以降低CHF患者體內(nèi)TNF-α、IL-6、hs-CRP水平。本實驗用大鼠腹腔注射阿霉素(ADR)的方法，建立大鼠CHF模型，觀察芪藶強心膠囊對大鼠CHF模型血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA) 血清腦鈉肽(BNP)水平的影響。1材料與方法

1.1 材料 實驗動物： 健康Wistar大鼠40只(北京華阜康生物技術(shù)有限公司，合格證號SCXK2011 0004)，體質(zhì)量(200±20)g，均在河北聯(lián)合大學(xué)實驗動物中心SPF級動物實驗室內(nèi)進(jìn)行飼養(yǎng)。室溫20～26℃，相對濕度40%～60%，通風(fēng)良好，晝夜明暗交替時間12 h。自由攝食、飲水，每2天更換墊料。實驗藥物：ADR由浙江海正藥業(yè)提供；芪藶強心膠囊由石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司提供。儀器：高壓滅菌器(上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠生產(chǎn))； DK-600B型電熱恒溫水槽(上海森信實驗儀器有限公司生產(chǎn))；半自動生化分析儀(RT-9000, Rayto)等。試劑：MDA試劑盒、SOD試劑盒、BNP試劑盒(南京建成科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 大鼠模型建立與分組： Wistar大鼠40只適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d，隨機抽取8只作為健康對照組，其余大鼠腹腔注射ADR，ADR用生理鹽水配制成2 mg/ml液體，4 mg/kg腹腔注射，每周1次，連續(xù)6周，累積總量達(dá)24 mg/kg，復(fù)制心力衰竭模型[4]。健康對照組注射等容積的生理鹽水。以大鼠出現(xiàn)CHF臨床表現(xiàn)如精神不振，活動減少，食欲減退，氣喘痰鳴，唇舌青紫，四肢皮下水腫等為造模成功。2只大鼠造模不成功，已剔除。將造模成功的30只大鼠隨機分為2組：模型組和芪藶強心膠囊組，每組15只。

1.2.2 給藥方法： 芪藶強心膠囊組大鼠予芪藶強心膠囊0.6 g·kg-1·d-1，藥物以蒸餾水稀釋至所需濃度，給藥容積為10 ml/kg，給藥途徑為灌胃給藥。健康對照組和模型組灌胃等容積的生理鹽水10 ml/kg，4周后檢測指標(biāo)。在實驗期間各組大鼠均常規(guī)喂食，自由取食，清潔水喂養(yǎng)。

1.3 檢測指標(biāo) (1)實驗結(jié)束時，3組實驗大鼠稱體質(zhì)量，用0.5～0.8 ml水合氯醛腹腔內(nèi)注射麻醉，仰臥于操作臺上并固定。取心臟，濾紙吸干水分，稱質(zhì)量，測心臟指數(shù)，心臟指數(shù)= 心臟質(zhì)量(mg)/體質(zhì)量(g)。(2)ELISA法檢測BNP水平，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。(3)大鼠腹主動脈取血5 ml，于4℃,3 000 r/min離心10 min，取上清，用黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分別測定大鼠血清中MDA、SOD水平。

2 結(jié) 果

2.1 心臟指數(shù)、BNP變化 有取材不成功的剔除，最終每組取7只大鼠。與健康對照組比較，模型組大鼠心臟指數(shù)、BNP均明顯升高(P<0.05)，而芪藶強心膠囊組低于模型組(P<0.05)。說明芪藶強心膠囊能降低CHF大鼠心臟指數(shù)、BNP。見表1。

表1 各組大鼠心臟指數(shù)和BNP比較

注：與健康對照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.2 血清SOD、MDA變化 與健康對照組比較，模型組大鼠血清中SOD水平明顯降低，MDA水平明顯升高，芪藶強心膠囊組SOD水平明顯高于模型組、MDA水平明顯低于模型組(P均<0.05)。見表2。

表2 各組大鼠血清MDA、SOD水平

注：與健康對照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

3 討 論

ADR是一種有效的蒽環(huán)類廣譜抗腫瘤化療藥物，對白血病、淋巴瘤等多種腫瘤的化療效果良好，但它具有嚴(yán)重的心臟毒性。長期大劑量使用會引起中毒性心肌炎、心肌病，甚至?xí)霈F(xiàn)嚴(yán)重的心力衰竭[5]。腹腔注射一定劑量的ADR可明顯損害心臟的功能,可成功建立大鼠慢性心力衰竭模型[6]。

本研究結(jié)果顯示，模型組大鼠心臟指數(shù)明顯升高，SOD水平降低，MDA、BNP升高，與健康對照組比較差異顯著(P<0.05)，說明成功建立了大鼠CHF模型。芪藶強心膠囊組大鼠心臟指數(shù)、MDA及BNP水平低于模型組，而SOD含量高于模型組(P<0.05)，表明芪藶強心膠囊能降低大鼠心臟指數(shù)及MDA、BNP含量，提高SOD活性。

MDA 為心肌細(xì)胞脂質(zhì)過氧化過程中產(chǎn)生的醛類物質(zhì)，通過檢測MDA 的含量可以反映脂質(zhì)過氧化的程度,而脂質(zhì)過氧化是氧自由基造成組織細(xì)胞損傷的主要途徑一[7]。SOD是機體主要抗氧化酶，是清除細(xì)胞內(nèi)自由基、保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激損傷的關(guān)鍵酶之一，SOD活性的高低是衡量機體抗氧化能力大小的重要因素[8]，BNP可通過鳥苷酸環(huán)化酶促進(jìn)血管擴張和尿鈉排泄，具有反向調(diào)節(jié)交感神經(jīng)系統(tǒng)和腎素—血管緊張素—醛固酮系統(tǒng)的作用，在CHF代償過程中發(fā)揮重要作用，且BNP在早期CHF患者血漿中的含量就已增加，因此可將BNP作為診斷CHF的一個敏感指標(biāo)[9]。

研究表明，芪藶強心膠囊可明顯改善心力衰竭患者的臨床癥狀，增加運動耐量，無明顯不良反應(yīng)[10]，還能改善慢性舒張性心力衰竭患者的心臟舒張功能[11]。本研究對大鼠血清中MDA和SOD的檢測結(jié)果表明芪藶強心膠囊可以提高心肌組織的抗氧化能力。

綜上所述，芪藶強心膠囊對ADR誘導(dǎo)的心力衰竭有治療作用，其作用機制可能與清除氧自由基、抗脂質(zhì)過氧化有關(guān)。

1 張杰.芪藶強心膠囊對慢性心力衰竭患者醛固酮水平和心功能的干預(yù)作用[J].中國老年學(xué)雜志,2013,33(5):2157-2159.

2 甄利波,田祥.芪藶強心膠囊輔治冠心病舒張性心力衰竭效果觀察[J].臨床合理用藥,2013,6(9):82-83.

3 錢玉紅,李爭,魏國清，等.芪藶強心膠囊輔治對慢性心力衰竭患者血清細(xì)胞因子的影響[J].疑難病雜志,2013,12(4):264-266.

4 李玉玲,楊建業(yè),唐俊明,等.阿霉素誘導(dǎo)大鼠心衰模型不同方案的比較[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2006,16(2):93-96.

5 滕麗莉,趙蔭濤,邵莉，等.魚油對阿霉素誘導(dǎo)慢性心力衰竭大鼠心肌結(jié)構(gòu)和細(xì)胞因子的影響[J].中國老年學(xué)雜志,2013,3(5):1083-1085.

6 楊建業(yè),張迎春,唐俊明,等.阿霉素誘導(dǎo)大鼠心衰模型的建立[J].鄖陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2005,24(5):269-271.

7 王睿,徐長慶,王偉.丹參注射液對阿霉素所致心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2007,28(1):16-18.

8 李俊,廖雪珍,廖惠芳,等.暖心膠囊對阿霉素誘導(dǎo)大鼠心衰模型的實驗研究[J].中藥新藥與臨床藥理,2009,20(1):24-26.

9 Clerico A, Fontana M, Ripoli A, et al.Clinical relevance of BNP measurement in the follow-up of patients with chronic heart failure[J].Adv Clin Chem,2009,48:163-179.

10 權(quán)曉慧,李毓杰.芪藶強心膠囊聯(lián)合輔酶Q10佐治慢性心力衰竭的臨床觀察[J].疑難病雜志,2014,13(1):77-79.

11 李彥霞,賈振華,張鑫月.芪藶強心膠囊對慢性舒張性心力衰竭患者心臟舒張功能的影響[J]. 疑難病雜志,2014,12(4):261-263.

ExperimentalstudyofQiliqiangxincapsuleagainstadriamycininducedoxidativedamageinratswithheartfailure

QIANYuhong,LIZheng,WANGMin,FANZhiyuan,ZHANGLinlin,SHIJunling.

DepartmentofCardiology,HebeiUnitedUniversityAffiliatedTangshanHospitalofTraditionalChineseMedicine,Tangshan063000,China

ObjectiveTo observeQiliqiangxincapsule on chronic heart failure rat model serum level of superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA).MethodsForty Wistar rats were randomly selected 8 as healthy control group, the other rats by using several intermittent intraperitoneal injection of adriamycin (ADR) method to establish a rat model of CHF. After the success of modeling, they were randomly divided into model group andQiliqiangxincapsule group (0.6 g·kg-1·d-1) with 15 rats in each group, health control group and model group were administered with iso-volume of distilled water. After 4 weeks, the rats weight and heart mass were recorded, cardiac index, abdominal aortic blood MDA, SOD levels and serum brain natriuretic peptide levels of BNP were measured and recorded.ResultsCompared to the control group, cardiac index of the rats in the model group [(3.76 ± 0.22) g/kg vs. (2.69 ± 0.25) g/kg], BNP [(657±59) pg/ml vs. (203±31) pg/ml] levels were significantly elevated (P<0.05), andQiliqiangxincapsule group were (3.18 ± 0.15) g/kg and (554 ± 43) pg/ml, were significantly lower than those in the model group, the difference was statistically significant (P<0.05). Compared with the healthy control group, levels of serum SOD model group decreased significantly [(113.33 ± 10.78) U/ml vs. (197.67 ± 12.93) U/ml], MDA levels were significantly higher [(18.72 ± 1.79 )nmol/ml vs. (7.73 ± 1.53) nmol/ml], the difference was statistically significant (P<0.05) andQiliqiangxincapsule group SOD (151.17 ± 12.19) U/ml was significantly higher than the model group, the levels of MDA (14.61 ± 1.27) nmol/ml was significantly lower than that in the model group, the differences were statistically significant (P<0.05).ConclusionQiliqiangxincapsule has a therapeutic effect on chronic heart failure rats. The mechanism may be related to scavenging oxygen free radicals and inhibiting lipid per oxidation.

Qiliqiangxincapsule; Heart failure,chronic ; Adriamycin; Rats

2013年度河北省唐山市科技計劃項目(No.13130282b)

063000 河北聯(lián)合大學(xué)附屬唐山市中醫(yī)醫(yī)院心內(nèi)科

10.3969/j.issn.1671-6450.2014.06.025

2014-03-11)