四項(xiàng)免疫組化標(biāo)志物在診斷甲狀腺乳頭狀癌中的臨床意義

李天一等

摘 要 目的：探討Ki67核抗原

關(guān)鍵詞 甲狀腺乳頭狀癌 Ki67核抗原 甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1 人表皮生長因子受體-2 人骨髓上皮細(xì)胞-1

中圖分類號：R736.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號：1006-1533（2014）10-0024-04

ABSTRACT Objective： To investigate the clinical value of differentiation of the papillary thyroid carcinoma （PTC） from the benign thyroid nodules with Ki67 nuclear antigen （Ki67）， thyroid transcription factor-l （TTF-1）， human epidermal growth factor receptor type-2 （HER-2/neu）， and human bone marrow endothelial cell-1（HBME-1）. Methods： The parafin sections of 180 cases with PTC and 190 cases with the benign thyroid nodules were retrospectively analyzed. The levels of Ki67， TTF-1， HBME-1 and HER-2/neu were determined immunohistochemically. Results： The positive rates of the expressions of 4 markers were higher in PTC specimens than in the benign thyroid nodules specimens （P=0.000）. When using a single marker， the detection of HER-2/neu had the most sensitivity （79.4%） and that of HBME-1 the most specificity （96.8%）. The detection combined with Ki67， HER-2/neu and HBME-1 had the most sensitivity （89.8%）. The detection combined with HER-2/neu+ TTF-1 and HER-2/neu+TTF-1+HBME-1 had the same specificity （99.4%， P<0.01）. Conclusions： When combining Ki67 and TTF-1 with HER-2/neu or HBME-1， the sensitivity and specificity in the single indicator determination can be increased obviously in the diagnosis of PTC.

KEY WORDS papillary thyroid carcinoma； Ki67 nuclear antigen； thyroid transcription factor-l； human epidermal growth factor receptor type-2； human bone marrow endothelial cell-1

甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid carcinoma， PTC）是最常見的甲狀腺惡性腫瘤，其發(fā)病率在近年呈明顯上升趨勢。耶魯大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究表明，從2001年到2008年，美國PTC的發(fā)病率增加了60.8%[1]。PTC細(xì)胞組織學(xué)的病理診斷主要基于鏡下觀察，除了那些缺少典型鏡下特征的病例，大部分PTC能容易確診[2]。免疫組化標(biāo)志物有助于鑒別PTC和甲狀腺良性腫瘤。已有研究表明，對組織細(xì)胞學(xué)標(biāo)本行不同細(xì)胞角蛋白的免疫組化染色，可作為PTC診斷的輔助技術(shù)[2]。但是，對以提高PTC診斷準(zhǔn)確性為目的的多種標(biāo)志物聯(lián)合檢測方法，目前尚存在爭論。Nga等[3]研究認(rèn)為，在PTC細(xì)胞學(xué)診斷中，聯(lián)合應(yīng)用人骨髓內(nèi)皮細(xì)胞-1（human bone marrow endothelial cell-1， HBME-1）和細(xì)胞角蛋白19（cytokeratin-19， CK-19）的敏感性和特異性均為100.0%，但另有研究表明，聯(lián)合應(yīng)用兩者的敏感性和特異性則分別低至62.0%和95.0%。

本研究采用免疫組化法，分析Ki67核抗原（Ki67 nuclear antigen， Ki67）、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1（thyroid transcription factor-l，TTF-1）、人表皮生長因子受體-2（human epidermal growth factor receptor type-2， HER-2/neu）和HBME-1在PTC以及良性甲狀腺結(jié)節(jié)標(biāo)本中的表達(dá)水平，研究4種蛋白在PTC鑒別診斷中的意義。

材料與方法

方法

所有標(biāo)本均經(jīng)甲醛固定，常規(guī)乙醇脫水和石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片，行HE染色，均由2名病理醫(yī)生雙盲獨(dú)立評估。臨床資料完整，術(shù)前未經(jīng)任何處理，按甲狀腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)行病理分類。

免疫組化染色采用S-P法，4 μm厚連續(xù)切片，按試劑盒說明書操作。所選Ki67、TTF-1、HBME-1和HER-2/neu抗體均為鼠抗人單克隆抗體，所有抗體、S-P試劑盒及顯色劑購自上海長島生物技術(shù)公司。使用Olympus BX51T光學(xué)顯微鏡，在100和400倍下觀察和拍照。Ki67以細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒判定為陽性，TTF-1染色定位于細(xì)胞核，HER-2/neu定位于細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜。Ki67、 TTF-1、HBME-1和HER-2/neu陽性的PTC標(biāo)本由華山醫(yī)院病理科提供，用于免疫組化染色的陽性對照，以PBS代替一抗為陰性對照。隨機(jī)選取每張切片的10個(gè)高倍視野，行陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)，采用半定量分析法計(jì)算細(xì)胞陽性率。計(jì)算Ki67標(biāo)記指數(shù)，每張切片取10個(gè)高倍視野，觀察陽性細(xì)胞并計(jì)數(shù)討論

準(zhǔn)確的甲狀腺癌診斷對于積極的臨床治療至關(guān)重要。目前對于甲狀腺疾病，尤其是PTC診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是組織學(xué)檢查。診斷PTC是依據(jù)顯微鏡下見到典型的核形態(tài)，具體表現(xiàn)是與正常濾泡上皮細(xì)胞或其他甲狀腺疾病相比，PTC的細(xì)胞密集、彼此交叉重疊、呈卵圓型的較大細(xì)胞核，或呈毛玻璃狀細(xì)胞核。細(xì)胞核中染色質(zhì)較少，或缺少核仁。此外核溝的存在也是PTC細(xì)胞核形態(tài)的主要特征。通過鏡下檢查，大部分PTC診斷可以明確。對于一些組織學(xué)診斷有困難的病例，免疫組化分析和分子技術(shù)等具有重要的輔助意義。

免疫組化分析中的Ki67蛋白是人類增生細(xì)胞核中普遍存在的標(biāo)志性抗原。核蛋白由相對分子質(zhì)量345 000和395 000兩條多肽鏈組成，其基因定位于10號染色體。Ki67與腫瘤分化程度、浸潤指標(biāo)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)[6]，是評估細(xì)胞增殖的指標(biāo)。Ki67在G0期和G1早期不表達(dá)，在G1晚期出現(xiàn)，S、G2和M期持續(xù)存在。隨著細(xì)胞周期的進(jìn)展，抗原表達(dá)逐漸增加，至G2期和M期漸達(dá)高峰，反映了細(xì)胞增殖活性。Ki67與腫瘤細(xì)胞的合成代謝有關(guān)，其檢測能較客觀地反映腫瘤的性質(zhì)，多用于判斷腫瘤的良、惡性及惡性程度，也用于探討細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞周期、腫瘤的生長方式、浸潤方式、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為，以及與預(yù)后的關(guān)系。目前的臨床資料表明，Ki67增值指數(shù)高低與腫瘤的分化程度、浸潤轉(zhuǎn)移以及預(yù)后密切相關(guān)，所以是腫瘤診斷和預(yù)后中的重要標(biāo)志物。楊玉清等[4]對63例PTC的研究發(fā)現(xiàn)，26例為Ki67陽性表達(dá)，37例為陰性表達(dá)，陽性表達(dá)率為41.0%，40例良性病變均為陰性，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究發(fā)現(xiàn)，Ki67在180例PTC中的陽性率為62.2%，在190例良性病變中，25.3%呈陽性或弱陽性表現(xiàn)，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

TTF-1也稱為甲狀腺特異增強(qiáng)子結(jié)合蛋白，是NKX基因家族中的同源轉(zhuǎn)錄因子之一，由NKX2.1基因所編碼，位于人類14q13。TTF-1常在甲狀腺濾泡細(xì)胞、濾泡旁C細(xì)胞中表達(dá)，是一種器官特異性的轉(zhuǎn)錄因子[5]，其在甲狀腺、肺、間腦的器官形成及甲狀腺球蛋白、甲狀腺過氧化物酶等蛋白的形成過程中起重要作用。研究表明，TTF-1在濾泡細(xì)胞衍生的腫瘤，濾泡性腺瘤、PTC、濾泡癌中陽性表達(dá)率高達(dá)83%～100%[6]。未分化癌的陽性表達(dá)率較低，為0～25%，均呈灶性表達(dá)。在本研究4種蛋白標(biāo)志物中，TTF-1對診斷PTC具有較高的特異性（94.3%），僅很少良性結(jié)節(jié)出現(xiàn)TTF-1弱陽性。TTF-1在PTC和良性結(jié)節(jié)中的陽性率分別為55.6%和3.2%，其對PTC診斷的敏感性低于其他3種標(biāo)志物。

是細(xì)胞癌基因之一，其編碼產(chǎn)物與表皮生長因子受體50%同源，主要參與細(xì)胞的分裂和生長，且屬于酪氨酸激酶受體家族。HER-2/neu于胚胎發(fā)育期開始表達(dá)，成年后的正常組織中僅可檢測到少量HER-2/neu基因。正常情況下，該基因處于非激活狀態(tài)。HBME-1是間皮細(xì)胞表面微絨毛的一種抗原，為酸性氨基酸多聚糖蛋白，主要成份為透明質(zhì)酸，已用于內(nèi)皮細(xì)胞來源腫瘤的診斷。有學(xué)者認(rèn)為HBME-1是PTC較好的標(biāo)志。黃堃等[8]發(fā)現(xiàn)HBME-1表達(dá)陽性率在45例甲狀腺惡性腫瘤中為88.9%，而在86例甲狀腺良性病變中則為12.8%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究發(fā)現(xiàn)，HBME-1在PTC中的陽性率為77.8%，但在甲狀腺良性結(jié)節(jié)中的陽性率僅為5.3%，對于PTC診斷具有較高的特異性（94.7%）。

聯(lián)合檢測多種指標(biāo)對于提高PTC診斷的準(zhǔn)確性始終存在爭議，文獻(xiàn)報(bào)道HBME-1、CK19、galectin-3等指標(biāo)聯(lián)合檢測診斷PTC具有敏感性和特異性高的意義，但對于Ki67、TTF-1與其他標(biāo)志物聯(lián)合檢測的報(bào)道少見。本研究發(fā)現(xiàn)，在4種蛋白標(biāo)志物中，聯(lián)合檢測Ki67和TTF-1以及HER-2/neu和HBME-1對診斷PTC的敏感性未見明顯提高。然而，Ki67、TTF-1分別與HER-2/neu或HBME-1聯(lián)合、，對診斷PTC的敏感性和特異性明顯提高（P<0.01）。Ki67、HER-2/neu和HBME-1的3者聯(lián)合檢測具有最高的敏感性（89.8%），其次為Ki67、HER-2/neu、HBME-1和TTF-1的聯(lián)合檢測，敏感性為88.3%。HER-2/neu、HBME-1和TTF-1的聯(lián)合檢測以及HER-2/neu和TTF-1的聯(lián)合檢測具有最高的特異性（99.4%）。

綜上所述，Ki67和TTF-1標(biāo)志物在聯(lián)合HER-2/neu或（和）HBME-1檢測時(shí)，與檢測4者中單項(xiàng)指標(biāo)相比，可顯著提高診斷敏感性和特異性，所以在檢測Ki67和TTF-1時(shí)，若聯(lián)合其他標(biāo)志物共同檢測可提高對PTC診斷的準(zhǔn)確度，而僅HER-2/neu與HBME-1的聯(lián)合檢驗(yàn)，對于提高PTC診斷的準(zhǔn)確率意義不大。

參考文獻(xiàn)

Kazaure HS， Roman SA， Sosa JA. Aggressive variants of papillary thyroid cancer： incidence， characteristics and predictors of survival among 43，738 patients[J]. Ann Surg Oncol， 2012， 19（6）： 1874-1880.

Papale F， Cafiero G， Grimaldi A， et al. Galectin-3 expression in thyroid fine needle cytology （t-FNAC） uncertain cases： validation of molecular markers and technology innovation[J]. J Cell Physiol， 2013， 228（5）： 968-974.

Nga ME， Lim GS， Soh CH， et al. HBME-1 and CK19 are highly discriminatory in the cytological diagnosis of papillary thyroid carcinoma[J]. Diagn Cytopathol， 2008， 36（8）： 550-556.

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黃堃， 龔衛(wèi)東， 王南鵬， 等. galectin-3， HBME-1， CK19 及 RET 在甲狀腺腫瘤中的表達(dá)情況及其臨床價(jià)值[J]. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志， 2013， 20（2）： 156-160.

（收稿日期：2014-03-25）

準(zhǔn)確的甲狀腺癌診斷對于積極的臨床治療至關(guān)重要。目前對于甲狀腺疾病，尤其是PTC診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是組織學(xué)檢查。診斷PTC是依據(jù)顯微鏡下見到典型的核形態(tài)，具體表現(xiàn)是與正常濾泡上皮細(xì)胞或其他甲狀腺疾病相比，PTC的細(xì)胞密集、彼此交叉重疊、呈卵圓型的較大細(xì)胞核，或呈毛玻璃狀細(xì)胞核。細(xì)胞核中染色質(zhì)較少，或缺少核仁。此外核溝的存在也是PTC細(xì)胞核形態(tài)的主要特征。通過鏡下檢查，大部分PTC診斷可以明確。對于一些組織學(xué)診斷有困難的病例，免疫組化分析和分子技術(shù)等具有重要的輔助意義。

免疫組化分析中的Ki67蛋白是人類增生細(xì)胞核中普遍存在的標(biāo)志性抗原。核蛋白由相對分子質(zhì)量345 000和395 000兩條多肽鏈組成，其基因定位于10號染色體。Ki67與腫瘤分化程度、浸潤指標(biāo)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)[6]，是評估細(xì)胞增殖的指標(biāo)。Ki67在G0期和G1早期不表達(dá)，在G1晚期出現(xiàn)，S、G2和M期持續(xù)存在。隨著細(xì)胞周期的進(jìn)展，抗原表達(dá)逐漸增加，至G2期和M期漸達(dá)高峰，反映了細(xì)胞增殖活性。Ki67與腫瘤細(xì)胞的合成代謝有關(guān)，其檢測能較客觀地反映腫瘤的性質(zhì)，多用于判斷腫瘤的良、惡性及惡性程度，也用于探討細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞周期、腫瘤的生長方式、浸潤方式、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為，以及與預(yù)后的關(guān)系。目前的臨床資料表明，Ki67增值指數(shù)高低與腫瘤的分化程度、浸潤轉(zhuǎn)移以及預(yù)后密切相關(guān)，所以是腫瘤診斷和預(yù)后中的重要標(biāo)志物。楊玉清等[4]對63例PTC的研究發(fā)現(xiàn)，26例為Ki67陽性表達(dá)，37例為陰性表達(dá)，陽性表達(dá)率為41.0%，40例良性病變均為陰性，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究發(fā)現(xiàn)，Ki67在180例PTC中的陽性率為62.2%，在190例良性病變中，25.3%呈陽性或弱陽性表現(xiàn)，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

TTF-1也稱為甲狀腺特異增強(qiáng)子結(jié)合蛋白，是NKX基因家族中的同源轉(zhuǎn)錄因子之一，由NKX2.1基因所編碼，位于人類14q13。TTF-1常在甲狀腺濾泡細(xì)胞、濾泡旁C細(xì)胞中表達(dá)，是一種器官特異性的轉(zhuǎn)錄因子[5]，其在甲狀腺、肺、間腦的器官形成及甲狀腺球蛋白、甲狀腺過氧化物酶等蛋白的形成過程中起重要作用。研究表明，TTF-1在濾泡細(xì)胞衍生的腫瘤，濾泡性腺瘤、PTC、濾泡癌中陽性表達(dá)率高達(dá)83%～100%[6]。未分化癌的陽性表達(dá)率較低，為0～25%，均呈灶性表達(dá)。在本研究4種蛋白標(biāo)志物中，TTF-1對診斷PTC具有較高的特異性（94.3%），僅很少良性結(jié)節(jié)出現(xiàn)TTF-1弱陽性。TTF-1在PTC和良性結(jié)節(jié)中的陽性率分別為55.6%和3.2%，其對PTC診斷的敏感性低于其他3種標(biāo)志物。

是細(xì)胞癌基因之一，其編碼產(chǎn)物與表皮生長因子受體50%同源，主要參與細(xì)胞的分裂和生長，且屬于酪氨酸激酶受體家族。HER-2/neu于胚胎發(fā)育期開始表達(dá)，成年后的正常組織中僅可檢測到少量HER-2/neu基因。正常情況下，該基因處于非激活狀態(tài)。HBME-1是間皮細(xì)胞表面微絨毛的一種抗原，為酸性氨基酸多聚糖蛋白，主要成份為透明質(zhì)酸，已用于內(nèi)皮細(xì)胞來源腫瘤的診斷。有學(xué)者認(rèn)為HBME-1是PTC較好的標(biāo)志。黃堃等[8]發(fā)現(xiàn)HBME-1表達(dá)陽性率在45例甲狀腺惡性腫瘤中為88.9%，而在86例甲狀腺良性病變中則為12.8%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究發(fā)現(xiàn)，HBME-1在PTC中的陽性率為77.8%，但在甲狀腺良性結(jié)節(jié)中的陽性率僅為5.3%，對于PTC診斷具有較高的特異性（94.7%）。

聯(lián)合檢測多種指標(biāo)對于提高PTC診斷的準(zhǔn)確性始終存在爭議，文獻(xiàn)報(bào)道HBME-1、CK19、galectin-3等指標(biāo)聯(lián)合檢測診斷PTC具有敏感性和特異性高的意義，但對于Ki67、TTF-1與其他標(biāo)志物聯(lián)合檢測的報(bào)道少見。本研究發(fā)現(xiàn)，在4種蛋白標(biāo)志物中，聯(lián)合檢測Ki67和TTF-1以及HER-2/neu和HBME-1對診斷PTC的敏感性未見明顯提高。然而，Ki67、TTF-1分別與HER-2/neu或HBME-1聯(lián)合、，對診斷PTC的敏感性和特異性明顯提高（P<0.01）。Ki67、HER-2/neu和HBME-1的3者聯(lián)合檢測具有最高的敏感性（89.8%），其次為Ki67、HER-2/neu、HBME-1和TTF-1的聯(lián)合檢測，敏感性為88.3%。HER-2/neu、HBME-1和TTF-1的聯(lián)合檢測以及HER-2/neu和TTF-1的聯(lián)合檢測具有最高的特異性（99.4%）。

綜上所述，Ki67和TTF-1標(biāo)志物在聯(lián)合HER-2/neu或（和）HBME-1檢測時(shí)，與檢測4者中單項(xiàng)指標(biāo)相比，可顯著提高診斷敏感性和特異性，所以在檢測Ki67和TTF-1時(shí)，若聯(lián)合其他標(biāo)志物共同檢測可提高對PTC診斷的準(zhǔn)確度，而僅HER-2/neu與HBME-1的聯(lián)合檢驗(yàn)，對于提高PTC診斷的準(zhǔn)確率意義不大。

參考文獻(xiàn)

Kazaure HS， Roman SA， Sosa JA. Aggressive variants of papillary thyroid cancer： incidence， characteristics and predictors of survival among 43，738 patients[J]. Ann Surg Oncol， 2012， 19（6）： 1874-1880.

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楊玉清， 姚宏. CK19 Galectin-3 HBME-1 S-100及Ki67在甲狀腺乳頭狀癌中表達(dá)的意義[J]. 中國藥物與臨床， 2012， 12（9）： 1144-1146.

Ordó?ez NG. Value of thyroid transcription factor-l immunostaining in tumor diagnosis：a review and update[J]. Appl Immunohistochem Mol Morphol， 2012， 20（5）： 429-444.

Tan A， Etit D， Bayol U， et a1. Comparison of proliferating cellnuclear antigen，thyroid transcription factor-l，Ki-67，o63，p53 and high-molecular weight cytokeratin expressions in papillary thyroid carcinoma，follicular carcinoma，and follicular adenoma[J]. Ann Diagn Pathol， 201l， 15（2）： 108-116.

Se?kin S， Karagece ?. Expression of CK-19， cErbB2， galectin-3， and p53 in papillary thyroid carcinomas[J]. Turk J Med Sci， 2010， 40（2）： 207-212.

黃堃， 龔衛(wèi)東， 王南鵬， 等. galectin-3， HBME-1， CK19 及 RET 在甲狀腺腫瘤中的表達(dá)情況及其臨床價(jià)值[J]. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志， 2013， 20（2）： 156-160.

（收稿日期：2014-03-25）

準(zhǔn)確的甲狀腺癌診斷對于積極的臨床治療至關(guān)重要。目前對于甲狀腺疾病，尤其是PTC診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是組織學(xué)檢查。診斷PTC是依據(jù)顯微鏡下見到典型的核形態(tài)，具體表現(xiàn)是與正常濾泡上皮細(xì)胞或其他甲狀腺疾病相比，PTC的細(xì)胞密集、彼此交叉重疊、呈卵圓型的較大細(xì)胞核，或呈毛玻璃狀細(xì)胞核。細(xì)胞核中染色質(zhì)較少，或缺少核仁。此外核溝的存在也是PTC細(xì)胞核形態(tài)的主要特征。通過鏡下檢查，大部分PTC診斷可以明確。對于一些組織學(xué)診斷有困難的病例，免疫組化分析和分子技術(shù)等具有重要的輔助意義。

免疫組化分析中的Ki67蛋白是人類增生細(xì)胞核中普遍存在的標(biāo)志性抗原。核蛋白由相對分子質(zhì)量345 000和395 000兩條多肽鏈組成，其基因定位于10號染色體。Ki67與腫瘤分化程度、浸潤指標(biāo)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)[6]，是評估細(xì)胞增殖的指標(biāo)。Ki67在G0期和G1早期不表達(dá)，在G1晚期出現(xiàn)，S、G2和M期持續(xù)存在。隨著細(xì)胞周期的進(jìn)展，抗原表達(dá)逐漸增加，至G2期和M期漸達(dá)高峰，反映了細(xì)胞增殖活性。Ki67與腫瘤細(xì)胞的合成代謝有關(guān)，其檢測能較客觀地反映腫瘤的性質(zhì)，多用于判斷腫瘤的良、惡性及惡性程度，也用于探討細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞周期、腫瘤的生長方式、浸潤方式、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為，以及與預(yù)后的關(guān)系。目前的臨床資料表明，Ki67增值指數(shù)高低與腫瘤的分化程度、浸潤轉(zhuǎn)移以及預(yù)后密切相關(guān)，所以是腫瘤診斷和預(yù)后中的重要標(biāo)志物。楊玉清等[4]對63例PTC的研究發(fā)現(xiàn)，26例為Ki67陽性表達(dá)，37例為陰性表達(dá)，陽性表達(dá)率為41.0%，40例良性病變均為陰性，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究發(fā)現(xiàn)，Ki67在180例PTC中的陽性率為62.2%，在190例良性病變中，25.3%呈陽性或弱陽性表現(xiàn)，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

TTF-1也稱為甲狀腺特異增強(qiáng)子結(jié)合蛋白，是NKX基因家族中的同源轉(zhuǎn)錄因子之一，由NKX2.1基因所編碼，位于人類14q13。TTF-1常在甲狀腺濾泡細(xì)胞、濾泡旁C細(xì)胞中表達(dá)，是一種器官特異性的轉(zhuǎn)錄因子[5]，其在甲狀腺、肺、間腦的器官形成及甲狀腺球蛋白、甲狀腺過氧化物酶等蛋白的形成過程中起重要作用。研究表明，TTF-1在濾泡細(xì)胞衍生的腫瘤，濾泡性腺瘤、PTC、濾泡癌中陽性表達(dá)率高達(dá)83%～100%[6]。未分化癌的陽性表達(dá)率較低，為0～25%，均呈灶性表達(dá)。在本研究4種蛋白標(biāo)志物中，TTF-1對診斷PTC具有較高的特異性（94.3%），僅很少良性結(jié)節(jié)出現(xiàn)TTF-1弱陽性。TTF-1在PTC和良性結(jié)節(jié)中的陽性率分別為55.6%和3.2%，其對PTC診斷的敏感性低于其他3種標(biāo)志物。

是細(xì)胞癌基因之一，其編碼產(chǎn)物與表皮生長因子受體50%同源，主要參與細(xì)胞的分裂和生長，且屬于酪氨酸激酶受體家族。HER-2/neu于胚胎發(fā)育期開始表達(dá)，成年后的正常組織中僅可檢測到少量HER-2/neu基因。正常情況下，該基因處于非激活狀態(tài)。HBME-1是間皮細(xì)胞表面微絨毛的一種抗原，為酸性氨基酸多聚糖蛋白，主要成份為透明質(zhì)酸，已用于內(nèi)皮細(xì)胞來源腫瘤的診斷。有學(xué)者認(rèn)為HBME-1是PTC較好的標(biāo)志。黃堃等[8]發(fā)現(xiàn)HBME-1表達(dá)陽性率在45例甲狀腺惡性腫瘤中為88.9%，而在86例甲狀腺良性病變中則為12.8%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究發(fā)現(xiàn)，HBME-1在PTC中的陽性率為77.8%，但在甲狀腺良性結(jié)節(jié)中的陽性率僅為5.3%，對于PTC診斷具有較高的特異性（94.7%）。

聯(lián)合檢測多種指標(biāo)對于提高PTC診斷的準(zhǔn)確性始終存在爭議，文獻(xiàn)報(bào)道HBME-1、CK19、galectin-3等指標(biāo)聯(lián)合檢測診斷PTC具有敏感性和特異性高的意義，但對于Ki67、TTF-1與其他標(biāo)志物聯(lián)合檢測的報(bào)道少見。本研究發(fā)現(xiàn)，在4種蛋白標(biāo)志物中，聯(lián)合檢測Ki67和TTF-1以及HER-2/neu和HBME-1對診斷PTC的敏感性未見明顯提高。然而，Ki67、TTF-1分別與HER-2/neu或HBME-1聯(lián)合、，對診斷PTC的敏感性和特異性明顯提高（P<0.01）。Ki67、HER-2/neu和HBME-1的3者聯(lián)合檢測具有最高的敏感性（89.8%），其次為Ki67、HER-2/neu、HBME-1和TTF-1的聯(lián)合檢測，敏感性為88.3%。HER-2/neu、HBME-1和TTF-1的聯(lián)合檢測以及HER-2/neu和TTF-1的聯(lián)合檢測具有最高的特異性（99.4%）。

綜上所述，Ki67和TTF-1標(biāo)志物在聯(lián)合HER-2/neu或（和）HBME-1檢測時(shí)，與檢測4者中單項(xiàng)指標(biāo)相比，可顯著提高診斷敏感性和特異性，所以在檢測Ki67和TTF-1時(shí)，若聯(lián)合其他標(biāo)志物共同檢測可提高對PTC診斷的準(zhǔn)確度，而僅HER-2/neu與HBME-1的聯(lián)合檢驗(yàn)，對于提高PTC診斷的準(zhǔn)確率意義不大。

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（收稿日期：2014-03-25）